| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-18页 |
| 1.1 荷花的概述 | 第8页 |
| 1.2 高等植物成花发育研究进展 | 第8-16页 |
| 1.2.1 成花发育假说 | 第9页 |
| 1.2.2 植物成花途径分子研究进展 | 第9-13页 |
| 1.2.2.1 春化途径(Vernalization pathway) | 第9-10页 |
| 1.2.2.2 光周期途径(Photoperiod pathway) | 第10-11页 |
| 1.2.2.3 自主途径(Autonomous pathway) | 第11-12页 |
| 1.2.2.4 成花抑制途径(Gibberellins pathway) | 第12-13页 |
| 1.2.3 花器官发育ABC模型及其发展 | 第13-15页 |
| 1.2.4 MADS-box基因的结构功能与花的发育 | 第15-16页 |
| 1.3 高等植物AP1同源基因研究进展 | 第16-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-31页 |
| 3.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第19页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第19页 |
| 3.1.4 实验工具与耗材 | 第19-20页 |
| 3.1.5 主要溶液的配制 | 第20页 |
| 3.2 试验方法 | 第20-31页 |
| 3.2.1 总RNA的提取与纯化 | 第20-21页 |
| 3.2.1.1 改良CTAB法荷花RNA的提取 | 第20页 |
| 3.2.1.2 总RNA的纯化 | 第20-21页 |
| 3.2.2 RNA浓度、纯度和电泳检测 | 第21页 |
| 3.2.3 AP1基因5'RACE扩增 | 第21-24页 |
| 3.2.3.1 引物设计 | 第21页 |
| 3.2.3.2 AP1 5'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第21-22页 |
| 3.2.3.3 5'的PCR扩增 | 第22页 |
| 3.2.3.4 PCR产物的回收与纯化 | 第22-23页 |
| 3.2.3.5 目的片段与T载体的连接 | 第23页 |
| 3.2.3.6 感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| 3.2.4 AP1生物学信息分析 | 第24页 |
| 3.2.5 AP1基因表达分析 | 第24-25页 |
| 3.2.5.1 荷花RNA提取 | 第24页 |
| 3.2.5.2 表达分析用引物设计 | 第24页 |
| 3.2.5.3 cDNA第一链的合成 | 第24-25页 |
| 3.2.5.4 实时荧光定量PCR | 第25页 |
| 3.2.6 AP1表达载体构建 | 第25-31页 |
| 3.2.6.1 AP1基因全长ORF克隆 | 第25-27页 |
| 3.2.6.2 带有酶切位点的AP1基因cDNA全长的克隆 | 第27-28页 |
| 3.2.6.3 酶切克隆 | 第28页 |
| 3.2.6.4 AP1基因植物表达载体的构建 | 第28-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-45页 |
| 4.1 RNA提取与检测 | 第31页 |
| 4.2 AP1基因的克隆结果 | 第31-36页 |
| 4.2.1 AP1基因5'RACE扩增结果 | 第31-32页 |
| 4.2.2 AP1基因cDNA开放阅读框(ORF)扩增 | 第32-34页 |
| 4.2.3 AP1蛋白的同源性比较及系统进化分析 | 第34-36页 |
| 4.3 AP1基因的生物学信息分析 | 第36-41页 |
| 4.3.1 蛋白质一级结构理化性质分析 | 第36-37页 |
| 4.3.2 蛋白质亲疏水性分析 | 第37-38页 |
| 4.3.3 氨基酸序列跨膜结构、信号肽预测及亚细胞定位 | 第38-39页 |
| 4.3.4 蛋白质结构域、二级结构及3D结构预测 | 第39-41页 |
| 4.3.5 蛋白质磷酸化位点预测 | 第41页 |
| 4.4 AP1基因在荷花不同发育阶段的表达分析 | 第41-42页 |
| 4.5 AP1基因表达载体的构建 | 第42-45页 |
| 4.5.1 AP1基因全长克隆分析 | 第42页 |
| 4.5.2 酶切结果分析 | 第42-45页 |
| 5 结论与讨论 | 第45-47页 |
| 5.1 AP1的克隆及生物信息学特征的讨论 | 第45页 |
| 5.2 AP1表达特性的讨论 | 第45-46页 |
| 5.3 AP1表达载体构建讨论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-53页 |
| 英文摘要 | 第53-54页 |
| 附图 | 第55页 |
