缩写词 | 第12-15页 |
摘要 | 第15-18页 |
Abstract | 第18-21页 |
第一章 引言 | 第22-35页 |
1 植物体胚发生调控的研究进展 | 第22-24页 |
1.1 激素调控植物体胚发生的研究 | 第22-23页 |
1.2 植物体胚同步化调控的研究 | 第23-24页 |
2 植物体胚发生的基因表达调控研究 | 第24-28页 |
2.1 与植物体胚发生有关的看家基因 | 第25页 |
2.2 与植物体胚发生有关的激素应答基因 | 第25-26页 |
2.3 与植物体胚发生有关的信号转导基因 | 第26页 |
2.4 与植物体胚相关的抗氧化胁迫应答基因 | 第26-27页 |
2.5 其它与植物体胚发生相关的基因 | 第27-28页 |
3 植物体胚发生的蛋白质组学研究进展 | 第28-31页 |
3.1 植物蛋白质组学及其研究技术 | 第28-30页 |
3.2 植物体胚发生的蛋白质组学研究 | 第30-31页 |
4 龙眼体胚发生的蛋白质组学研究 | 第31-32页 |
5 本研究的意义和主要内容 | 第32-35页 |
5.1 本研究的意义 | 第32-33页 |
5.2 本研究的主要内容 | 第33-35页 |
第二章 龙眼体胚发生早期胚性培养物高分辨率蛋白质双向电泳技术的建立 | 第35-50页 |
第一节龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物获取 | 第35-39页 |
1 材料与方法 | 第36-37页 |
1.1 材料 | 第36页 |
1.2 方法 | 第36-37页 |
1.2.1 龙眼胚性愈伤组织的继代保持 | 第36-37页 |
1.2.2 龙眼体胚发生的同步化调控 | 第37页 |
1.2.3 培养条件 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-38页 |
2.1 龙眼胚性愈伤组织的长期继代保持 | 第37页 |
2.2 龙眼体胚发生早期各阶段材料的同步化培养 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-39页 |
第二节龙眼体胚发生早期胚性培养物高分辨率蛋白质双向电泳技术的建立 | 第39-44页 |
1 材料与方法 | 第39-41页 |
1.1 材料 | 第39页 |
1.2 方法 | 第39-41页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物蛋白样品制备 | 第39-40页 |
1.2.2 蛋白定量 | 第40页 |
1.2.3 第一向等电聚焦 | 第40页 |
1.2.4 第二向SDS-PAGE | 第40-41页 |
1.2.5 凝胶染色 | 第41页 |
1.2.6 凝胶扫描与分析 | 第41页 |
2 结果与分析 | 第41-44页 |
2.1 小型垂直板双向电泳与固相pH 梯度凝胶双向电泳 | 第41-42页 |
2.2 IPG 胶条的pH 范围选择 | 第42-43页 |
2.3 龙眼不同体胚发育阶段蛋白质双向电泳图谱的比较 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44页 |
第三节龙眼体胚发生早期胚性培养物蛋白质双向电泳技术的优化 | 第44-50页 |
1 材料与方法 | 第44-46页 |
1.1 材料 | 第44页 |
1.2 方法 | 第44-46页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物蛋白样品制备 | 第45页 |
1.2.2 第一向固相pH 梯度凝胶等电聚焦 | 第45页 |
1.2.3 第二向SDS-PAGE | 第45-46页 |
1.2.4 凝胶染色 | 第46页 |
1.2.5 凝胶扫描与分析 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-48页 |
2.1 不同IPGphor III 运行条件对龙眼胚性培养物蛋白质2D 电泳图谱的影响 | 第46-47页 |
2.2 第二向SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶对龙眼胚性培养物蛋白质2D 电泳图谱的影响 | 第47页 |
2.3 不同长度的IPG 胶条对龙眼胚性培养物蛋白质2D 电泳图谱分辨率的影响 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第三章 龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物蛋白质双向电泳分析 | 第50-75页 |
1 材料与方法 | 第51-52页 |
1.1 材料 | 第51页 |
1.2 方法 | 第51-52页 |
1.2.1 龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物可溶性蛋白含量测定 | 第51页 |
1.2.2 龙眼胚性培养物蛋白样品制备 | 第51页 |
1.2.3 双向电泳 | 第51页 |
1.2.4 染色 | 第51页 |
1.2.5 图像采集和分析 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-72页 |
2.1 龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物可溶性蛋白质含量变化 | 第52-53页 |
2.2 龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物蛋白质双向电泳图谱分析 | 第53-59页 |
