| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 木霉菌研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 木霉菌分类地位 | 第10页 |
| 1.1.2 木霉菌的生防机制 | 第10-12页 |
| 1.2 葡聚糖酶的研究概况 | 第12-15页 |
| 1.2.1 葡聚糖酶的分类 | 第12页 |
| 1.2.2 葡聚糖酶的来源 | 第12页 |
| 1.2.3 葡聚糖酶的功能 | 第12-13页 |
| 1.2.4 葡聚糖酶的应用 | 第13-15页 |
| 1.3 木霉菌葡聚糖酶的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3.1 木霉菌葡聚糖酶的种类和特点 | 第15页 |
| 1.3.2 木霉菌葡聚糖酶的生防作用 | 第15页 |
| 1.3.3 木霉菌葡聚糖酶的主要研究方法 | 第15-16页 |
| 1.3.4 木霉菌葡聚糖酶基因的克隆及表达特性 | 第16页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 棘孢木霉ACCC30536葡聚糖酶Glu基因的克隆及序列分析 | 第17-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试验仪器设备 | 第17页 |
| 2.2 研究方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 培养基的配置 | 第17页 |
| 2.2.2 棘孢木霉ACCC30536菌株cDNA获取 | 第17-19页 |
| 2.2.3 棘孢木霉Glu基因全长cDNA的获取 | 第19页 |
| 2.2.4 棘孢木霉Glu基因核苷酸测序 | 第19-22页 |
| 2.2.5 棘孢木霉Glu基因的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-31页 |
| 2.3.1 棘孢木霉总RNA | 第22-23页 |
| 2.3.2 棘孢木霉Glu基因cDNA序列的扩增 | 第23页 |
| 2.3.3 棘孢木霉Glu基因cDNA的转化与鉴定 | 第23-24页 |
| 2.3.4 棘孢木霉Glu基因序列的分析 | 第24-26页 |
| 2.3.5 棘孢木霉Glu蛋白的特性分析 | 第26-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-32页 |
| 3 棘孢木霉ACCC30536葡聚糖酶Glu基因的表达特性研究 | 第32-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 供试菌株与树种 | 第32页 |
| 3.1.2 供试试剂 | 第32页 |
| 3.1.3 供试仪器 | 第32页 |
| 3.2 研究方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 培养基的配置 | 第32-33页 |
| 3.2.2 菌丝体的诱导培养 | 第33页 |
| 3.2.3 菌丝体总的RNA提取及反转录 | 第33页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 3.3.1 棘孢木霉Glu基因在MM诱导下的表达模式 | 第34-35页 |
| 3.3.2 棘孢木霉Glu基因在N饥饿诱导下的表达模式 | 第35页 |
| 3.3.3 棘孢木霉Glu基因在C饥饿诱导下的表达模式 | 第35-36页 |
| 3.3.4 棘孢木霉Glu基因在羧甲基纤维素钠诱导下的表达模式 | 第36页 |
| 3.3.5 棘孢木霉Glu基因在山新杨茎粉诱导下的表达模式 | 第36-37页 |
| 3.3.6 棘孢木霉Glu基因在山新杨叶粉诱导下的表达模式 | 第37页 |
| 3.3.7 棘孢木霉Glu基因在山新杨根粉诱导下的表达模式 | 第37-38页 |
| 3.3.8 棘孢木霉Glu基因在杨树叶枯病菌细胞壁诱导下的表达模式 | 第38页 |
| 3.3.9 棘孢木霉Glu基因在杨树叶枯病菌发酵液诱导下的表达模式 | 第38-39页 |
| 3.3.10 棘孢木霉Glu基因在杨树烂皮病菌细胞壁诱导下的表达模式 | 第39页 |
| 3.3.11 棘孢木霉Glu基因在杨树烂皮病菌发酵液诱导下的表达模式 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 4 棘孢木霉ACCC30536葡聚糖酶Glu基因的原核表达及酶活测定 | 第42-54页 |
| 4.1 试验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 供试试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 供试菌种 | 第42页 |
| 4.1.3 主要试验仪器设备 | 第42页 |
| 4.2 研究方法 | 第42-47页 |
| 4.2.1 原核表达载体的选择 | 第42页 |
| 4.2.2 原核表达载体pGEX-4T2Glu的构建 | 第42-44页 |
| 4.2.3 重组表达载体pGEX-4T2Glu转化大肠杆菌BL21 | 第44-45页 |
| 4.2.4 重组蛋白的诱导表达 | 第45-46页 |
| 4.2.5 重组酶酶活测定 | 第46-47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-52页 |
| 4.3.1 重组表达载体pGEX-4T-2 质粒的提取 | 第47-48页 |
| 4.3.2 带酶切位点的棘孢木霉Glu基因序列的扩增 | 第48页 |
| 4.3.3 重组表达载体pGEX-Glu的鉴定 | 第48-50页 |
| 4.3.4 重组蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
| 4.3.5 重组酶酶活测定 | 第51-52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
