中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 引言 | 第13-27页 |
1.1 放线菌的资源与研究状况 | 第13-20页 |
1.1.1 土壤放线菌研究概况 | 第14-15页 |
1.1.2 海洋放线菌研究概况 | 第15-17页 |
1.1.3 植物内生放线菌研究概况 | 第17-19页 |
1.1.4 极端环境放线菌研究概况 | 第19-20页 |
1.2 放线菌分类研究进展 | 第20-24页 |
1.2.1 放线菌在微生物中的分类地位 | 第20-21页 |
1.2.2 放线菌的经典分类 | 第21-22页 |
1.2.3 放线菌的化学分类 | 第22页 |
1.2.4 放线菌的分子生物学分类 | 第22-24页 |
1.3 拮抗放线菌次生代谢产物的研究进展 | 第24-26页 |
1.3.1 次生代谢产物的多样性 | 第24页 |
1.3.2 次生代谢产物应用现状 | 第24-25页 |
1.3.3 生代谢产物的研究意义 | 第25页 |
1.3.4 次生代谢产物研究的问题与展望 | 第25-26页 |
1.4 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
2 材料方法 | 第27-41页 |
2.1 土样的采集及放线菌菌株的分离纯化 | 第27页 |
2.1.1 田间样本的采集 | 第27页 |
2.1.2 仪器 | 第27页 |
2.1.3 分离培养基 | 第27页 |
2.1.4 放线菌的分离纯化 | 第27页 |
2.2 拮抗放线菌的初步筛选 | 第27页 |
2.3 拮抗放线菌对小麦纹枯病、根腐病的防治 | 第27-29页 |
2.4 拮抗放线菌的复筛 | 第29页 |
2.5 菌株鉴定 | 第29-35页 |
2.5.1 供试培养基 | 第29-30页 |
2.5.2 形态特征观察 | 第30-31页 |
2.5.3 培养特征观察 | 第31页 |
2.5.4 生理生化特征测定 | 第31-32页 |
2.5.5 分子生物学鉴定 | 第32-35页 |
2.5.5.1 DNA提取试剂 | 第32页 |
2.5.5.2 所用仪器 | 第32页 |
2.5.5.3 供试菌株DNA的提取 | 第32-33页 |
2.5.5.4 目的片段PCR扩增 | 第33-34页 |
2.5.5.5 PCR产物回收 | 第34页 |
2.5.5.6 回收产物检测 | 第34页 |
2.5.5.7 特异扩增片段的克隆 | 第34-35页 |
2.6 菌株FX-H-51 发酵条件优化 | 第35-36页 |
2.6.1 材料 | 第35页 |
2.6.1.1 供试菌种 | 第35页 |
2.6.1.2 培养基 | 第35页 |
2.6.2 单因素试验初步优化放线菌FX-H-51 菌株的发酵条件 | 第35-36页 |
2.6.2.1 温度对发酵滤液抑菌作用的影响 | 第35页 |
2.6.2.2 初始pH值对发酵滤液抑菌作用的影响 | 第35页 |
2.6.2.3 摇床转速对发酵滤液抑菌作用的影响 | 第35-36页 |
2.6.2.4 装液量对发酵滤液抑菌作用的影响 | 第36页 |
2.6.2.5 发酵时间对发酵滤液抑菌作用的影响 | 第36页 |
2.6.3 菌株FX-H-51 发酵条件的正交试验 | 第36页 |
2.7 放线菌FX-H-51 菌株发酵液稳定性 | 第36-37页 |
2.7.1 放线菌FX-H-51 菌株发酵液的制备 | 第36-37页 |
2.7.2 放线菌FX-H-51 菌株发酵液的测定 | 第37页 |
2.7.2.1 发酵液对热的稳定性测定 | 第37页 |
2.7.2.2 发酵液对酸碱的稳定性测定 | 第37页 |
2.7.2.3 发酵液对紫外线的稳定性测定 | 第37页 |
2.8 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性成分分离纯化 | 第37-41页 |
2.8.1 材料 | 第37-38页 |
2.8.1.1 培养基 | 第37页 |
2.8.1.2 主要试剂仪器 | 第37-38页 |
2.8.2 发酵液的制备 | 第38页 |
2.8.3 萃取剂的选择 | 第38页 |
2.8.4 粗提物的制备 | 第38页 |
2.8.5 抑菌活性物质粗提物的薄层层析检测 | 第38-39页 |
2.8.5.1 点样 | 第38页 |
2.8.5.2 展层系统的选择 | 第38-39页 |
2.8.5.3 展层 | 第39页 |
2.8.5.4 检测 | 第39页 |
2.8.6 抑菌活性物质粗提物的硅胶柱层析 | 第39-41页 |
2.8.6.1 预处理 | 第39页 |
2.8.6.2 上样洗脱 | 第39页 |
2.8.6.3 色谱条带的活性跟踪 | 第39页 |
2.8.6.4 二次硅胶柱层析 | 第39-40页 |
2.8.6.5 抑菌活性物质的纯度检测 | 第40页 |
2.8.6.6 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物中活性化合物抑菌活性测定 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-61页 |
3.1 土壤放线菌分离纯化结果 | 第41页 |
3.2 拮抗放线菌初筛结果 | 第41-43页 |
3.3 拮抗放线菌对小麦纹枯病、根腐病的防治效果 | 第43-44页 |
3.4 拮抗放线菌的复筛结果 | 第44-45页 |
3.5 拮抗放线菌FX-H-51 菌株形态学观察结果 | 第45-46页 |
3.6 拮抗放线菌FX-H-51 菌株培养特征结果 | 第46页 |
3.7 拮抗放线菌FX-H-51 菌株生理生化特性测定结果 | 第46-47页 |
3.8 拮抗放线菌FX-H-51 菌株分子生物学鉴定结果 | 第47-49页 |
3.8.1 16SrDNA PCR扩增序列 | 第47-48页 |
3.8.2 拮抗放线菌FX-H-51 菌株系统发育分析 | 第48-49页 |
3.9 拮抗放线菌FX-H-51 菌株发酵条件的研究与优化 | 第49-54页 |
3.9.1 温度对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响 | 第49-50页 |
3.9.2 初始pH值对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响 | 第50-51页 |
3.9.3 摇床转速对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响 | 第51页 |
3.9.4 发酵培养基装液量对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响 | 第51-52页 |
3.9.5 发酵时间对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响 | 第52-53页 |
3.9.6 优化发酵培养条件正交试验结果 | 第53-54页 |
3.10 拮抗放线菌FX-H-51 菌株发酵液稳定性 | 第54-56页 |
3.10.1 温度对发酵液稳定性影响结果 | 第54-55页 |
3.10.2 pH值对发酵液稳定性影响结果 | 第55-56页 |
3.10.3 紫外线对发酵液稳定性影响结果 | 第56页 |
3.11 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物的抑菌活性成分分离纯化结果 | 第56-61页 |
3.11.1 溶媒萃取剂的选择 | 第56-57页 |
3.11.2 展层系统的选择结果 | 第57-58页 |
3.11.3 一次硅胶柱层析结果 | 第58-59页 |
3.11.4 色谱条带活性跟踪结果 | 第59页 |
3.11.5 二次层析结果 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
4.1 土壤放线菌的分离与纯化 | 第61页 |
4.2 放线菌FX-H-51 菌株的鉴定 | 第61-62页 |
4.3 放线菌FX-H-51 菌株发酵条件的优化 | 第62页 |
4.4 抑菌活性物质的分离纯化 | 第62页 |
4.5 关于菌株FX-H-51 的开发前景 | 第62-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72页 |