2.2.1 双向电泳图谱总蛋白点数目变化趋势分析 | 第53-56页 |
2.2.2 龙眼体胚发生早期各阶段蛋白点表达情况分析 | 第56-57页 |
2.2.3 龙眼体胚发生早期各阶段不同等电点(pI)蛋白点数变化分析 | 第57-58页 |
2.2.4 龙眼体胚发生早期各阶段不同分子量(MW)蛋白点数变化分析 | 第58-59页 |
2.3 龙眼体胚发生早期各阶段部分差异表达蛋白分析 | 第59-71页 |
2.4 进行质谱鉴定蛋白点表达丰度分析 | 第71-72页 |
3 讨论 | 第72-75页 |
3.1 龙眼体胚发生早期蛋白质组学研究的重要性 | 第72-73页 |
3.2 龙眼体胚发生早期是体胚发育的决定性时期 | 第73页 |
3.3 龙眼体胚发生早期过程的关键阶段 | 第73-74页 |
3.4 龙眼体胚发生早期蛋白质差异或特异表达是基因网络调控的结果 | 第74-75页 |
第四章 龙眼体胚发生早期各阶段部分差异表达蛋白质的质谱分析 | 第75-94页 |
1 材料与方法 | 第75-77页 |
1.1 材料 | 第75页 |
1.2 方法 | 第75-77页 |
1.2.1 蛋白质的MALDI-TOF 质谱分析 | 第76页 |
1.2.2 蛋白质的数据库检索 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-91页 |
2.1 龙眼体胚发生早期各阶段胚性培养物部分蛋白点的质谱鉴定 | 第77-84页 |
2.1.1 蛋白质的质谱鉴定 | 第77-82页 |
2.1.2 蛋白质鉴定质谱图分析 | 第82-84页 |
2.2 龙眼体胚发生早期主要功能群蛋白质分析 | 第84-91页 |
2.2.1 能量和糖代谢相关蛋白 | 第84-86页 |
2.2.2 信号转导与细胞凋亡有关的蛋白 | 第86-87页 |
2.2.3 调控相关蛋白 | 第87-88页 |
2.2.4 胁迫反应和防御相关的蛋白 | 第88-90页 |
2.2.5 细胞结构蛋白 | 第90页 |
2.2.6 蛋白质合成、折叠、组装和分解相关蛋白 | 第90-91页 |
3 讨论 | 第91-94页 |
3.1 能量代谢和糖代谢是龙眼体胚发生的基础 | 第91-92页 |
3.2 胁迫反应是龙眼体胚发生的先决条件 | 第92-93页 |
3.3 从蛋白质水平解释龙眼体胚发生早期基因表达 | 第93-94页 |
第五章 龙眼体胚发生早期部分相关蛋白基因的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第94-159页 |
第一节 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP合酶β亚基基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中表达 | 第95-106页 |
1 材料与方法 | 第96-98页 |
1.1 材料 | 第96页 |
1.2 方法 | 第96-98页 |
1.2.1 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因保守区序列克隆 | 第96页 |
1.2.2 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因3'端序列克隆 | 第96-97页 |
1.2.3 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因5′端序列克隆 | 第97页 |
1.2.4 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因全长开放阅读框(ORF)的克隆 | 第97页 |
1.2.5 PCR 产物回收与测序 | 第97-98页 |
1.2.6 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因序列拼接及生物信息学分析 | 第98页 |
1.2.7 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因在龙眼体胚发育不同阶段的表达 | 第98页 |
2 结果与分析 | 第98-104页 |
2.1 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因序列的克隆 | 第98-99页 |
2.2 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因测序结果与序列分析 | 第99-100页 |
2.3 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因编码蛋白理化性质与结构特征分析 | 第100-101页 |
2.4 从线粒体ATP 合酶β亚基基因序列分支图看龙眼在生物界中的系统位置 | 第101-102页 |
2.5 龙眼体胚不同发育阶段胚性培养物中线粒体ATP 合酶β亚基基因的转录水平分析 | 第102-104页 |
3 讨论 | 第104-106页 |
3.1 龙眼线粒体ATP 合酶β亚基基因类型及其蛋白质导肽的确定 | 第104-105页 |
3.2 线粒体ATP 合酶基因与龙眼体胚发生的关系 | 第105-106页 |
3.3 线粒体ATP 合酶β亚基基因在生物系统进化研究上的价值 | 第106页 |
第二节 龙眼胚性愈伤组织磷酸丙糖异构酶基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中表达 | 第106-121页 |
1 材料与方法 | 第107-109页 |
1.1 材料 | 第107页 |
1.2 方法 | 第107-109页 |
