摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-17页 |
2 实验材料及方法 | 第17-28页 |
2.1 材料与来源 | 第17-20页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂及实验仪器 | 第17-18页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第18-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-28页 |
2.2.1 诱饵表达载体pGBKT7-NLRP3(PYD)、pGBKT7-NLRP3(NACHT)、pGBKT7-NLRP3(LRR)的构建 | 第20-23页 |
2.2.2 文库扩增 | 第23页 |
2.2.3 酵母细胞的转化 | 第23-24页 |
2.2.4 酵母蛋白的提取 | 第24-25页 |
2.2.5 免疫印记(Western Blot)分析 | 第25页 |
2.2.6 酵母质粒的提取 | 第25-26页 |
2.2.7 大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第26页 |
2.2.8 酵母质粒的转化 | 第26页 |
2.2.9 细胞培养和转染 | 第26-27页 |
2.2.10 免疫共沉淀(Co-IP) | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-41页 |
3.1 诱饵表达载体的构建和鉴定 | 第28-32页 |
3.2 诱饵蛋白在酵母细胞中的表达鉴定 | 第32页 |
3.3 诱饵蛋白在酵母细胞中的毒性验证及自身转录激活活性的测定 | 第32-33页 |
3.4 人白细胞cDNA文库(Human Leukocyte MatchmakerTM cDNA Library)的扩增 | 第33-34页 |
3.5 初步筛选结果 | 第34-35页 |
3.6 重复验证结果 | 第35-38页 |
3.7 筛选蛋白ECSH1的克隆及表达鉴定 | 第38-39页 |
3.8 酵母筛选候选蛋白质ECHS1与NLRP3的相互作用验证 | 第39-41页 |
4 总结 | 第41-42页 |
5 实验讨论 | 第42-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
攻读硕士学位期间主要的研究成果目录 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |