| 本论文创新点 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 缩写 | 第14-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-44页 |
| 1 核膜的结构与功能 | 第15-25页 |
| 1.1 核膜的结构和组成 | 第15-22页 |
| 1.2 核膜的功能 | 第22-25页 |
| 2 核膜蛋白相关疾病 | 第25-30页 |
| 2.1 LMNA相关疾病 | 第25-27页 |
| 2.2 细胞核膜相关的疾病 | 第27-29页 |
| 2.3 核孔蛋白以及相关蛋白引起的疾病 | 第29-30页 |
| 3 核膜内层蛋白Nurim | 第30-41页 |
| 3.1 Nurim是一种新型核膜内层蛋白 | 第30-35页 |
| 3.2 Nurim的生化特性和结构特点 | 第35-41页 |
| 4 研究前景 | 第41-42页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第42-44页 |
| 第二章 Nurim基因的选择性剪接和表达部位分析 | 第44-70页 |
| 1 引言 | 第44-45页 |
| 2 实验材料 | 第45-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-59页 |
| 3.1 总RNA提取 | 第47-48页 |
| 3.2 cDNA模板的制备 | 第48-49页 |
| 3.3 PCR扩增人类Nurim不同转录本 | 第49-50页 |
| 3.4 载体构建 | 第50-54页 |
| 3.5 序列测定及分析 | 第54-55页 |
| 3.6 进化树构建 | 第55页 |
| 3.7 蛋白质的提取 | 第55页 |
| 3.8 Western blot | 第55-57页 |
| 3.9 冰冻切片 | 第57页 |
| 3.10 HE染色 | 第57-58页 |
| 3.11 冰冻切片免疫荧光 | 第58-59页 |
| 4 实验结果 | 第59-67页 |
| 4.1 Nurim是一个睾丸癌特异表达的基因 | 第59-60页 |
| 4.2 Nurim的选择性剪接分析 | 第60-61页 |
| 4.3 Nurim不同物种的进化树构建 | 第61-63页 |
| 4.4 Nurim在小鼠正常组织中的表达差异 | 第63页 |
| 4.5 Nurim在小鼠正常组织中的表达部位 | 第63-65页 |
| 4.6 Nurim在小鼠胚胎发育中的表达 | 第65-66页 |
| 4.7 Nurim在小鼠胚胎发育中的表达部位 | 第66-67页 |
| 5 讨论 | 第67-70页 |
| 5.1 外显子跳跃 | 第67-68页 |
| 5.2 选择性剪接与膜蛋白的功能 | 第68-69页 |
| 5.3 Nurim可能具有组织特异性的生理功能 | 第69-70页 |
| 第三章 Nurim在人类肿瘤组织中的表达 | 第70-79页 |
| 1 引言 | 第70-71页 |
| 2 实验材料 | 第71页 |
| 2.1 主要试剂 | 第71页 |
| 2.2 所用仪器 | 第71页 |
| 3 实验方法 | 第71-73页 |
| 3.1 石蜡切片免疫荧光 | 第71-72页 |
| 3.2 石蜡切片HE染色 | 第72页 |
| 3.3 SAGE和eNorthern分析 | 第72-73页 |
| 4 实验结果 | 第73-76页 |
| 4.1 Nurim在人类肿瘤标本中的表达差异 | 第73页 |
| 4.2 Nurim在人类肿瘤标本中的表达部位 | 第73-75页 |
| 4.3 生物信息学分析Nurim在人类的正常组织和肿瘤组织的表达量的差异 | 第75-76页 |
| 4.4 Nurim在小鼠正常组织和人类肿瘤组织中的表达部位异同比较 | 第76页 |
| 5 讨论 | 第76-79页 |
| 5.1 Nurim在肿瘤中广泛表达 | 第76-77页 |
| 5.2 Nurim在B cell中表达 | 第77页 |
| 5.3 肿瘤特异的选择性剪接 | 第77-79页 |
| 第四章 Nurim蛋白的核膜定位分析 | 第79-100页 |
| 1 引言 | 第79-80页 |
| 2 实验材料 | 第80页 |
| 2.1 主要材料 | 第80页 |
| 2.2 所用仪器 | 第80页 |
| 3 实验方法 | 第80-89页 |
| 3.1 荧光载体的构建 | 第80-82页 |
| 3.2 细胞培养 | 第82-84页 |
| 3.3 质粒的瞬时转染 | 第84-86页 |
| 3.4 转染细胞的免疫荧光实验 | 第86页 |
| 3.5 荧光影像测定核膜结合能力 | 第86-87页 |
| 3.6 Western blot测定核膜结合能力 | 第87-89页 |
| 3.7 Nurim b的拓扑结构分析 | 第89页 |
| 3.8 干涉载体的构建 | 第89页 |
| 3.9 流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第89页 |
| 4 实验结果 | 第89-98页 |
| 4.1 Nurim转录本的亚细胞定位 | 第89-90页 |
| 4.2 Nurim b是核膜蛋白 | 第90-92页 |
| 4.3 高盐条件下Nurim b与核膜的结合 | 第92-94页 |
| 4.4 变性条件下Nurim b与核膜的结合 | 第94-95页 |
| 4.5 Nurim b的跨膜方式 | 第95-96页 |
| 4.6 干涉Nurim引起细胞核膜损伤 | 第96-97页 |
| 4.7 干涉Nurim增加由UV诱导的细胞凋亡 | 第97-98页 |
| 5 讨论 | 第98-100页 |
| 5.1 Nurim与其他的INM蛋白的序列的比较分析 | 第98页 |
| 5.2 Nurim a和Nurim b与核膜结合非常紧密 | 第98-99页 |
| 5.3 Nurim作为一个核膜蛋白,可能具有抗凋亡功能 | 第99页 |
| 5.4 核膜蛋白和肿瘤的发生恶化相关 | 第99-100页 |
| 研究小结 | 第100-102页 |
| 参考文献 | 第102-116页 |
| 研究生期间发表论文 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
