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利用激光显微切割系统精细分离柑橘珠心胚起始细胞技术体系的构建

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表第11页
Abbreviations第11-12页
第一章 前言第12-20页
    1. 课题的提出第12-13页
    2. 植物无融合生殖现象第13-14页
    3. 柑橘珠心胚研究进展第14-15页
    4. 激光显微切割研究进展第15-19页
        4.1 激光显微切割技术发展和原理第15-16页
        4.2 Leica AS LMD 7000的特点第16-17页
        4.3 激光显微切割技术结合组织切片技术第17页
        4.4 激光显微切割技术在植物研究中的应用第17-19页
            4.4.1 植物生殖与胚胎研究第18页
            4.4.2 基因表达分析第18-19页
    5. 课题的目的与意义第19-20页
第二章 激光显微切割材料选择第20-29页
    1. 引言第20-21页
    2. 材料与方法第21-22页
        2.1 材料及其来源第21页
        2.2 实验方法第21-22页
            2.2.1 ‘伏令夏’橙果实石蜡切片方法第21页
            2.2.2 ‘伏令夏’橙果实冰冻切片方法第21-22页
            2.2.3 不同柑橘多胚材料果实石蜡切片方法第22页
            2.2.4 多胚柑橘种子采集及种子中胚数目统计第22页
    3. 结果与分析第22-27页
        3.1 伏令夏橙珠心胚起始发生过程观察及切割时期确定第22-23页
        3.2 适合柑橘珠心胚激光显微切割的切片方法选择第23-24页
        3.3 适合柑橘珠心胚激光显微切割的多胚材料筛选第24-25页
        3.4 激光显微切割所需样品量估计第25-26页
        3.5 不同柑橘多胚材料种子中胚数目统计第26-27页
    4. 讨论第27-29页
        4.1 多胚柑橘材料胚珠中NEI细胞数量及出现时间、位置第27-28页
        4.2 影响激光显微切割NEI细胞材料筛选的因素第28-29页
第三章 激光显微切割技术体系构建第29-44页
    1. 引言第29页
    2. 材料与方法第29-35页
        2.1 实验材料第29-30页
        2.2 石蜡切片方法第30-31页
            2.2.1 石蜡切片的一般步骤第30页
            2.2.2 适合柑橘果实的石蜡切片方法第30-31页
        2.3 激光显微切割方法第31-34页
            2.3.1 开启Leica AS LMD系统第31页
            2.3.2 激光切割仪器校准第31-32页
            2.3.3 激光显微切割参数调试第32页
            2.3.4 载玻片扫描第32-33页
            2.3.5 勾画目标细胞第33页
            2.3.6 收集管准备第33页
            2.3.7 正式切割及图像数据收集第33-34页
            2.3.8 取出收集管、关闭系统第34页
        2.4 RNA提取第34页
        2.5 Agilent 2100 Bioanalyzer RNA检测第34-35页
    3. 结果与分析第35-40页
        3.1 石蜡切片的方法改进第35-36页
            3.1.1 切面选择第35页
            3.1.2 切片厚度第35页
            3.1.3 展片方法第35-36页
            3.1.4 脱蜡方法第36页
        3.2 激光显微切割方法第36-37页
        3.3 Aglient 2100 RNA质量检测结果第37-38页
        3.4 影响RNA质量的因素第38-40页
    4. 讨论第40-42页
        4.1 石蜡切片过程对切割材料RNA质量的影响第40-41页
        4.2 激光显微切割过程对材料RNA质量影响第41-42页
    5. 问题与展望第42-44页
        5.1 问题第42-43页
        5.2 展望第43-44页
参考文献第44-52页
致谢第52页

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