| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 双生病毒的危害 | 第12页 |
| 1.2 双生病毒的分类与结构特征 | 第12-17页 |
| 1.2.1 玉米线条病毒属 | 第12-13页 |
| 1.2.2 曲顶病毒属 | 第13-14页 |
| 1.2.3 番茄伪曲顶病毒属 | 第14-15页 |
| 1.2.4 菜豆金色花叶病毒属 | 第15-17页 |
| 1.3 双生病毒的侵染 | 第17-19页 |
| 1.3.1 双生病毒的复制 | 第17-18页 |
| 1.3.2 双生病毒的转录 | 第18页 |
| 1.3.3 双生病毒的移动 | 第18页 |
| 1.3.4 双生病毒的介体传播 | 第18页 |
| 1.3.5 重组是双生病毒变异和病害流行的重要因素 | 第18-19页 |
| 1.4 双生病毒复合体 | 第19-21页 |
| 1.4.1 DNA1分子及其特征 | 第19页 |
| 1.4.2 DNAβ分子及其特征 | 第19-20页 |
| 1.4.3 其它小分子DNA | 第20页 |
| 1.4.4 双生病毒病害复合体 | 第20-21页 |
| 1.5 双生病毒的检测方法 | 第21-23页 |
| 1.6 双生病毒的防治 | 第23-24页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-50页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第26页 |
| 2.1.3 试剂与耗材 | 第26页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.5 实验所需试剂及配制 | 第27-29页 |
| 2.1.6 引物的合成 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-50页 |
| 2.2.1 植物基因组DNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 PCR反应 | 第30-32页 |
| 2.2.2.1 两种双生病毒PCR扩增反应体系 | 第30-31页 |
| 2.2.2.2 卫星TYLCVNB的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 2.2.3 PCR产物的克隆与测序 | 第32-33页 |
| 2.2.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第32页 |
| 2.2.3.2 切胶回收 | 第32-33页 |
| 2.2.4 DNA克隆技术 | 第33-36页 |
| 2.2.4.1 连接方法 | 第33页 |
| 2.2.4.2 大肠杆菌感受态细胞制备方法 | 第33-34页 |
| 2.2.4.3 连接产物转化大肠杆菌 | 第34-35页 |
| 2.2.4.4 碱裂解法提取质粒DNA | 第35-36页 |
| 2.2.5 重组质粒转化农杆菌 | 第36-38页 |
| 2.2.5.1 农杆菌感受态的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.5.2 质粒转化农杆菌 | 第37页 |
| 2.2.5.3 农杆菌接种 | 第37-38页 |
| 2.2.6 Southern blot分析 | 第38-42页 |
| 2.2.6.1 标记探针 | 第38-39页 |
| 2.2.6.2 标记效率的确定 | 第39-40页 |
| 2.2.6.3 电泳及转膜 | 第40-41页 |
| 2.2.6.4 预杂交 | 第41页 |
| 2.2.6.5 杂交 | 第41-42页 |
| 2.2.7 中国番木瓜曲叶病毒分离物侵染性克隆的构建 | 第42-45页 |
| 2.2.7.1 构建PaLCuCNV分离物侵染性克隆的的策略 | 第42-43页 |
| 2.2.7.2 构建PaLCuCNV分离物侵染性克隆的的具体步骤 | 第43-45页 |
| 2.2.8 TYLCVNB分离物侵染性克隆的构建 | 第45-50页 |
| 2.2.8.1 构建TYLCVNB分离物侵染性克隆的策略 | 第45-47页 |
| 2.2.8.2 构建TYLCVNB分离物侵染性克隆的的具体步骤 | 第47-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-57页 |
| 3.1 pCAMBIA2200-PaLCuCNV-1.4A克隆的验证 | 第50-51页 |
| 3.2 pCAMBIA2200-TYLCVNB-2.0A克隆的验证 | 第51页 |
| 3.3 TYLCV与TYLCVNB的协作 | 第51-54页 |
| 3.3.1 TYLCV及TYLCVNB的致病性分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2 TYLCVNB对TYLCV病毒DNA积累水平的作用 | 第52-54页 |
| 3.4 PaLCuCNV与TYLCVNB的协作 | 第54-57页 |
| 3.4.1 PaLCuCNV及TYLCVNB的致病性分析 | 第54-55页 |
| 3.4.2 TYLCVNB对PaLCuCNV病毒DNA积累水平的作用 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
