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水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号受体Filp及其互作蛋白PXO02715共调控元的鉴定与功能分析

摘要第5-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
功能注释表第13-14页
第一章 引言第14-20页
    1.1 细菌中第二信使c-di-GMP信号调控网络第14-17页
        1.1.1 c-di-GMP的合成途径第14-15页
        1.1.2 c-di-GMP的降解途径第15页
        1.1.3 c-di-GMP信号受体第15-17页
        1.1.4 c-di-GMP信号调控下游表型第17页
    1.2 水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号网络第17-18页
    1.3 水稻白叶枯病菌c-di-GMP受体第18页
        1.3.1 转录调控因子Clp第18页
        1.3.2 PilZ结构域蛋白第18页
        1.3.3 退化的GGDEF/EAL结构域蛋白第18页
    1.4 本研究的目的意义和技术路线第18-20页
        1.4.1 目的意义第18-19页
        1.4.2 技术路线第19-20页
第二章 Filp/PXO_02715 共调控元的验证第20-32页
    2.1 实验材料第20-21页
        2.1.1 菌株、质粒和引物第20页
        2.1.2 主要的仪器和试剂第20-21页
        2.1.3 培养基和菌株培养条件第21页
    2.2 实验方法第21-24页
        2.2.1 原核表达载体构建第21页
        2.2.2 蛋白表达和纯化第21-22页
        2.2.3 蛋白抗体制作第22-23页
        2.2.4 蛋白表达情况的分析第23-24页
    2.3 结果与分析第24-30页
        2.3.1 目的基因PCR扩增及TA克隆第24-26页
        2.3.2 原核表达载体的构建第26-28页
        2.3.3 蛋白表达和纯化第28-29页
        2.3.4 不同Xoo菌株总蛋白的制备第29-30页
        2.3.5 蛋白表达情况的分析第30页
    2.4 讨论和小结第30-32页
第三章 Filp/PXO_02715 共调控元转录分析第32-36页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 菌株、质粒和引物第32页
        3.1.2 主要的仪器和试剂第32页
        3.1.3 培养基和菌株培养条件第32-33页
    3.2 实验方法第33页
        3.2.1 不同引物特异性验证第33页
        3.2.2 不同菌株RNA的提取第33页
        3.2.3 qRT-PCR检测下游共调控元基因的表达第33页
    3.3 结果与分析第33-35页
        3.3.1 不同菌株RNA的提取第33-34页
        3.3.2 qRT-PCR分析下调表达蛋白相对基因的表达第34-35页
        3.3.3 qRT-PCR分析上调表达蛋白相对基因的表达第35页
    3.4 讨论和小结第35-36页
第四章 Filp/PXO_02715 共调控蛋白的功能分析第36-51页
    4.1 实验材料第36-38页
        4.1.1 菌株、质粒和引物第36页
        4.1.2 主要的试剂和仪器第36页
        4.1.3 培养基和菌株培养条件第36-38页
    4.2 实验方法第38-41页
        4.2.1 突变体及互补菌株构建第38-39页
        4.2.2 胞内c-di-GMP浓度测定第39-40页
        4.2.3 突变体表型测定第40-41页
    4.3 结果与分析第41-49页
        4.3.1 突变体及互补菌株构建第41-45页
        4.3.2 胞内c-di-GMP浓度测定第45页
        4.3.3 突变体表型测定第45-49页
    4.4 讨论和小结第49-51页
第五章 水稻白叶枯病菌HD-GYP结构域蛋白PXO_03945 的功能鉴定(附录)第51-60页
    5.1 实验材料第51页
        5.1.1 菌株、质粒和引物第51页
        5.1.2 主要的试剂和仪器第51页
        5.1.3 培养基和菌株培养条件第51页
    5.2 实验方法第51-52页
        5.2.1 突变体及互补菌株构建第51-52页
        5.2.2 胞内c-di-GMP浓度测定第52页
        5.2.3 突变体表型测定第52页
    5.3 结果与分析第52-58页
        5.3.1 PXO_03945 基因克隆、功能结构域和序列同源性第52-53页
        5.3.2 PXO_03945 突变体及互补菌株构建第53-55页
        5.3.3 ?PXO_03945 胞内c-di-GMP浓度第55-56页
        5.3.4 突变体表型测定第56-58页
    5.4 讨论和小结第58-60页
第六章 全文结论和展望第60-62页
参考文献第62-69页
附录第69-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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