| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 高等药用真菌 | 第13页 |
| 1.2 灵芝及其生物活性成分 | 第13-14页 |
| 1.2.1 灵芝 | 第13-14页 |
| 1.2.2 灵芝的生物活性成分 | 第14页 |
| 1.3 灵芝酸及其药理活性 | 第14-15页 |
| 1.4 灵芝酸的结构及其生物合成 | 第15-17页 |
| 1.4.1 灵芝酸的结构 | 第15-16页 |
| 1.4.2 灵芝酸的生物合成 | 第16-17页 |
| 1.5 灵芝多糖及其药理活性 | 第17页 |
| 1.6 灵芝酸与灵芝多糖的发酵生产及其进展 | 第17-19页 |
| 1.7 透明颤菌及透明颤菌血红蛋白 | 第19-20页 |
| 1.7.1 透明颤菌 | 第19页 |
| 1.7.2 透明颤菌血红蛋白及其结构特征 | 第19-20页 |
| 1.7.3 透明颤菌血红蛋白的生物学功能及其在生产工业上的应用 | 第20页 |
| 1.7.4 VHb在灵芝中应用的可能性 | 第20页 |
| 1.8 立题的目的和意义 | 第20-21页 |
| 1.9 本论文的主要研究内容与技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 异源表达vgb工程菌株的构建及其鉴定 | 第23-45页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 vgb的克隆 | 第24-29页 |
| 2.2.2 表达载体pJW-EXP-vgb的构建 | 第29-32页 |
| 2.2.3 异源表达vgb工程菌株的构建及其鉴定 | 第32-36页 |
| 2.3 实验结果 | 第36-44页 |
| 2.3.1 vgb的克隆 | 第36-37页 |
| 2.3.2 表达载体pJW-EXP-vgb的验证 | 第37-41页 |
| 2.3.3 异源表达vgb工程菌株的构建、VHb表达水平及活性检测 | 第41-44页 |
| 2.4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 异源表达vgb对灵芝酸的积累、中间代谢产物含量以及灵芝酸合成相关基因表达的影响 | 第45-63页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第45-46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 3.2.1 异源表达vgb灵芝工程菌株悬浮发酵培养 | 第46-47页 |
| 3.2.2 灵芝细胞干重及培养基中残糖含量的测定 | 第47-48页 |
| 3.2.3 悬浮培养条件下总灵芝酸的提取与检测 | 第48-49页 |
| 3.2.4 悬浮培养条件下灵芝酸单体的提取与检测 | 第49-50页 |
| 3.2.5 悬浮培养条件下中间代谢产物羊毛甾醇的提取与检测 | 第50-51页 |
| 3.2.6 灵芝酸合成相关基因hmgr,sqs,1s表达水平的检测 | 第51-53页 |
| 3.2.7 数据处理与分析方法 | 第53页 |
| 3.3 实验结果 | 第53-61页 |
| 3.3.1 VHb在灵芝细胞中的影响 | 第53页 |
| 3.3.2 VHb在灵芝细胞中的表达对细胞生长的影响 | 第53-55页 |
| 3.3.3 VHb在灵芝细胞中的表达提高了总灵芝酸产量 | 第55-56页 |
| 3.3.4 VHb在灵芝细胞中的表达提高了灵芝酸单体的含量 | 第56-57页 |
| 3.3.5 VHb在灵芝细胞中的表达减少中间代谢产物羊毛甾醇的含量 | 第57-58页 |
| 3.3.6 VHb在灵芝细胞中的表达对灵芝酸合成相关基因hmgr,sqs,1s表达量的影响 | 第58-60页 |
| 3.3.7 讨论 | 第60-61页 |
| 3.4 本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 异源表达vgb对灵芝多糖产量及其相关基因表达的影响 | 第63-71页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第63页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第63页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 4.2.1 悬浮培养条件下胞内多糖(IPS)的提取与检测 | 第64页 |
| 4.2.2 悬浮培养条件下胞外多糖（EPS)的提取与检测 | 第64页 |
| 4.2.3 灵芝多糖合成相关基因ubp,pgm,g1s表达水平的检测 | 第64-65页 |
| 4.2.4 数据处理与分析方法 | 第65页 |
| 4.3 实验结果 | 第65-68页 |
| 4.3.1 VHb在灵芝细胞中的表达增加了IPS的含量 | 第65-66页 |
| 4.3.2 VHb在灵芝细胞中的表达增加了EPS的产量 | 第66-67页 |
| 4.3.3 VHb在灵芝细胞中的表达对多糖合成相关基因udp,pgm,g1s表达量的影响 | 第67-68页 |
| 4.3.4 讨论 | 第68页 |
| 4.4 本章小结 | 第68-71页 |
| 第五章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 5.1 全文结论 | 第71页 |
| 5.2 展望 | 第71页 |
| 5.3 本文创新点 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第81-83页 |
| 附录B 标准曲线及荧光定量相关曲线 | 第83-85页 |
