| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一部分 前言 | 第18-36页 |
| 第一章 前言 | 第18-36页 |
| 1.1 课题背景介绍 | 第18-33页 |
| 1.1.1 肝损伤研究的介绍 | 第18-20页 |
| 1.1.1.1 肝损伤的研究背景 | 第18-19页 |
| 1.1.1.2 酒精性肝病的研究背景 | 第19-20页 |
| 1.1.2 肝癌的研究背景 | 第20-25页 |
| 1.1.2.1 肝癌的流行病学研究和危险因素 | 第20-21页 |
| 1.1.2.2 肝癌的分期 | 第21-23页 |
| 1.1.2.3 肝癌的治疗方法 | 第23-24页 |
| 1.1.2.4 肝癌研究中存在的问题 | 第24-25页 |
| 1.1.3 代谢组学介绍 | 第25-33页 |
| 1.1.3.1 代谢组学的概念及特点 | 第25-26页 |
| 1.1.3.2 代谢组学的研究对象 | 第26页 |
| 1.1.3.3 代谢组学的研究方法 | 第26-31页 |
| 1.1.3.4 代谢组学在肝脏疾病中的研究进展 | 第31-33页 |
| 1.2 本研究内容以及研究意义 | 第33-36页 |
| 1.2.1 本课题的研究内容 | 第33-34页 |
| 1.2.2 本课题的研究意义 | 第34-36页 |
| 第二部分 基于气质联用的组织代谢组学方法研究 | 第36-68页 |
| 第二章 肝组织代谢组学方法研究 | 第36-68页 |
| 2.1 引言 | 第36-38页 |
| 2.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 2.2.1 试剂 | 第38-39页 |
| 2.2.2 仪器 | 第39页 |
| 2.3 试验方法 | 第39-48页 |
| 2.3.1 高氯酸乙醇提取体系 | 第39-41页 |
| 2.3.1.1 提取方法 | 第39-40页 |
| 2.3.1.2 进样前衍生化反应 | 第40-41页 |
| 2.3.1.3 GC/MS 分析条件 | 第41页 |
| 2.3.2 氯仿/甲醇/水提取体系 | 第41-44页 |
| 2.3.2.1 提取方法 | 第42-44页 |
| 2.3.2.2 进样前衍生化反应 | 第44页 |
| 2.3.2.3 GC/MS 分析及条件设定 | 第44页 |
| 2.3.3 高氯酸乙醇提取体系方法学验证 | 第44-46页 |
| 2.3.3.1 标准品溶液 | 第44-45页 |
| 2.3.3.2 内标溶液的配置 | 第45页 |
| 2.3.3.3 标准曲线的建立 | 第45页 |
| 2.3.3.4 精密度试验 | 第45页 |
| 2.3.3.5 重复性试验 | 第45页 |
| 2.3.3.6 稳定性试验 | 第45-46页 |
| 2.3.3.7 加样回收试验 | 第46页 |
| 2.3.4 氯仿/甲醇/水提取体系方法学验证 | 第46-47页 |
| 2.3.4.1 标准品溶液 | 第46页 |
| 2.3.4.2 内标溶液的配置 | 第46-47页 |
| 2.3.4.3 标准曲线的建立 | 第47页 |
| 2.3.4.4 精密度实验 | 第47页 |
| 2.3.4.5 重复性试验 | 第47页 |
| 2.3.4.6 稳定性试验 | 第47页 |
| 2.3.5 数据处理方法 | 第47-48页 |
| 2.3.6 多维统计方法 | 第48页 |
| 2.4 结果 | 第48-64页 |
| 2.4.1 高氯酸乙醇提取效果 | 第48-49页 |
| 2.4.2 氯仿/甲醇/水提取效果 | 第49-56页 |
| 2.4.3 ECF 衍生化方法学验证的结果 | 第56-60页 |
| 2.4.3.1 线性与检测限结果 | 第56页 |
| 2.4.3.2 精密度、重复性及稳定性结果 | 第56-59页 |
| 2.4.3.3 回收率结果 | 第59-60页 |
| 2.4.4 TMS 衍生化方法学验证的结果 | 第60-64页 |
| 2.4.4.1 线性结果 | 第60-61页 |
| 2.4.4.2 标准品及肝组织样品的检测限与精密度 | 第61-62页 |
| 2.4.4.3 重复性及稳定性 | 第62-64页 |
| 2.5 讨论 | 第64-66页 |
| 2.5.1 提取方法 | 第64页 |
| 2.5.2 高氯酸乙醇提取 | 第64-65页 |
| 2.5.3 氯仿/甲醇/水提取 | 第65-66页 |
| 2.6 本章小结 | 第66-68页 |
| 2.6.1 高氯酸乙醇提取方法结论 | 第66页 |
| 2.6.2 氯仿/甲醇/水提取方法结论 | 第66-68页 |
| 第三部分 化学诱导急性肝损伤的代谢组学研究 | 第68-132页 |
| 第三章 四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤的尿液及肝组织代谢组学研究 | 第68-97页 |
| 3.1 引言 | 第68页 |
