摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
文献综述 | 第14-25页 |
第一章 类固醇激素和雌性哺乳动物生殖 | 第14-18页 |
1.1 类固醇激素的生成 | 第14页 |
1.2 类固醇激素 | 第14-16页 |
1.2.1 雌激素 | 第14页 |
1.2.2 雌激素受体 | 第14-15页 |
1.2.3 孕酮 | 第15页 |
1.2.4 孕酮受体 | 第15-16页 |
1.3 类固醇激素在发情周期及早期妊娠中的调节变化 | 第16-18页 |
第二章 内质网应激和雌性哺乳动物生殖 | 第18-25页 |
2.1 内质网应激和未折叠蛋白反应 | 第18-19页 |
2.2 内质网应激和细胞凋亡 | 第19页 |
2.3 卵泡发育和闭锁 | 第19-22页 |
2.3.1 卵泡发育 | 第19-21页 |
2.3.2 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡 | 第21-22页 |
2.3.3 内质网应激与卵泡闭锁,颗粒细胞凋亡 | 第22页 |
2.4 内质网应激与雌性动物生殖 | 第22-23页 |
2.5 XBP1的结构和功能 | 第23-25页 |
2.5.1 XBP1的发现及结构特点 | 第23-24页 |
2.5.2 XBP1的生物学功能 | 第24-25页 |
实验研究 | 第25-78页 |
第三章 雌激素与孕酮对XBP1表达的调节 | 第25-40页 |
3.1 材料和仪器设备 | 第25-26页 |
3.1.1 材料和试剂 | 第25-26页 |
3.1.2 仪器设备 | 第26页 |
3.1.3 试验动物 | 第26页 |
3.2 试验方法 | 第26-31页 |
3.2.1 小鼠发情周期的鉴定 | 第26-27页 |
3.2.2 小鼠的激素处理 | 第27页 |
3.2.3 小鼠子宫内膜基质细胞的分离培养 | 第27页 |
3.2.4 Western blot分析 | 第27-28页 |
3.2.5 石蜡切片的制备和免疫组化 | 第28-29页 |
3.2.6 荧光定量PCR检测 | 第29-31页 |
3.3 结果 | 第31-38页 |
3.3.1 小鼠发情周期的鉴定 | 第31-32页 |
3.3.2 XBP1在小鼠发情周期子宫中的定位表达 | 第32-33页 |
3.3.3 western blot检测发情周期过程中XBP1在小鼠子宫内表达 | 第33-34页 |
3.3.4 免疫组化分析类固醇激素调节XBP1在小鼠子宫中的表达 | 第34页 |
3.3.5 Western blot分析类固醇激素对小鼠子宫中XBP1的表达调控 | 第34-35页 |
3.3.6 免疫组化分析E_2调节XBP1在小鼠子宫中的表达 | 第35-36页 |
3.3.7 Western blot分析E_2调节XBP1在小鼠子宫中的表达 | 第36页 |
3.3.8 免疫组化分析E_2拮抗剂对XBP1在小鼠子宫中表达的调节 | 第36页 |
3.3.9 Western blot分析E_2拮抗剂对XBP1在小鼠子宫中表达的调节 | 第36-37页 |
3.3.10 小鼠子宫内膜基质细胞中P_4对XBP1表达的调节 | 第37页 |
3.3.11 P_4拮抗剂对XBP1在小鼠子宫内膜基质细胞内表达的调节 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-39页 |
3.5 小结 | 第39-40页 |
第四章 小鼠XBP1基因shRNA慢病毒干扰载体的构建 | 第40-52页 |
4.1 材料和仪器设备 | 第40-41页 |
4.1.1 材料和试剂 | 第40-41页 |
4.1.2 仪器和设备 | 第41页 |
4.2 方法 | 第41-46页 |
4.2.1 pCD513B-U6-XBP1-shRNA慢病毒干扰载体的构建 | 第41-44页 |
4.2.3 慢病毒载体的包装 | 第44-45页 |
4.2.4 XBP1干扰慢病毒滴度测定 | 第45页 |
4.2.5 XBP1-shRNA干扰片段的筛选 | 第45-46页 |
4.3 结果 | 第46-49页 |
4.3.1 pCD513B-U6-XBP1-shRNA慢病毒干扰载体的构建 | 第46页 |
