| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 本实验所需的器材及试剂 | 第7-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-21页 |
| 1.1 基因型性别决定机制 | 第11-14页 |
| 1.2 环境型性别决定机制 | 第14-16页 |
| 1.3 贝类性别研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 Transformer2基因的研究现状 | 第17-20页 |
| 1.5 本研究的内容、目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 池蝶蚌Tra2α基因的cDNA全序列克隆及分析 | 第21-44页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 池蝶蚌性腺总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.1.3 RNA的质量检测 | 第22-23页 |
| 2.1.4 总RNA的DNase处理 | 第23页 |
| 2.1.5 SMART cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.1.6 池蝶蚌Tra2α基因中间片段的获得 | 第24-25页 |
| 2.1.7 RACE-PCR方法克隆池蝶蚌Tra2α基因cDNA全长 | 第25-26页 |
| 2.1.8 PCR产物检测、目的片段的回收、挑克隆与测序 | 第26-28页 |
| 2.1.9.池蝶蚌.Tra2α.基因全长序列拼接及开放阅读框序列分析 | 第28页 |
| 2.2 生物信息学分析 | 第28-30页 |
| 2.2.1 池蝶蚌Tra2α蛋白氨基酸组成分析 | 第28页 |
| 2.2.2 池蝶蚌Tra2α蛋白结构域分析 | 第28-29页 |
| 2.2.3 池蝶蚌Tra2α蛋白亲水性、信号肽及蛋白分布检测 | 第29页 |
| 2.2.4 池蝶蚌Tra2α蛋白二级结构预测 | 第29-30页 |
| 2.2.5 池蝶蚌Tra2α蛋白三级结构预测 | 第30页 |
| 2.2.6 池蝶蚌Tra2α氨基酸同源性分析及系统进化树的构建 | 第30页 |
| 2.3 结果 | 第30-42页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 池蝶蚌.Tra2α.基因部分序列的获得 | 第31页 |
| 2.3.3 池蝶蚌Tra2α基因cDNA全长序列获得 | 第31-32页 |
| 2.3.4 池蝶蚌Tra2α基因全长核酸序列分析 | 第32-33页 |
| 2.3.5 池蝶蚌Tra2α蛋白氨基酸组成分析 | 第33-35页 |
| 2.3.6 池蝶蚌Tra2α蛋白结构域分析 | 第35页 |
| 2.3.7 池蝶蚌Tra2α蛋白亲水性及信号肽检测 | 第35-37页 |
| 2.3.8 池蝶蚌Tra2α蛋白二级结构预测 | 第37-39页 |
| 2.3.9 池蝶蚌Tra2α蛋白三级结构预测 | 第39-40页 |
| 2.3.10 池蝶蚌Tra2α氨基酸同源性分析及系统进化树的构建 | 第40-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 池蝶蚌Tra2α基因在不同组织和不同发育阶段的表达分析 | 第44-56页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第45-48页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 总RNA提取 | 第45页 |
| 3.1.3 总RNA提取及质量检测 | 第45页 |
| 3.1.4 荧光定量cDNA模板的合成 | 第45-46页 |
| 3.1.5 荧光定量PCR引物设计 | 第46-47页 |
| 3.1.6 池蝶蚌Tra2α基因在不同组织中的荧光定量检测 | 第47页 |
| 3.1.7 池蝶蚌Tra2α基因在不同龄池蝶蚌性腺组织中的荧光定量检测 | 第47-48页 |
| 3.2 实验结果 | 第48-52页 |
| 3.2.1 池蝶蚌Tra2α基因的组织差异性表达分析 | 第48-50页 |
| 3.2.2 池蝶蚌Tra2α基因在不同年龄池蝶蚌性腺中差异表达分析 | 第50-52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-56页 |
| 第四章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 4.1 结论 | 第56-57页 |
| 4.2 进一步的工作方向 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第65页 |
