| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第12-22页 |
| 0.1 概述 | 第12-20页 |
| 0.1.1 铜绿假单胞菌概述 | 第12-13页 |
| 0.1.2 生物被膜概述 | 第13-18页 |
| 0.1.2.1 胞外多糖 | 第13-17页 |
| 0.1.2.2 多聚体菌细胞附属物 | 第17-18页 |
| 0.1.2.3 胞外 DNA | 第18页 |
| 0.1.3 群体感应(Quorum sensing) | 第18-20页 |
| 0.2 菌株分析分类 | 第20页 |
| 0.3 实验目的及意义 | 第20-22页 |
| 第1章 胞外多糖Psl与耐药性 | 第22-31页 |
| 1.1 材料和方法 | 第22-25页 |
| 1.1.1 材料 | 第22-24页 |
| 1.1.1.1 菌株 | 第22-23页 |
| 1.1.1.2 试剂、缓冲液和培养基: | 第23-24页 |
| 1.1.1.3 仪器 | 第24页 |
| 1.1.2 方法 | 第24-25页 |
| 1.1.2.1 MIC检测 | 第24页 |
| 1.1.2.2 Psl多糖提取 | 第24-25页 |
| 1.1.2.3 Immuno-blotting检测Psl多糖 | 第25页 |
| 1.1.2.4 标准曲线的绘制 | 第25页 |
| 1.1.2.5 统计结果并分析 | 第25页 |
| 1.2 结果 | 第25-28页 |
| 1.2.1 标准曲线的绘制 | 第25-26页 |
| 1.2.2 菌株的耐药性与其分离地区及生存环境的关系 | 第26-28页 |
| 1.2.3 Psl多糖产量与浮游菌最低抑菌浓度(MIC)的关系 | 第28页 |
| 1.3 讨论 | 第28-31页 |
| 第2章 运动性差异分析 | 第31-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1.1 检测菌株 | 第32页 |
| 2.1.1.2 试剂与培养基 | 第32-33页 |
| 2.1.1.3 仪器 | 第33页 |
| 2.1.2 方法 | 第33-35页 |
| 2.1.2.1 游动(Swimming)能力检测 | 第33-34页 |
| 2.1.2.2 颤触运动( twitching)能力检测 | 第34页 |
| 2.1.2.3 丛集运动( swarming)能力检测 | 第34页 |
| 2.1.2.4 鼠李糖脂分泌检测 | 第34页 |
| 2.1.2.5 统计学处理 | 第34-35页 |
| 2.2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.2.1 菌株的运动性与其生存环境的关系 | 第36-38页 |
| 2.2.2 鼠李糖脂与菌体生存环境及swarming之间的关系 | 第38-39页 |
| 2.3 讨论 | 第39-40页 |
| 第3章 群体感应和毒力因子释放 | 第40-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-44页 |
| 3.1.1 材料 | 第41-42页 |
| 3.1.1.1 菌株 | 第41页 |
| 3.1.1.2 试剂与培养基 | 第41-42页 |
| 3.1.1.3 仪器 | 第42页 |
| 3.1.2 方法 | 第42-44页 |
| 3.1.2.1 绿脓素测定 | 第42-43页 |
| 1 )三划线平板色素直接观察 | 第42页 |
| 2 )菌液颜色观察 | 第42页 |
| 3 )色素提取测定 | 第42-43页 |
| 3.1.2.2 弹性蛋白酶的测定 | 第43页 |
| 3.1.2.3 群体感应信号分子检测 | 第43-44页 |
| 3.2 结果 | 第44-48页 |
| 3.2.1 不同条件下生长菌株产生绿脓素的水平 | 第44-47页 |
| 3.2.2 群体感应信号分子、毒力因子与生存环境的关系 | 第47-48页 |
| 3.2.3 群体感应信号分子与毒力因子的关系 | 第48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第4章 生物被膜形成能力 | 第50-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第50-51页 |
| 4.1.1 材料 | 第50-51页 |
| 4.1.1.1 菌株 | 第50页 |
| 4.1.1.2 试剂与培养基 | 第50-51页 |
| 4.1.1.3 仪器 | 第51页 |
| 4.1.2 方法 | 第51页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第51-53页 |
| 4.2.1 吸附能力与生存环境的关系 | 第51-52页 |
| 4.2.2 吸附能力与其他因素之间的关系 | 第52-53页 |
| 4.3 讨论 | 第53-55页 |
| 第5章 结论及展望 | 第55-58页 |
| 5.1 细菌所生存的环境不直接影响菌体的抗药性，导致细菌抗药的主要诱因是所生存环境中抗生素的存在。不同国家来源的菌株耐药性的差异很可能与各国对抗生素使用的限制程度有一定关系 | 第55页 |
| 5.2 多糖产量较高的菌与产量很低的菌可能采用了完全不同的抵御抗生素的策略 | 第55页 |
| 5.3 液体环境菌株尤其是寡营养环境大多具有运动性，体内菌株大多丧失部分或者全部运动能力。运动能力对于除了 CF病人体内的其他生存环境来说是必要的。swarming相对swimming和twitching来说更复杂，影响因素更多 | 第55-56页 |
| 5.4 两种毒力因子释放比例均为人体来源大于自然环境来源，体表来源大于体内来源。自然环境来源菌株无群感效应信号分子缺陷型，而且不产信号分子的菌株全都为人体来源。可见群体感应信号分子对于铜绿假单胞菌的生存是很重要的，尤其在自然环境中 | 第56页 |
| 5.5 自然环境菌株具有吸附能力比例远大于人体环境，且液体环境中具有吸附能力菌株比例也较高，体表菌株中具有吸附能力和强吸附能力比例要远大于体内 | 第56-57页 |
| 5.6 影响吸附能力的因素有许多，除Psl产量、鞭毛和菌毛外，群体感应信号分子、弹性蛋白酶分泌等也可能对吸附能力有影响 | 第57页 |
| 5.7 CF病人来源菌株多不具有运动性，Psl产量、毒力因子释放水平和吸附能力较低且大多菌株浮游状态具有耐药性的原因可能是人体免疫系统和抗生素长期选择的结果 | 第57页 |
| 5.8 进一步工作方向 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 符号缩写说明 | 第65-66页 |
| 攻读学位期间发表论文以及参加科研情况 | 第66页 |
