| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11页 |
| Abbreviations | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-20页 |
| 1. 课题的提出 | 第12-13页 |
| 2. 植物无融合生殖现象 | 第13-14页 |
| 3. 柑橘珠心胚研究进展 | 第14-15页 |
| 4. 激光显微切割研究进展 | 第15-19页 |
| 4.1 激光显微切割技术发展和原理 | 第15-16页 |
| 4.2 Leica AS LMD 7000的特点 | 第16-17页 |
| 4.3 激光显微切割技术结合组织切片技术 | 第17页 |
| 4.4 激光显微切割技术在植物研究中的应用 | 第17-19页 |
| 4.4.1 植物生殖与胚胎研究 | 第18页 |
| 4.4.2 基因表达分析 | 第18-19页 |
| 5. 课题的目的与意义 | 第19-20页 |
| 第二章 激光显微切割材料选择 | 第20-29页 |
| 1. 引言 | 第20-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-22页 |
| 2.1 材料及其来源 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 ‘伏令夏’橙果实石蜡切片方法 | 第21页 |
| 2.2.2 ‘伏令夏’橙果实冰冻切片方法 | 第21-22页 |
| 2.2.3 不同柑橘多胚材料果实石蜡切片方法 | 第22页 |
| 2.2.4 多胚柑橘种子采集及种子中胚数目统计 | 第22页 |
| 3. 结果与分析 | 第22-27页 |
| 3.1 伏令夏橙珠心胚起始发生过程观察及切割时期确定 | 第22-23页 |
| 3.2 适合柑橘珠心胚激光显微切割的切片方法选择 | 第23-24页 |
| 3.3 适合柑橘珠心胚激光显微切割的多胚材料筛选 | 第24-25页 |
| 3.4 激光显微切割所需样品量估计 | 第25-26页 |
| 3.5 不同柑橘多胚材料种子中胚数目统计 | 第26-27页 |
| 4. 讨论 | 第27-29页 |
| 4.1 多胚柑橘材料胚珠中NEI细胞数量及出现时间、位置 | 第27-28页 |
| 4.2 影响激光显微切割NEI细胞材料筛选的因素 | 第28-29页 |
| 第三章 激光显微切割技术体系构建 | 第29-44页 |
| 1. 引言 | 第29页 |
| 2. 材料与方法 | 第29-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.2 石蜡切片方法 | 第30-31页 |
| 2.2.1 石蜡切片的一般步骤 | 第30页 |
| 2.2.2 适合柑橘果实的石蜡切片方法 | 第30-31页 |
| 2.3 激光显微切割方法 | 第31-34页 |
| 2.3.1 开启Leica AS LMD系统 | 第31页 |
| 2.3.2 激光切割仪器校准 | 第31-32页 |
| 2.3.3 激光显微切割参数调试 | 第32页 |
| 2.3.4 载玻片扫描 | 第32-33页 |
| 2.3.5 勾画目标细胞 | 第33页 |
| 2.3.6 收集管准备 | 第33页 |
| 2.3.7 正式切割及图像数据收集 | 第33-34页 |
| 2.3.8 取出收集管、关闭系统 | 第34页 |
| 2.4 RNA提取 | 第34页 |
| 2.5 Agilent 2100 Bioanalyzer RNA检测 | 第34-35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-40页 |
| 3.1 石蜡切片的方法改进 | 第35-36页 |
| 3.1.1 切面选择 | 第35页 |
| 3.1.2 切片厚度 | 第35页 |
| 3.1.3 展片方法 | 第35-36页 |
| 3.1.4 脱蜡方法 | 第36页 |
| 3.2 激光显微切割方法 | 第36-37页 |
| 3.3 Aglient 2100 RNA质量检测结果 | 第37-38页 |
| 3.4 影响RNA质量的因素 | 第38-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 石蜡切片过程对切割材料RNA质量的影响 | 第40-41页 |
| 4.2 激光显微切割过程对材料RNA质量影响 | 第41-42页 |
| 5. 问题与展望 | 第42-44页 |
| 5.1 问题 | 第42-43页 |
| 5.2 展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
