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拮抗放线菌FX-H-51的筛选及其活性物质的研究

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 引言第13-27页
    1.1 放线菌的资源与研究状况第13-20页
        1.1.1 土壤放线菌研究概况第14-15页
        1.1.2 海洋放线菌研究概况第15-17页
        1.1.3 植物内生放线菌研究概况第17-19页
        1.1.4 极端环境放线菌研究概况第19-20页
    1.2 放线菌分类研究进展第20-24页
        1.2.1 放线菌在微生物中的分类地位第20-21页
        1.2.2 放线菌的经典分类第21-22页
        1.2.3 放线菌的化学分类第22页
        1.2.4 放线菌的分子生物学分类第22-24页
    1.3 拮抗放线菌次生代谢产物的研究进展第24-26页
        1.3.1 次生代谢产物的多样性第24页
        1.3.2 次生代谢产物应用现状第24-25页
        1.3.3 生代谢产物的研究意义第25页
        1.3.4 次生代谢产物研究的问题与展望第25-26页
    1.4 本研究的目的意义第26-27页
2 材料方法第27-41页
    2.1 土样的采集及放线菌菌株的分离纯化第27页
        2.1.1 田间样本的采集第27页
        2.1.2 仪器第27页
        2.1.3 分离培养基第27页
        2.1.4 放线菌的分离纯化第27页
    2.2 拮抗放线菌的初步筛选第27页
    2.3 拮抗放线菌对小麦纹枯病、根腐病的防治第27-29页
    2.4 拮抗放线菌的复筛第29页
    2.5 菌株鉴定第29-35页
        2.5.1 供试培养基第29-30页
        2.5.2 形态特征观察第30-31页
        2.5.3 培养特征观察第31页
        2.5.4 生理生化特征测定第31-32页
        2.5.5 分子生物学鉴定第32-35页
            2.5.5.1 DNA提取试剂第32页
            2.5.5.2 所用仪器第32页
            2.5.5.3 供试菌株DNA的提取第32-33页
            2.5.5.4 目的片段PCR扩增第33-34页
            2.5.5.5 PCR产物回收第34页
            2.5.5.6 回收产物检测第34页
            2.5.5.7 特异扩增片段的克隆第34-35页
    2.6 菌株FX-H-51 发酵条件优化第35-36页
        2.6.1 材料第35页
            2.6.1.1 供试菌种第35页
            2.6.1.2 培养基第35页
        2.6.2 单因素试验初步优化放线菌FX-H-51 菌株的发酵条件第35-36页
            2.6.2.1 温度对发酵滤液抑菌作用的影响第35页
            2.6.2.2 初始pH值对发酵滤液抑菌作用的影响第35页
            2.6.2.3 摇床转速对发酵滤液抑菌作用的影响第35-36页
            2.6.2.4 装液量对发酵滤液抑菌作用的影响第36页
            2.6.2.5 发酵时间对发酵滤液抑菌作用的影响第36页
        2.6.3 菌株FX-H-51 发酵条件的正交试验第36页
    2.7 放线菌FX-H-51 菌株发酵液稳定性第36-37页
        2.7.1 放线菌FX-H-51 菌株发酵液的制备第36-37页
        2.7.2 放线菌FX-H-51 菌株发酵液的测定第37页
            2.7.2.1 发酵液对热的稳定性测定第37页
            2.7.2.2 发酵液对酸碱的稳定性测定第37页
            2.7.2.3 发酵液对紫外线的稳定性测定第37页
    2.8 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性成分分离纯化第37-41页
        2.8.1 材料第37-38页
            2.8.1.1 培养基第37页
            2.8.1.2 主要试剂仪器第37-38页
        2.8.2 发酵液的制备第38页
        2.8.3 萃取剂的选择第38页
        2.8.4 粗提物的制备第38页
        2.8.5 抑菌活性物质粗提物的薄层层析检测第38-39页
            2.8.5.1 点样第38页
            2.8.5.2 展层系统的选择第38-39页
            2.8.5.3 展层第39页
            2.8.5.4 检测第39页
        2.8.6 抑菌活性物质粗提物的硅胶柱层析第39-41页
            2.8.6.1 预处理第39页
            2.8.6.2 上样洗脱第39页
            2.8.6.3 色谱条带的活性跟踪第39页
            2.8.6.4 二次硅胶柱层析第39-40页
            2.8.6.5 抑菌活性物质的纯度检测第40页
            2.8.6.6 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物中活性化合物抑菌活性测定第40-41页
3 结果与分析第41-61页
    3.1 土壤放线菌分离纯化结果第41页
    3.2 拮抗放线菌初筛结果第41-43页
    3.3 拮抗放线菌对小麦纹枯病、根腐病的防治效果第43-44页
    3.4 拮抗放线菌的复筛结果第44-45页
    3.5 拮抗放线菌FX-H-51 菌株形态学观察结果第45-46页
    3.6 拮抗放线菌FX-H-51 菌株培养特征结果第46页
    3.7 拮抗放线菌FX-H-51 菌株生理生化特性测定结果第46-47页
    3.8 拮抗放线菌FX-H-51 菌株分子生物学鉴定结果第47-49页
        3.8.1 16SrDNA PCR扩增序列第47-48页
        3.8.2 拮抗放线菌FX-H-51 菌株系统发育分析第48-49页
    3.9 拮抗放线菌FX-H-51 菌株发酵条件的研究与优化第49-54页
        3.9.1 温度对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响第49-50页
        3.9.2 初始pH值对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响第50-51页
        3.9.3 摇床转速对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响第51页
        3.9.4 发酵培养基装液量对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响第51-52页
        3.9.5 发酵时间对放线菌FX-H-51 菌株发酵产物抑菌活性的影响第52-53页
        3.9.6 优化发酵培养条件正交试验结果第53-54页
    3.10 拮抗放线菌FX-H-51 菌株发酵液稳定性第54-56页
        3.10.1 温度对发酵液稳定性影响结果第54-55页
        3.10.2 pH值对发酵液稳定性影响结果第55-56页
        3.10.3 紫外线对发酵液稳定性影响结果第56页
    3.11 放线菌FX-H-51 菌株发酵产物的抑菌活性成分分离纯化结果第56-61页
        3.11.1 溶媒萃取剂的选择第56-57页
        3.11.2 展层系统的选择结果第57-58页
        3.11.3 一次硅胶柱层析结果第58-59页
        3.11.4 色谱条带活性跟踪结果第59页
        3.11.5 二次层析结果第59-61页
4 讨论第61-63页
    4.1 土壤放线菌的分离与纯化第61页
    4.2 放线菌FX-H-51 菌株的鉴定第61-62页
    4.3 放线菌FX-H-51 菌株发酵条件的优化第62页
    4.4 抑菌活性物质的分离纯化第62页
    4.5 关于菌株FX-H-51 的开发前景第62-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-72页
致谢第72页

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