1.2.1 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因保守区序列克隆 | 第107页 |
1.2.2 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因3'端序列克隆 | 第107-108页 |
1.2.3 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因5′端序列克隆 | 第108页 |
1.2.4 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因全长开放阅读框(ORF)的克隆 | 第108页 |
1.2.5 龙眼胚性愈伤组织2 个类型TPI 基因克隆 | 第108-109页 |
1.2.6 PCR 产物回收与测序 | 第109页 |
1.2.7 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第109页 |
1.2.8 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因在龙眼体胚发育不同阶段的表达 | 第109页 |
2 结果与分析 | 第109-120页 |
2.1 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因2 个类型序列的克隆 | 第109-111页 |
2.2 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因2 个类型测序结果与序列分析 | 第111-115页 |
2.3 龙眼胚性愈伤组织TPI 基因编码蛋白理化性质与结构特征分析 | 第115-117页 |
2.3.1 TPI 基因类型I(TPI_I)编码蛋白TPI_I | 第115-116页 |
2.3.2 TPI 基因类型I(TPI_II)编码蛋白TPI_II | 第116-117页 |
2.4 从TPI_I 和TPI_II 基因序列推导的氨基酸序列分支图看龙眼在生物界中的系统位置 | 第117-118页 |
2.5 龙眼体胚不同发育阶段胚性培养物中TPI 基因的转录水平分析 | 第118-120页 |
3 讨论 | 第120-121页 |
3.1 龙眼2 个TPI 基因类型的确定 | 第120页 |
3.2 龙眼TPI 基因与龙眼体胚发生的关系 | 第120-121页 |
3.3 龙眼 TPI 基因在生物进化上的利用价值 | 第121页 |
第三节 龙眼体胚发生早期胚性培养物未知蛋白DlUP-3 基因(Dimocarpus longan unknown protein 3)克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达 | 第121-133页 |
1 材料与方法 | 第121-123页 |
1.1 材料 | 第121页 |
1.2 方法 | 第121-123页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因保守区序列克隆 | 第121-122页 |
1.2.2 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因3'端序列克隆 | 第122页 |
1.2.3 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因5′端序列克隆 | 第122页 |
1.2.4 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因全长开放阅读框(ORF)的克隆 | 第122页 |
1.2.5 PCR 产物回收与测序 | 第122-123页 |
1.2.6 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第123页 |
1.2.7 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因在龙眼体胚发育不同阶段的表达 | 第123页 |
2 结果与分析 | 第123-132页 |
2.1 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因序列的克隆 | 第123-124页 |
2.2 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因测序结果与序列分析 | 第124-125页 |
2.3 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白理化性质与结构特征分析 | 第125-129页 |
2.3.1 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白质理化性质预测分析 | 第125页 |
2.3.2 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白同源蛋白质家族比较分析 | 第125-126页 |
2.3.3 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白亚细胞定位、信号肽和跨膜结构的预测 | 第126-127页 |
2.3.4 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白二级结构预测 | 第127-128页 |
2.3.5 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白磷酸化位点的预测分析 | 第128页 |
2.3.6 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白功能位点分析 | 第128-129页 |
