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shRNA沉默HDAC1基因增强卵巢癌耐受顺铂细胞SKOV3/DDP对顺铂的敏感性

前言第4-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-10页
英文缩写词表第15-16页
第一章 文献综述第16-27页
    1.1 肿瘤多药耐药的机制第16-21页
        1.1.1 转运相关蛋白介导的 MDR第16-18页
        1.1.2 酶介导的 MDR第18-19页
        1.1.3 抗凋亡基因介导的 MDR第19-20页
        1.1.4 DNA 修复相关的 MDR第20页
        1.1.5 细胞因子介导的 MDR第20-21页
    1.2 肿瘤多药耐药的逆转第21-22页
        1.2.1 转运蛋白介导产生的 MDR 的逆转机制第21页
        1.2.2 酶介导的 MDR 的逆转机制第21页
        1.2.3 基因介导的 MDR 的逆转机制第21-22页
        1.2.4 细胞因子介导的 MDR 逆转机制第22页
        1.2.5 其它逆转方法第22页
    1.3 卵巢癌多药耐药第22-23页
    1.4 HDACs 简介第23-24页
        1.4.1 HDACs 的分类第23页
        1.4.2 HDACs 的功能及其与肿瘤的关系第23-24页
    1.5 RNAi 技术第24-27页
        1.5.1 RNAi 技术的来历第24页
        1.5.2 miRNA第24-26页
        1.5.3 siRNA第26页
        1.5.4 shRNA第26-27页
第二章 SKOV3/DDP 细胞株耐药性的检测第27-35页
    2.1 实验器材第27-28页
        2.1.1 细胞株第27页
        2.1.2 主要仪器第27页
        2.1.3 主要试剂第27页
        2.1.4 主要试剂的配制第27-28页
    2.2 实验方法第28-31页
        2.2.1 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞的培养第28-29页
        2.2.2 检测 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞对顺铂的敏感性第29-31页
        2.2.3 统计学分析第31页
    2.3 实验结果第31-35页
        2.3.1 SKOV3 细胞与 SKOV3/DDP 细胞的形态学差异第31-32页
        2.3.2 DDP 对 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞生长的影响第32-33页
        2.3.3 不同浓度 DDP 对 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞增殖抑制率(%)的影响第33-35页
第三章 shRNA HDAC1 质粒干扰效率的鉴定第35-53页
    3.1 实验器材第35-37页
        3.1.1 主要仪器第35页
        3.1.2 主要试剂第35-36页
        3.1.3 主要试剂的配制第36-37页
    3.2 实验方法第37-48页
        3.2.1 shRNA HDAC1 干扰质粒的获得第37-39页
        3.2.2 重组质粒的鉴定第39-42页
        3.2.3 重组质粒的大量提取第42-43页
        3.2.4 脂质体转染法将重组质粒导入 SKOV3/DDP 细胞第43-44页
        3.2.5 Trizol 法提取总 RNA第44-45页
        3.2.6 RNA 电泳检测 mRNA 完整性第45页
        3.2.7 mRNA 逆转录反应第45-46页
        3.2.8 PCR 扩增第46-47页
        3.2.9 统计学分析第47-48页
    3.3 实验结果第48-53页
        3.3.1 质粒酶切结果第48-49页
        3.3.2 质粒测序结果第49-50页
        3.3.3 荧光显微镜下观察重组质粒的转染效率第50页
        3.3.4 mRNA 完整性的鉴定第50-51页
        3.3.5 RT-PCR 结果第51-53页
第四章 shRNA 沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞的影响第53-61页
    4.1 实验器材第53页
        4.1.1 主要仪器第53页
        4.1.2 主要试剂第53页
    4.2 实验方法第53-57页
        4.2.1 Real-time PCR 法检测沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞中MDR1、bcl-2、bax mRNA 表达的影响第53-55页
        4.2.2 流式细胞术检测沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞凋亡的影响第55-56页
        4.2.3 MTT 法检测沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞对 DDP 敏感性的改变第56页
        4.2.4 统计学分析第56-57页
    4.3 实验结果第57-61页
        4.3.1 沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞中 MDR1、Bcl-2、BaxmRNA 的表达第57-58页
        4.3.2 沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞凋亡的影响第58-59页
        4.3.3 沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞对 DDP 敏感性的改变第59-61页
第五章 结论第61-62页
第六章 讨论第62-66页
参考文献第66-72页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第72-73页
致谢第73页

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