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几种昆虫 病原真菌抗蚜虫活性分析及其功能蛋白的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-20页
第一章 /CHAPTER Ⅰ第20-45页
   ·Microbilal biopesticides第20-44页
     ·Entomopathogenic viruses第20-21页
     ·Entomopathogenic bacteria第21页
     ·Entomopathogenic nematodes第21-22页
     ·Entomopathogenic fungi第22-36页
       ·Life cycle of entomopathogenic fungi第22-26页
       ·Beauveria bassiana (Clavicipitaceae)第26-32页
       ·Entomopathogenic fungal virulence enzymes第32-36页
         ·Proteases and peptidases第33-34页
         ·Chitinases第34-35页
         ·Lipases第35页
         ·The function of phospholipases in cuticle penetration第35-36页
     ·The fungal breaching process第36-43页
       ·Conidial adhesion to the cuticle surface第37-39页
         ·The structure of cuticle第37-38页
         ·Adhesion of conidium第38-39页
       ·Appressorium formation and penetration of epicuticle第39-43页
         ·Spore germination第39-43页
     ·Host defense systems第43页
       ·Melanization第43页
       ·Cellular reactions第43页
       ·Humoral reactions第43页
       ·Production of protease inhibitors第43页
     ·Advantages of using fungi as insecticides第43-44页
     ·Disadvantages of the fungi as biocontrol agents第44页
   ·Objectives第44-45页
第二章 /CHAPTER Ⅱ第45-56页
   ·Insects第45页
   ·Bacterial Strains and culture condition第45页
   ·Fungal strains第45-46页
   ·Growth on PDA medium第46页
   ·Conidial suspension第46页
   ·Fungal culture broth第46页
   ·Fungal Filtrate第46页
   ·Precipitation and concentration of crude proteins第46-47页
   ·Electrophoresis第47页
   ·In vivo crud proteins bioassay第47-48页
   ·Insect bioassays第48页
   ·Phenoloxidase activity assay第48页
   ·Physiochemical properties of protein第48页
   ·Molecular mass and identification of nature of protein第48-49页
   ·Two-dimensional (2D) electrophoresis第49页
   ·Mass spectrum analysis and partial amino acid sequences第49页
   ·DNA and RNA preparation第49-50页
   ·Specific Primer designing第50页
   ·Amplification and sequencing of the protease第50-51页
   ·Ligation of the PCR product into pMD18-T vector第51页
   ·Transformation of E.coli DH5α competent cells第51页
   ·PCR identification第51-52页
   ·Homology of the protease gene第52页
   ·Filtrate bioassay第52页
   ·Conidial Bioassay第52页
   ·Enzymatic activities of the filtrate第52-53页
     ·Chitinase assay第52页
     ·Protease assay第52-53页
     ·Lipase assay第53页
   ·Total protein concentration第53页
   ·Toxicity assays第53页
   ·Conidial Virulence assays第53-54页
   ·Wet Conidial Virulence assay第54页
   ·Dry conidial virulence assay第54页
   ·In vivo conidial suspension bioassay第54-55页
   ·Invivo filtrate bioassay第55页
   ·In vivo crud proteins bioassay第55页
   ·Statistical analysis第55-56页
第三章 /CHAPTER Ⅲ第56-71页
   ·Introduction第56-57页
   ·Results第57-71页
     ·Growth on PDA第57-58页
     ·SDS-page electrophoresis第58-59页
     ·Spores bioactivity for all six Fungi第59-63页
       ·Conidial virulence in the presence of wetting agent第59-60页
       ·Dry conidial bioassay第60-63页
     ·In vivo virulence bioassay第63-64页
     ·In vivo virulence bioassay第64-70页
       ·In vivo spores bioassay第64-66页
       ·In vivo filtrate bioassay第66-67页
       ·In vivo crude proteins bioassay第67-70页
     ·Concentration of proteins第70-71页
第四章 /CHAPTER Ⅳ第71-79页
   ·Introduction第71-72页
   ·Results第72-79页
     ·Aphidicial activities of the filtrate and conidia第72-75页
     ·Enzymatic activity of the filtrate第75-79页
第五章 /CHAPTER Ⅴ第79-86页
   ·Introduction第79-80页
   ·Results第80-86页
     ·Identification, purification and characterization of toxin protein第80-82页
     ·Biological activity第82-83页
     ·Assays of PO activity第83-84页
     ·Physiochemical properties第84页
     ·2D electrophoresis and Partial amino acid sequence determination第84-86页
第六章 /CHAPTER Ⅵ第86-95页
   ·Introduction第86-87页
   ·Results第87-95页
     ·Isolation of B. bassiana 70 Protease Gene第87-88页
     ·Construction of Recombinant Plasmid pMD18-T第88页
     ·Transformation of the cloned vector in to E.coli DH5α competent cell第88页
     ·Identification PCR第88-95页
DISCUSSION第95-104页
Conclusion第104-106页
参考文献/References第106-136页
ACKNOWLEDGEMENTS第136-138页
附录第138-139页

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