2.3.7 龙眼胚性培养物DlUP-3 蛋白保守结构域与功能域分析 | 第129页 |
2.4 龙眼体胚不同发育阶段胚性培养物中DlUP-3 基因的转录水平分析 | 第129-132页 |
3 讨论 | 第132-133页 |
3.1 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因的推测功能及其在龙眼体胚发生早期的作用 | 第132页 |
3.2 龙眼胚性培养物DlUP-3 基因与龙眼体胚发生的关系 | 第132-133页 |
3.3 龙眼胚性培养物未知功能蛋白基因克隆的重要性 | 第133页 |
第四节 龙眼体胚发生早期胚性培养物未知蛋白DlUP-4 基因(Dimocarpus longan unknown protein 4)克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达 | 第133-143页 |
1 材料与方法 | 第133-135页 |
1.1 材料 | 第133页 |
1.2 方法 | 第133-135页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因保守区序列克隆 | 第133-134页 |
1.2.2 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因3'端序列克隆 | 第134页 |
1.2.3 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因5′端序列克隆 | 第134页 |
1.2.4 龙眼胚性培养物DlUP-4基因全长开放阅读框(ORF)的克隆 | 第134页 |
1.2.5 PCR 产物回收与测序 | 第134页 |
1.2.6 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第134-135页 |
1.2.7 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因在龙眼体胚发育不同阶段的表达 | 第135页 |
2 结果与分析 | 第135-143页 |
2.1 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因序列的克隆 | 第135页 |
2.2 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因测序结果与序列分析 | 第135-136页 |
2.3 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白理化性质与结构特征分析 | 第136-140页 |
2.3.1 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白质理化性质预测与分析 | 第137页 |
2.3.2 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白质同源蛋白质家族比较分析 | 第137页 |
2.3.3 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白亚细胞定位、信号肽和跨膜结构的预测 | 第137-138页 |
2.3.4 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白二级结构预测 | 第138-139页 |
2.3.5 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白磷酸化位点的预测分析 | 第139-140页 |
2.3.6 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白功能位点分析 | 第140页 |
2.3.7 龙眼胚性培养物DlUP-4 蛋白保守结构域与功能域分析 | 第140页 |
2.4 龙眼体胚不同发育阶段胚性培养物中DlUP-4 基因的转录水平分析 | 第140-143页 |
3 讨论 | 第143页 |
3.1 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因推断的功能 | 第143页 |
3.2 龙眼胚性培养物DlUP-4 基因与龙眼体胚发生的关系 | 第143页 |
第五节龙眼体胚发生早期胚性培养物未知蛋白DlUP-5 基因(Dimocarpus longan unknown protein 5)克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达 | 第143-153页 |
1 材料与方法 | 第144-145页 |
1.1 材料 | 第144页 |
1.2 方法 | 第144-145页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因保守区序列克隆 | 第144页 |
1.2.2 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因3'端序列克隆 | 第144页 |
1.2.3 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因5′端序列克隆 | 第144页 |
1.2.4 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因全长开放阅读框(ORF)的克隆 | 第144-145页 |
1.2.5 PCR 产物回收与测序 | 第145页 |