4.3.2 XBP1基因慢病毒干扰载体转染HEK293T细胞 | 第46-47页 |
4.3.3 病毒滴度测定 | 第47页 |
4.3.4 pCD513B-U6-XBP1-shRNA慢病毒感染NIH3T3细胞 | 第47-48页 |
4.3.5 XBP1shRNA有效靶点的筛选 | 第48-49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
4.5 小结 | 第51-52页 |
第五章 XBP1在小鼠卵巢颗粒细胞中的功能研究 | 第52-64页 |
5.1 材料和仪器设备 | 第52-54页 |
5.1.1 材料和试剂 | 第52-53页 |
5.1.2 主要仪器 | 第53-54页 |
5.1.3 试验动物 | 第54页 |
5.2 实验方法 | 第54-56页 |
5.2.1 小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养 | 第54页 |
5.2.2 XBP1-shRNA慢病毒颗粒的包装及浓缩 | 第54-55页 |
5.2.3 XBP1-shRNA慢病毒感染小鼠卵巢颗粒细胞 | 第55页 |
5.2.4 小鼠卵巢颗粒细胞的RT-q PCR检测 | 第55页 |
5.2.5 小鼠卵巢颗粒细胞的western blot检测 | 第55页 |
5.2.6 小鼠卵巢颗粒细胞分泌类固醇激素检测 | 第55页 |
5.2.7 小鼠卵巢颗粒细胞周期检测 | 第55页 |
5.2.8 小鼠卵巢颗粒细胞凋亡检测 | 第55-56页 |
5.2.9 小鼠卵巢颗粒细胞增殖检测 | 第56页 |
5.3 结果 | 第56-62页 |
5.3.1 XBP1-shRNA慢病毒转染小鼠卵巢颗粒细胞 | 第56-57页 |
5.3.2 XBP1-shRNA对激素分泌的影响 | 第57-58页 |
5.3.3 XBP1-shRNA对颗粒细胞周期与增殖的影响 | 第58-60页 |
5.3.4 XBP1-shRNA对颗粒细胞凋亡的影响 | 第60-61页 |
5.3.5 XBP1-shRNA干扰对颗粒细胞功能基因的影响 | 第61-62页 |
5.4 讨论 | 第62-63页 |
5.5 小结 | 第63-64页 |
第六章 XBP1及内质网应激在赤霉烯酮引起的山羊子宫内膜上皮细胞凋亡和炎症中的作用 | 第64-78页 |
6.1 材料和仪器设备 | 第64-66页 |
6.1.1 细胞 | 第64页 |
6.1.2 材料和试剂 | 第64-65页 |
6.1.3 仪器和设备 | 第65-66页 |
6.2 实验方法 | 第66页 |
6.2.1 山羊EECs的培养 | 第66页 |
6.2.2 ZEA对山羊EECs活力的影响 | 第66页 |
6.2.3 ZEA对山羊EECs凋亡的影响 | 第66页 |
6.2.4 ZEA对EECs中炎症细胞因子分泌的影响 | 第66页 |
6.2.5 山羊EEC的RT-qPCR检测 | 第66页 |
6.2.6 山羊EECs的western blot检测 | 第66页 |
6.3 结果 | 第66-76页 |
6.3.1 ZEA对EECs活力的影响 | 第66-67页 |
6.3.2 ZEA诱导EECs凋亡 | 第67-68页 |
6.3.3 ZEA对EECs中炎症细胞因子和NF-κB表达的影响 | 第68-70页 |
6.3.4 ZEA对EECs中内质网应激及XBP1表达的影响 | 第70-72页 |
6.3.5 4-PBA降低ZEA诱导的内质网应激蛋白表达的增加 | 第72-73页 |
6.3.6 4-PBA对EECs中ZEA诱导的细胞凋亡的影响 | 第73-74页 |
6.3.7 4-PBA对EECs中ZEA诱导的炎症的影响 | 第74-76页 |
6.4 讨论 | 第76-77页 |
6.5 小结 | 第77-78页 |
结论 | 第78-79页 |
创新点 | 第79-80页 |
进一步研究 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-96页 |
缩略词 | 第96-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
作者简介 | 第99页 |