前言 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩写词表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-27页 |
1.1 肿瘤多药耐药的机制 | 第16-21页 |
1.1.1 转运相关蛋白介导的 MDR | 第16-18页 |
1.1.2 酶介导的 MDR | 第18-19页 |
1.1.3 抗凋亡基因介导的 MDR | 第19-20页 |
1.1.4 DNA 修复相关的 MDR | 第20页 |
1.1.5 细胞因子介导的 MDR | 第20-21页 |
1.2 肿瘤多药耐药的逆转 | 第21-22页 |
1.2.1 转运蛋白介导产生的 MDR 的逆转机制 | 第21页 |
1.2.2 酶介导的 MDR 的逆转机制 | 第21页 |
1.2.3 基因介导的 MDR 的逆转机制 | 第21-22页 |
1.2.4 细胞因子介导的 MDR 逆转机制 | 第22页 |
1.2.5 其它逆转方法 | 第22页 |
1.3 卵巢癌多药耐药 | 第22-23页 |
1.4 HDACs 简介 | 第23-24页 |
1.4.1 HDACs 的分类 | 第23页 |
1.4.2 HDACs 的功能及其与肿瘤的关系 | 第23-24页 |
1.5 RNAi 技术 | 第24-27页 |
1.5.1 RNAi 技术的来历 | 第24页 |
1.5.2 miRNA | 第24-26页 |
1.5.3 siRNA | 第26页 |
1.5.4 shRNA | 第26-27页 |
第二章 SKOV3/DDP 细胞株耐药性的检测 | 第27-35页 |
2.1 实验器材 | 第27-28页 |
2.1.1 细胞株 | 第27页 |
2.1.2 主要仪器 | 第27页 |
2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-31页 |
2.2.1 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞的培养 | 第28-29页 |
2.2.2 检测 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞对顺铂的敏感性 | 第29-31页 |
2.2.3 统计学分析 | 第31页 |
2.3 实验结果 | 第31-35页 |
2.3.1 SKOV3 细胞与 SKOV3/DDP 细胞的形态学差异 | 第31-32页 |
2.3.2 DDP 对 SKOV3 细胞及 SKOV3/DDP 细胞生长的影响 | 第32-33页 |
2.3.3 不同浓度 DDP 对 SKOV3 及 SKOV3/DDP 细胞增殖抑制率(%)的影响 | 第33-35页 |
第三章 shRNA HDAC1 质粒干扰效率的鉴定 | 第35-53页 |
3.1 实验器材 | 第35-37页 |
3.1.1 主要仪器 | 第35页 |
3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
3.1.3 主要试剂的配制 | 第36-37页 |
3.2 实验方法 | 第37-48页 |
3.2.1 shRNA HDAC1 干扰质粒的获得 | 第37-39页 |
3.2.2 重组质粒的鉴定 | 第39-42页 |
3.2.3 重组质粒的大量提取 | 第42-43页 |
3.2.4 脂质体转染法将重组质粒导入 SKOV3/DDP 细胞 | 第43-44页 |
3.2.5 Trizol 法提取总 RNA | 第44-45页 |
3.2.6 RNA 电泳检测 mRNA 完整性 | 第45页 |
3.2.7 mRNA 逆转录反应 | 第45-46页 |
3.2.8 PCR 扩增 | 第46-47页 |
3.2.9 统计学分析 | 第47-48页 |
3.3 实验结果 | 第48-53页 |
3.3.1 质粒酶切结果 | 第48-49页 |
3.3.2 质粒测序结果 | 第49-50页 |
3.3.3 荧光显微镜下观察重组质粒的转染效率 | 第50页 |
3.3.4 mRNA 完整性的鉴定 | 第50-51页 |
3.3.5 RT-PCR 结果 | 第51-53页 |
第四章 shRNA 沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞的影响 | 第53-61页 |
4.1 实验器材 | 第53页 |
4.1.1 主要仪器 | 第53页 |
4.1.2 主要试剂 | 第53页 |
4.2 实验方法 | 第53-57页 |
4.2.1 Real-time PCR 法检测沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞中MDR1、bcl-2、bax mRNA 表达的影响 | 第53-55页 |
4.2.2 流式细胞术检测沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞凋亡的影响 | 第55-56页 |
4.2.3 MTT 法检测沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞对 DDP 敏感性的改变 | 第56页 |
4.2.4 统计学分析 | 第56-57页 |
4.3 实验结果 | 第57-61页 |
4.3.1 沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞中 MDR1、Bcl-2、BaxmRNA 的表达 | 第57-58页 |
4.3.2 沉默 HDAC1 对 SKOV3/DDP 细胞凋亡的影响 | 第58-59页 |
4.3.3 沉默 HDAC1 后 SKOV3/DDP 细胞对 DDP 敏感性的改变 | 第59-61页 |
第五章 结论 | 第61-62页 |
第六章 讨论 | 第62-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |