| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 引言 | 第12-40页 |
| 1.1 Musashi的结构和作用机制 | 第12-14页 |
| 1.2 Musashi研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 Musashi与神经胶质瘤 | 第14页 |
| 1.2.2 Musashi与白血病 | 第14-15页 |
| 1.2.3 Musashi与胃癌 | 第15页 |
| 1.2.4 Musashi与结直肠癌 | 第15页 |
| 1.2.5 Musashi与乳腺癌 | 第15-16页 |
| 1.3 乳腺发育和乳腺干细胞 | 第16-28页 |
| 1.3.1 乳腺发育 | 第16-20页 |
| 1.3.2 乳腺发育与信号通路 | 第20-26页 |
| 1.3.3 乳腺干细胞 | 第26-28页 |
| 1.4 乳腺癌和上皮-间充质转化(EMT) | 第28-39页 |
| 1.4.1 乳腺癌 | 第28-29页 |
| 1.4.2 上皮-间充质转化(EMT) | 第29-31页 |
| 1.4.3 EMT的分子机制 | 第31-35页 |
| 1.4.4 EMT与肿瘤转移 | 第35-37页 |
| 1.4.5 乳腺癌小鼠模型 | 第37-39页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-64页 |
| 2.1 载体及菌株 | 第40页 |
| 2.1.1 载体 | 第40页 |
| 2.1.2 宿主大肠杆菌 | 第40页 |
| 2.2 实验动物及细胞株 | 第40页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第40页 |
| 2.2.2 细胞 | 第40页 |
| 2.3 常规试剂 | 第40-42页 |
| 2.3.1 PCR相关试剂 | 第40页 |
| 2.3.2 RNA提取相关试剂 | 第40-41页 |
| 2.3.3 反转录与定量相关试剂 | 第41页 |
| 2.3.4 载体构建相关试剂 | 第41页 |
| 2.3.5 Western Blot相关试剂 | 第41页 |
| 2.3.6 免疫组化相关试剂 | 第41页 |
| 2.3.7 小鼠乳腺上皮细胞的分离及其他细胞实验相关试剂 | 第41页 |
| 2.3.8 其他常规试剂 | 第41-42页 |
| 2.4 实验耗材及抗体 | 第42-43页 |
| 2.4.1 组织芯片 | 第42页 |
| 2.4.2 实验所用一抗 | 第42页 |
| 2.4.3 实验所用二抗 | 第42-43页 |
| 2.5 细胞相关试剂配制 | 第43-44页 |
| 2.5.1 细胞培养相关试剂 | 第43页 |
| 2.5.2 培养基 | 第43-44页 |
| 2.6 分子生物学相关试剂配制 | 第44-45页 |
| 2.6.1 Western Blot相关试剂 | 第44页 |
| 2.6.2 核酸提取及核酸电泳相关试剂 | 第44-45页 |
| 2.6.3 组织包埋及组织染色相关试剂 | 第45页 |
| 2.7 主要仪器设备 | 第45页 |
| 2.8 分析软件 | 第45-46页 |
| 2.9 感受态细胞制备 | 第46页 |
| 2.10 胶回收、酶切、连接 | 第46-47页 |
| 2.11 质粒提取 | 第47-48页 |
| 2.12 转基因小鼠基因组提取 | 第48-49页 |
| 2.13 常规PCR反应 | 第49-50页 |
| 2.14 小鼠乳腺上皮细胞分离 | 第50页 |
| 2.15 总RNA的提取 | 第50-51页 |
| 2.16 微量的总RNA的提取与纯化 | 第51页 |
| 2.17 反转录 | 第51-52页 |
| 2.18 反转录(微量RNA反转录) | 第52页 |
| 2.19 荧光实时定量PCR反应(qRT-PCR) | 第52-53页 |
| 2.20 复苏细胞 | 第53页 |
| 2.21 细胞传代 | 第53页 |
| 2.22 乳腺全组织染色 | 第53-54页 |
| 2.23 细胞划痕实验 | 第54-55页 |
| 2.24 制作小鼠乳腺组织石蜡切片 | 第55页 |
| 2.25 MTT细胞生长检测 | 第55-56页 |
| 2.26 HE染色 | 第56页 |
| 2.27 脂质体转染shMsi1、shMsi2质粒 | 第56-57页 |
| 2.28 小鼠乳腺组织冰冻切片的免疫荧光染色 | 第57页 |
| 2.29 Western Blot检测 | 第57-59页 |
| 2.30 免疫组化 | 第59-61页 |
| 2.31 肿瘤细胞侵袭实验 | 第61-62页 |
| 2.32 ELISA-乳腺癌肿瘤标志物CA153的检测 | 第62-64页 |
| 第三章 结果与分析 | 第64-98页 |
| 3.1 Msi在人乳腺癌和小鼠乳腺肿瘤中表达水平的分析 | 第64-67页 |
| 3.2 Msi影响乳腺癌细胞的EMT | 第67-70页 |
| 3.3 Msi过表达阻碍乳腺导管的延伸和分支、抑制EMT | 第70-77页 |
| 3.4 Msi敲除促进乳腺导管的延伸和分支、激活EMT | 第77-82页 |
| 3.5 Msi抑制乳腺癌小鼠的肿瘤生长 | 第82-85页 |
| 3.6 Msi抑制乳腺癌细胞转移 | 第85-87页 |
| 3.7 Msi维持乳腺癌细胞的腔上皮细胞状态、阻碍EMT过程 | 第87-90页 |
| 3.8 Msi抑制乳腺肿瘤的恶化 | 第90-94页 |
| 3.9 Msi通过调控Jagl抑制EMT | 第94-98页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第98-101页 |
| 4.1 RBPs转录后调控细胞状态 | 第98页 |
| 4.2 Msi维持上皮细胞状态并抑制EMT | 第98-99页 |
| 4.3 Msi蛋白与mRNA的3'UTRs UAG基序结合 | 第99页 |
| 4.4 Msi蛋白通过抑制Jag1的翻译从而负调控EMT | 第99-100页 |
| 4.5 Msi蛋白在其他癌症中的功能 | 第100-101页 |
| 第五章 结论 | 第101-102页 |
| 附录1 Msi与Jag1的凝胶阻滞分析 | 第102-103页 |
| 附录2 引物序列 | 第103-105页 |
| 附录3 乳腺癌组织芯片信息 | 第105-108页 |
| 参考文献 | 第108-125页 |
| 致谢 | 第125-126页 |
| 个人简历 | 第126页 |
