| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 引言 | 第12-17页 |
| 0.1 植物磷转运蛋白基因的分子特征 | 第12-13页 |
| 0.2 植物磷转运蛋白基因的表达模式 | 第13-15页 |
| 0.2.1 组织表达模式 | 第13-14页 |
| 0.2.2 磷响应表达基因模式 | 第14-15页 |
| 0.3 植物磷转运蛋白基因的研究现状 | 第15-16页 |
| 0.3.1 植物磷转运蛋白生物学功能 | 第15页 |
| 0.3.2 磷转运蛋白的植物基因工程 | 第15-16页 |
| 0.4 本实验研究目的 | 第16-17页 |
| 第1章 LePT1基因植物表达载体的构建 | 第17-28页 |
| 1.1 主要仪器设备、试验材料及基本试剂 | 第17-18页 |
| 1.1.1 仪器设备 | 第17页 |
| 1.1.2 菌种及质粒 | 第17页 |
| 1.1.3 酶及试剂盒 | 第17-18页 |
| 1.1.4 培养基 | 第18页 |
| 1.2 试验方法 | 第18-25页 |
| 1.2.1 LePT1基因的扩增 | 第18-19页 |
| 1.2.2 中间载体pROK219-LePT1的构建 | 第19-22页 |
| 1.2.3 LePT1基因的植物表达载体pCAMBIA2300-LePT1的构建 | 第22-24页 |
| 1.2.4 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第24-25页 |
| 1.3 结果与分析 | 第25-27页 |
| 1.3.1 质粒pCAMBIA2300-LePT1构建结果 | 第25-26页 |
| 1.3.2 pCAMBIA2300-LePT1质粒转化农杆菌结果 | 第26-27页 |
| 1.4 讨论 | 第27页 |
| 1.5 结论 | 第27-28页 |
| 第2章 根癌农杆菌介导的LePT1基因的遗传转化 | 第28-40页 |
| 2.1 主要仪器设备、试验材料及基本试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.1 仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.2 试验材料 | 第28页 |
| 2.1.3 培养基 | 第28-29页 |
| 2.1.4 试剂配制方法 | 第29-30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 烟草无菌苗的培养 | 第30页 |
| 2.2.2 烟草再生体系的建立 | 第30-31页 |
| 2.2.3 Kan选择压确定 | 第31页 |
| 2.2.4 根癌农杆菌的培养 | 第31页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的LePT1基因的遗传转化 | 第31页 |
| 2.2.6 筛选培养 | 第31页 |
| 2.2.7 生根培养 | 第31页 |
| 2.2.8 转基因植株的炼苗及移栽 | 第31-32页 |
| 2.2.9 烟草转化植株的PCR检测 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.3.1 不同培养基对烟草叶片分化的影响 | 第33-34页 |
| 2.3.2 不同培养基对烟草根的诱导 | 第34页 |
| 2.3.3 卡那霉素对不定芽分化的影响 | 第34-35页 |
| 2.3.4 转基因烟草的获得 | 第35-36页 |
| 2.3.5 PCR扩增鉴定结果 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-39页 |
| 2.4.1 烟草种子的灭菌 | 第38页 |
| 2.4.2 烟草再生体系的建立 | 第38页 |
| 2.4.3 卡那霉素对不定芽分化的影响 | 第38页 |
| 2.4.4 农杆菌转化烟草及共培养 | 第38-39页 |
| 2.4.5 转基因植株PCR检测 | 第39页 |
| 2.5 结论 | 第39-40页 |
| 第3章 转基因植株的分子及生理生化检测 | 第40-50页 |
| 3.1 主要仪器设备、试验材料及基本试剂 | 第40-42页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第40页 |
| 3.1.2 试剂配制方法 | 第40-41页 |
| 3.1.3 试剂盒 | 第41页 |
| 3.1.4 培养基 | 第41-42页 |
| 3.2 试验方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1 T1代植株水培 | 第42页 |
| 3.2.2 转基因植株RT-PCR检测 | 第42-44页 |
| 3.2.3 转基因植株在低磷胁迫下的表型观察 | 第44页 |
| 3.2.4 转基因植株磷含量测定 | 第44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-48页 |
| 3.3.1 转基因植株的RT-PCR检测 | 第44-45页 |
| 3.3.2 转基因植株在低磷胁迫及正常供磷条件下的生长状况 | 第45-48页 |
| 3.3.3 转基因烟草植株磷含量测定 | 第48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-50页 |
| 3.4.1 转基因植株的RT-PCR检测 | 第48-49页 |
| 3.4.2 转基因植株生理生化检测 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 缩写符号说明 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第57页 |
