| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第11-29页 |
| 病毒 | 第11页 |
| 1.1 疱疹病毒 | 第11-24页 |
| 1.1.1 疱疹病毒科(Herpesviridae family)的基本概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simplex virustype 1)的结构 | 第12-14页 |
| 1.1.3 HSV-1基因组的结构 | 第14-15页 |
| 1.1.4 HSV-1的生活周期 | 第15-18页 |
| 1.1.5 HSV-1的致病特点及发病机制 | 第18-22页 |
| 1.1.6 抗HSV-1药物及疫苗的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.2 实验动物模型 | 第24-26页 |
| 1.2.1 实验动物模型在人类病毒感染生物学的中的应用 | 第24-25页 |
| 1.2.2 HSV-1感染动物模型 | 第25-26页 |
| 1.2.3 恒河猴作为实验动物模型的优势和目前发展情况 | 第26页 |
| 1.3 实验思路 | 第26-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-52页 |
| 2.1 材料 | 第29-34页 |
| 2.1.1 病毒 | 第29页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第29页 |
| 2.1.3 哺乳动物细胞系 | 第29页 |
| 2.1.4 工程菌 | 第29页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第29-30页 |
| 2.1.6 质粒与载体 | 第30-31页 |
| 2.1.7 试剂盒 | 第31页 |
| 2.1.8 培养基 | 第31页 |
| 2.1.9 商品化溶液和试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.10 化学试剂 | 第32页 |
| 2.1.11 实验耗材 | 第32-33页 |
| 2.1.12 抗体 | 第33页 |
| 2.1.13 仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.1.14 软件 | 第34页 |
| 2.2 方法 | 第34-52页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第34-36页 |
| 2.2.2 病毒感染和扩增(Vero细胞) | 第36页 |
| 2.2.3 病毒基因组DNA提取 | 第36-37页 |
| 2.2.4 病毒基因组PCR及测序 | 第37页 |
| 2.2.5 病毒滴度检测 | 第37-38页 |
| 2.2.6 病毒实时定量PCR标准品构建及测序鉴定 | 第38-43页 |
| 2.2.7 恒河猴麻醉攻毒 | 第43页 |
| 2.2.8 恒河猴外周血采集和血常规检测 | 第43页 |
| 2.2.9 恒河猴外周血淋巴细胞分离 | 第43-44页 |
| 2.2.10 恒河猴外周血淋巴细胞流式分析检测 | 第44页 |
| 2.2.11 恒河猴分泌物拭子采集、组织采集和样品中病毒核酸的提取 | 第44-45页 |
| 2.2.12 恒河猴外周血淋巴细胞RNA提取 | 第45页 |
| 2.2.13 实时定量PCR检测恒河猴分泌物和组织中的病毒载量 | 第45-46页 |
| 2.2.14 恒河猴血清抗体中和实验 | 第46页 |
| 2.2.15 恒河猴组织切片制作及HE染色 | 第46-47页 |
| 2.2.16 免疫组织化学技术检测 | 第47-48页 |
| 2.2.17 神经系统组织与Vero细胞共培养 | 第48页 |
| 2.2.18 恒河猴外周血淋巴细胞基因差异表达分析 | 第48-51页 |
| 2.2.19 序列比对(Sequence alignment) | 第51-52页 |
| 3 结果和分析 | 第52-82页 |
| 3.1 HSV-1 8F毒株扩增及病毒毒力的测定 | 第52页 |
| 3.2 PCR扩增HSV-1-8F毒株基因组及测序 | 第52-53页 |
| 3.3 急性感染期结果 | 第53-68页 |
| 3.3.1 HSV-1感染恒河猴后恒河猴体温变化 | 第53-54页 |
| 3.3.2 HSV-1感染恒河猴后,恒河猴的临床表现症状 | 第54-57页 |
| 3.3.3 恒河猴外周血血常规的变化 | 第57-59页 |
| 3.3.4 恒河猴外周血淋巴细胞亚群的变化 | 第59-61页 |
| 3.3.5 恒河猴血清中和抗体的测定 | 第61-62页 |
| 3.3.6 恒河猴分泌物中HSV-1的Real-time PCR检测 | 第62-64页 |
| 3.3.7 恒河猴组织器官中的病毒分布和病毒载量的Real-time PCR检测 | 第64-66页 |
| 3.3.8 恒河猴组织组织的病理切片分析 | 第66-68页 |
| 3.3.9 恒河猴组织免疫组织化学检测 | 第68页 |
| 3.4 慢性感染 | 第68-73页 |
| 3.4.1 慢性感染的临床表现 | 第68-69页 |
| 3.4.2 普通PCR检测体液拭子中的病毒核酸 | 第69-70页 |
| 3.4.3 慢性感染期14067和14139号恒河猴组织病理切片分析 | 第70-71页 |
| 3.4.4 组织与Vero细胞共培养后病毒核酸PCR检测 | 第71-72页 |
| 3.4.5 HSV-1潜伏期14067和14139号恒河猴血清中和实验 | 第72-73页 |
| 3.5 HSV-1感染恒河猴后恒河猴外周血淋巴细胞转录本测序检测 | 第73-82页 |
| 3.5.1 恒河猴外周血淋巴细胞基因差异表达的筛选及生物信息学分析 | 第73-82页 |
| 4 讨论 | 第82-89页 |
| 5 课题研究总结 | 第89-90页 |
| 6 参考文献 | 第90-101页 |
| 附录 | 第101-119页 |
| 附录一 主要缩略词表 | 第101-103页 |
| 附录二 主要溶液的配制方法 | 第103-105页 |
| 附录三 论文所用相关序列 | 第105-113页 |
| 附录四 测序峰图 | 第113-114页 |
| 附录五 流式细胞亚群分析 | 第114-116页 |
| 附录六 器官取材表 | 第116-117页 |
| 附录七 52个显著基因的信息 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 个人简历 | 第121-122页 |
