| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中文文摘 | 第6-11页 |
| 绪论 | 第11-19页 |
| 1 基因编辑 | 第11-15页 |
| 1.1 锌指核酸酶 | 第11-13页 |
| 1.2 类转录激活样效应核酸酶 | 第13-14页 |
| 1.3 规律成簇间隔短回文重复序列 | 第14-15页 |
| 2 BMP信号通路 | 第15-17页 |
| 2.1 BMPs家族 | 第15页 |
| 2.2 BMP信号通路 | 第15-17页 |
| 3 标签蛋白 | 第17页 |
| 4 本研究的意义 | 第17-19页 |
| 第一章 实验材料与方法 | 第19-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第19页 |
| 1.2 实验仪器与软件 | 第19-20页 |
| 1.3 实验试剂 | 第20-22页 |
| 1.4 试剂准备 | 第22-23页 |
| 1.5 实验方法与步骤 | 第23-35页 |
| 1.6 引物序列 | 第35-37页 |
| 第二章 实验结果 | 第37-67页 |
| 第一部分 小鼠Smad1基因sgRNA设计以及制备Smad1-HA-Tag小鼠 | 第37-51页 |
| 2.1 小鼠Smad1基因3'端敲入位点sgRNA的设计与验证 | 第37-42页 |
| 2.1.1 sgRNA的设计 | 第37-38页 |
| 2.1.2 sgRNA载体的构建 | 第38-40页 |
| 2.1.3 sgRNA的打靶检测 | 第40-42页 |
| 2.2 小鼠Smad1基因敲入位点HA标签蛋白的双链DNA donor设计与验证 | 第42-46页 |
| 2.2.1 双链DNA donor的设计 | 第42页 |
| 2.2.2 双链DNA donor的验证 | 第42-46页 |
| 2.3 原核显微技术制备Smad1-HA-Tag小鼠 | 第46-51页 |
| 第二部分 人类SMAD1基因sgRNA设计及制备SMAD1-HA-Tag人牙间充质细胞 | 第51-67页 |
| 2.4 人类SMAD1基因5'端敲入位点sgRNA的设计与验证 | 第51-61页 |
| 2.4.1 sgRNA的设计 | 第51-52页 |
| 2.4.2 sgRNA载体白的构建 | 第52-54页 |
| 2.4.3 sgRNA的打靶检测 | 第54-56页 |
| 2.4.4 sgRNA的脱靶检测 | 第56-61页 |
| 2.5 人类SMAD1基因敲入位点HA蛋白标签的双链DNA donor设计与验证 | 第61-67页 |
| 2.5.1 双链DNA donor的设计 | 第61页 |
| 2.5.2 双链DNA donor的验证 | 第61-67页 |
| 第三章 分析与讨论 | 第67-71页 |
| 第四章 实验结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 个人简历 | 第83-85页 |
