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酵母双杂交筛选NLRP3相互作用蛋白质

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
目录第8-10页
缩略词表第10-11页
1 绪论第11-17页
2 实验材料及方法第17-28页
    2.1 材料与来源第17-20页
        2.1.1 菌株与质粒第17页
        2.1.2 主要试剂及实验仪器第17-18页
        2.1.3 主要试剂配制第18-20页
    2.2 实验方法第20-28页
        2.2.1 诱饵表达载体pGBKT7-NLRP3(PYD)、pGBKT7-NLRP3(NACHT)、pGBKT7-NLRP3(LRR)的构建第20-23页
        2.2.2 文库扩增第23页
        2.2.3 酵母细胞的转化第23-24页
        2.2.4 酵母蛋白的提取第24-25页
        2.2.5 免疫印记(Western Blot)分析第25页
        2.2.6 酵母质粒的提取第25-26页
        2.2.7 大肠杆菌DH5α感受态的制备第26页
        2.2.8 酵母质粒的转化第26页
        2.2.9 细胞培养和转染第26-27页
        2.2.10 免疫共沉淀(Co-IP)第27-28页
3 实验结果第28-41页
    3.1 诱饵表达载体的构建和鉴定第28-32页
    3.2 诱饵蛋白在酵母细胞中的表达鉴定第32页
    3.3 诱饵蛋白在酵母细胞中的毒性验证及自身转录激活活性的测定第32-33页
    3.4 人白细胞cDNA文库(Human Leukocyte MatchmakerTM cDNA Library)的扩增第33-34页
    3.5 初步筛选结果第34-35页
    3.6 重复验证结果第35-38页
    3.7 筛选蛋白ECSH1的克隆及表达鉴定第38-39页
    3.8 酵母筛选候选蛋白质ECHS1与NLRP3的相互作用验证第39-41页
4 总结第41-42页
5 实验讨论第42-45页
参考文献第45-49页
攻读硕士学位期间主要的研究成果目录第49-50页
致谢第50-51页

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