1.2.6 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第145页 |
1.2.7 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因在龙眼体胚发育不同阶段的表达 | 第145页 |
2 结果与分析 | 第145-153页 |
2.1 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因序列的克隆 | 第145-146页 |
2.2 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因测序结果与序列分析 | 第146-147页 |
2.3 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白理化性质与结构特征分析 | 第147-151页 |
2.3.1 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白质理化性质预测与分析 | 第147页 |
2.3.2 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白同源蛋白质家族比较分析 | 第147-148页 |
2.3.3 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白亚细胞定位、信号肽和跨膜结构的预测 | 第148-149页 |
2.3.4 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白二级结构预测 | 第149页 |
2.3.5 龙眼胚性培养物DlUP-5 蛋白磷酸化位点的预测分析 | 第149-150页 |
2.3.6 龙眼体胚DlUP-5 蛋白功能位点分析 | 第150页 |
2.3.7 龙眼体胚DlUP-5 蛋白保守结构域与功能域分析 | 第150-151页 |
2.4 龙眼体胚不同发育阶段胚性培养物中DlUP-5 基因的转录水平分析 | 第151-153页 |
3 讨论 | 第153页 |
3.1 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因功能的推断 | 第153页 |
3.2 龙眼胚性培养物DlUP-5 基因与龙眼体胚发生的关系 | 第153页 |
第六节 龙眼体胚发生早期胚性培养物未知蛋白DlUP-6 和DlUP-7 基因克隆 | 第153-159页 |
1 材料与方法 | 第154-155页 |
1.1 材料 | 第154页 |
1.2 方法 | 第154-155页 |
1.2.1 龙眼胚性培养物DlUP-6 基因保守区序列克隆 | 第154页 |
1.2.2 龙眼胚性培养物DlUP-6 基因3'端序列克隆 | 第154页 |
1.2.3 龙眼胚性培养物DlUP-7 基因保守区序列克隆 | 第154-155页 |
1.2.4 龙眼胚性培养物DlUP-7 基因3'端序列克隆 | 第155页 |
1.2.5 PCR 产物回收与测序 | 第155页 |
1.2.6 龙眼胚性培养物DlUP-6 和DlUP-7 基因部分序列拼接及生物信息学分析 | 第155页 |
2 结果与分析 | 第155-158页 |
2.1 龙眼胚性培养物DlUP-6 和DlUP-7 基因部分cDNA 片段的克隆 | 第155-156页 |
2.1.1 龙眼胚性培养物DlUP-6基因部分cDNA片段克隆 | 第155页 |
2.1.2 龙眼胚性培养物DlUP-7基因部分cDNA片段克隆 | 第155-156页 |
2.2 龙眼胚性培养物DlUP-6 基因和DlUP-7 基因部分cDNA 片段的测序结果与序列分析 | 第156-158页 |
2.2.1 DlUP-6 基因 | 第156-157页 |
2.2.2 DlUP-7 基因 | 第157-158页 |
3 讨论 | 第158-159页 |
3.1 龙眼体胚发生早期胚性培养物DlUP-6 基因功能的推断 | 第158页 |
3.2 龙眼体胚发生早期胚性培养物DlUP-7 基因功能预测 | 第158页 |
3.3 龙眼体胚发生早期胚性培养物未知蛋白克隆 | 第158-159页 |
第六章 小结 | 第159-165页 |
1 建立龙眼体胚发生早期胚性培养物高分辨率双向电泳技术 | 第159-160页 |
2 龙眼体胚发生早期各阶段蛋白质双向电泳分析 | 第160-161页 |
2.1 龙眼体胚发生早期各阶段可溶性蛋白与蛋白质数目的变化 | 第160页 |
2.2 龙眼体胚发生早期各阶段蛋白质等电点(pI)和分子量(MW)的变化 | 第160-161页 |
2.3 龙眼体胚发生早期各阶段蛋白质的差异表达 | 第161页 |
3 龙眼体胚发生早期各阶段部分差异蛋白的质谱鉴定和相关蛋白质的功能 | 第161-162页 |
4 龙眼体细胞胚胎发生早期部分相关蛋白基因的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第162-165页 |
4.1 龙眼胚性愈伤组织线粒体ATP 合酶β亚基基因克隆及其表达分析 | 第162页 |
4.2 龙眼胚性愈伤组织磷酸丙糖异构酶基因克隆及其表达分析 | 第162-163页 |
4.3 龙眼体胚未知蛋白及未知功能蛋白基因克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第163-165页 |
参考文献 | 第165-180页 |
附录 Ⅰ | 第180-229页 |
附录 Ⅱ | 第229-236页 |
附录 Ⅲ | 第236-259页 |
附录 Ⅳ | 第259-274页 |
博士学习期间发表的论文 | 第274-276页 |
致谢 | 第276页 |