中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 生长素对植物体细胞胚发生的重要作用 | 第11-17页 |
1.1.1 生长素合成 | 第12页 |
1.1.2 生长素的运输 | 第12-13页 |
1.1.3 生长素信号响应 | 第13-15页 |
1.1.4 植物内源激素检测研究进展 | 第15-16页 |
1.1.5 外源生长素与植物体细胞胚发生 | 第16-17页 |
1.1.6 内源生长素与植物体细胞胚发生 | 第17页 |
1.2 microRNA调控植物体细胞胚发生研究进展 | 第17-20页 |
1.2.1 miRNA的合成 | 第18页 |
1.2.2 miRNA的作用机制 | 第18-19页 |
1.2.3 植物miRNA与体细胞胚发生 | 第19页 |
1.2.4 植物miRNA与激素调节 | 第19-20页 |
1.2.5 miR393研究进展 | 第20页 |
1.3 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
2 百合体细胞胚发生过程中生长素含量测定 | 第21-28页 |
2.1 材料与方法 | 第21-22页 |
2.1.1 试验材料 | 第21页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第21页 |
2.1.3 溶液配制 | 第21页 |
2.1.4 激素提取 | 第21页 |
2.1.5 固相萃取 | 第21-22页 |
2.1.6 浓缩 | 第22页 |
2.1.7 质谱条件 | 第22页 |
2.1.8 色谱条件 | 第22页 |
2.2 结果分析 | 第22-26页 |
2.2.1 提取溶剂的选择 | 第22页 |
2.2.2 提取时间的选择 | 第22页 |
2.2.3 质谱条件的选择 | 第22-23页 |
2.2.4 色谱条件的选择 | 第23-24页 |
2.2.5 线性关系和检测极限 | 第24页 |
2.2.6 回收率和准确度 | 第24-25页 |
2.2.7 百合体细胞胚各时期生长素含量变化 | 第25-26页 |
2.3 讨论 | 第26-28页 |
3 lda-miR393b和lpu-miR393b的克隆 | 第28-33页 |
3.1 材料方法 | 第28-31页 |
3.1.1 试验材料 | 第28页 |
3.1.2 主要试剂及仪器 | 第28页 |
3.1.3 RNA提取 | 第28页 |
3.1.4 miR393b特异茎环反转录 | 第28-29页 |
3.1.5 lda-miR393b和lpu-miR393b扩增反应 | 第29-30页 |
3.1.6 PCR产物纯化 | 第30页 |
3.1.7 目的片段的连接、转化和测序 | 第30-31页 |
3.2 结果分析 | 第31-32页 |
3.2.1 细叶百合和兰州百合总RNA提取 | 第31页 |
3.2.2 lpu-miR393b和lda-miR393b的克隆 | 第31-32页 |
3.3 讨论 | 第32-33页 |
4 百合体细胞胚发生过程中miR393b及靶基因TIR1表达分析 | 第33-40页 |
4.1 材料方法 | 第33-35页 |
4.1.1 试验材料 | 第33页 |
4.1.2 主要试剂及仪器 | 第33页 |
4.1.3 RNA提取 | 第33页 |
4.1.4 qRT-PCR引物设计 | 第33页 |
4.1.5 cDNA模板的合成 | 第33页 |
4.1.6 miR393b及其靶基因TIR1的qRT-PCR分析 | 第33-35页 |
4.2 结果分析 | 第35-38页 |
4.2.1 引物特异性分析 | 第35页 |
4.2.2 miR393b及其靶基因TIR1在百合体胚发生过程中表达及关联分析 | 第35-38页 |
4.3 讨论 | 第38-40页 |
总结 | 第40-41页 |
主要创新点 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-50页 |
附录 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |