| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 绪论 | 第14-34页 |
| 1 细胞学检查 | 第15-16页 |
| 2 分子标记物 | 第16-22页 |
| 2.1 BRAF V600E突变 | 第18-20页 |
| 2.2 RET/PTC重排 | 第20-21页 |
| 2.3 Ras点突变 | 第21-22页 |
| 3 肿瘤标记物P53基因、P53蛋白和抗P53抗体 | 第22-29页 |
| 3.1 P53基因突变作为癌症生物标志物 | 第23-25页 |
| 3.2 P53蛋白作为癌症病程的生物标志物 | 第25-27页 |
| 3.3 抗P53蛋白抗体作为肿瘤标志物的进展 | 第27-29页 |
| 4 噬菌体展示技术 | 第29-34页 |
| 4.1 丝状噬菌体的主要结构及生活周期 | 第30-31页 |
| 4.2 丝状噬菌体展示系统 | 第31-32页 |
| 4.3 噬菌体展示技术的优势及应用 | 第32-34页 |
| 第一部分 甲状腺癌患者血清P53抗体的检测研究 | 第34-58页 |
| 1 实验材料 | 第34-37页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第34页 |
| 1.2 分子生物学试剂 | 第34-35页 |
| 1.3 主要仪器 | 第35页 |
| 1.4 缓冲液及主要试剂配制 | 第35-36页 |
| 1.5 培养基 | 第36-37页 |
| 1.6 血清样本 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.1 重组人P53蛋白的制备、鉴定其免疫原性 | 第37-39页 |
| 2.2 制备杂合噬菌体Phage-SS，鉴定其免疫原性 | 第39-40页 |
| 2.3 制备杂合噬菌体phage-SP，鉴定其免疫原性 | 第40-42页 |
| 2.4 血清p53抗体的ELISA检测 | 第42-43页 |
| 2.5 甲状腺乳头状癌标本P53蛋白的免疫组化分析 | 第43页 |
| 2.6 统计分析 | 第43页 |
| 3 实验结果 | 第43-53页 |
| 3.1 重组质粒测序结果 | 第43-45页 |
| 3.2 重组人P53蛋白的制备及Western Blot分析 | 第45页 |
| 3.3 杂合噬菌体Phage-SS的制备、纯化及Western blot分析 | 第45-47页 |
| 3.4 杂合噬菌体Phage-SP的制备及Western blot分析 | 第47-49页 |
| 3.5 甲状腺乳头状癌患者血清p53抗体检测 | 第49-51页 |
| 3.6 p53抗体表达情况与甲状腺自身免疫抗体相关性分析 | 第51-52页 |
| 3.7 p53抗体表达情况与部分甲状腺乳头状癌患者P53蛋白积累相关性分析 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-57页 |
| 4.1 P53蛋白展示表位的选择及ELISA检测体系建立 | 第54-56页 |
| 4.2 血清P53抗体检测影响因素分析 | 第56-57页 |
| 5 小结 | 第57-58页 |
| 第二部分 BRAFV600E基因突变检测方法研究 | 第58-74页 |
| 1 实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1 分子生物学试剂 | 第58页 |
| 1.2 主要仪器 | 第58页 |
| 1.3 组织样本 | 第58-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-63页 |
| 2.1 甲状腺乳头状癌标本BRAF蛋白的免疫组化分析 | 第59-60页 |
| 2.2 基因BRAF V600E检测 | 第60-61页 |
| 2.3 BRAF V600E点突变检测（荧光PCR法） | 第61-63页 |
| 2.4 统计分析 | 第63页 |
| 3 结果 | 第63-67页 |
| 3.1 免疫组化 | 第63-64页 |
| 3.2 直接测序检测BRAF基因突变 | 第64-65页 |
| 3.3 试剂盒检测BRAF基因突变 | 第65-66页 |
| 3.4 三种检测方法的比较 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-72页 |
| 4.1 BRAFV600E特异性单抗VE1在诊断中的应用价值 | 第67-70页 |
| 4.2 三种实验方法的比较与数据解读 | 第70-72页 |
| 5 小结 | 第72-74页 |
| 第三部分 血清P53抗体检测与无负压吸引穿刺物检测BRAF基因突变在PTC中的诊疗决策作用 | 第74-88页 |
| 1 实验材料 | 第74-76页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第74页 |
| 1.2 分子生物学试剂 | 第74-75页 |
| 1.3 主要仪器 | 第75页 |
| 1.4 缓冲液及主要试剂配制 | 第75页 |
| 1.5 培养基 | 第75-76页 |
| 1.6 血清及组织样本 | 第76页 |
| 2 实验方法 | 第76-79页 |
| 2.1 无负压吸引细针穿刺操作 | 第76-77页 |
| 2.2 重组人P53蛋白的制备 | 第77页 |
| 2.3 噬菌体phage-SP的制备 | 第77页 |
| 2.4 甲状腺患者血清p53抗体的ELISA检测 | 第77页 |
| 2.5 BRAFV600E基因突变检测 | 第77-78页 |
| 2.6 统计分析 | 第78-79页 |
| 3 实验结果 | 第79-83页 |
| 3.1 P53血清抗体检测 | 第79页 |
| 3.2 BRAF基因突变、FNCC及血清P53抗体检测在诊断中的差异 | 第79-80页 |
| 3.3 BRAFV600E检测与术后病理对照 | 第80-81页 |
| 3.4 血清P53抗体及BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌临床特征相关性 | 第81-82页 |
| 3.5 血清P53抗体及BRAF基因突变相关性 | 第82-83页 |
| 4 讨论 | 第83-88页 |
| 结论 | 第88-90页 |
| 研究的创新点 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-110页 |
| 在研期间公开发表的论文 | 第110-111页 |
| 在研期间参加的项目 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