| 3.2 实验材料 | 第68-69页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第68页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第68-69页 |
| 3.2.3 仪器与配件 | 第69页 |
| 3.3 实验方法 | 第69-73页 |
| 3.3.1 CCl_4诱导急性肝损伤模型的建立、给药方法及样本收集 | 第69-70页 |
| 3.3.2 血浆活性生化指标检测 | 第70页 |
| 3.3.3 肝组织生化指标检测 | 第70-71页 |
| 3.3.4 病理组织学观察 | 第71页 |
| 3.3.5 代谢组学研究方法 | 第71页 |
| 3.3.5.1 尿液样品预处理方法 | 第71页 |
| 3.3.5.2 肝组织样本预处理方法 | 第71页 |
| 3.3.6 GC/MS 分析及条件设定 | 第71-72页 |
| 3.3.7 数据处理和模式识别 | 第72-73页 |
| 3.3.7.1 色谱数据的提取与前处理方法 | 第72页 |
| 3.3.7.2 模式识别 | 第72-73页 |
| 3.3.8 差异表达的代谢物的鉴别 | 第73页 |
| 3.4 结果 | 第73-89页 |
| 3.4.1 血浆生化指标检测结果 | 第73页 |
| 3.4.2 肝组织生化指标检测结果 | 第73-74页 |
| 3.4.3 病理组织学结果 | 第74-75页 |
| 3.4.4 模型组与正常组尿液代谢模式的比较 | 第75-79页 |
| 3.4.5 甘利欣干预组大鼠尿样代谢物变化的比较 | 第79-80页 |
| 3.4.6 差异代谢物在甘利欣干预组的变化分析 | 第80-81页 |
| 3.4.7 模型组和甘利欣干预组大鼠尿液代谢模式随时间变化的趋势分析 | 第81-84页 |
| 3.4.8 肝组织代谢模式的比较 | 第84-89页 |
| 3.5 讨论 | 第89-95页 |
| 3.5.1 CCl_4 所致肝损伤大鼠尿液中差异代谢物分析 | 第89-91页 |
| 3.5.2 CCl_4 所致肝损伤大鼠肝组织中差异代谢物分析 | 第91-95页 |
| 3.5.2.1 脂肪酸变化 | 第91-93页 |
| 3.5.2.2 氨基酸变化 | 第93-94页 |
| 3.5.2.3 甘利欣的作用机制推测 | 第94-95页 |
| 3.6 本章小结 | 第95-97页 |
| 第四章 酒精诱导肝损伤的代谢组学研究 | 第97-111页 |
| 4.1 引言 | 第97页 |
| 4.2 实验材料 | 第97-98页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第97页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第97-98页 |
| 4.2.3 仪器与配件 | 第98页 |
| 4.3 实验方法 | 第98-100页 |
| 4.3.1 酒精诱导肝损伤模型的建立及样本收集 | 第98-99页 |
| 4.3.2 血浆活性生化指标检测 | 第99页 |
| 4.3.3 肝组织生化指标检测 | 第99-100页 |
| 4.3.4 代谢组学研究方法 | 第100页 |
| 4.3.4.1 尿液样品预处理方法 | 第100页 |
| 4.3.4.2 肝组织样本预处理方法 | 第100页 |
| 4.3.5 GC/MS 分析及条件设定 | 第100页 |
| 4.3.6 数据处理和模式识别 | 第100页 |
| 4.3.6.1 色谱数据的提取与前处理方法 | 第100页 |
| 4.3.6.2 模式识别 | 第100页 |
| 4.3.7 差异表达的代谢物的鉴别 | 第100页 |
| 4.4 结果 | 第100-107页 |
| 4.4.1 血浆生化指标检测结果 | 第100-101页 |
| 4.4.2 肝组织生化指标检测结果 | 第101页 |
| 4.4.3 模型组与正常组代谢模式的比较 | 第101-107页 |
| 4.4.3.1 尿液代谢模式的比较 | 第101-104页 |
| 4.4.3.2 肝组织代谢模式的比较 | 第104-107页 |
| 4.5 讨论 | 第107-110页 |
| 4.5.1 酒精诱导急性肝损伤大鼠尿液及肝组织中差异代谢物分析 | 第108-110页 |
| 4.6 本章小结 | 第110-111页 |
| 第五章 基于气质联用的肝癌尿液及血清代谢组学研究 | 第111-132页 |
| 5.1 引言 | 第111-112页 |
| 5.2 实验材料 | 第112-114页 |
| 5.2.1 样本的采集 | 第112-113页 |
| 5.2.2 实验仪器及试剂 | 第113-114页 |
| 5.2.2.1 实验仪器 | 第113-114页 |
| 5.2.2.2 实验试剂 | 第114页 |
| 5.3 实验方法 | 第114-115页 |
| 5.3.1 尿液实验方法 | 第114-115页 |
| 5.3.1.1 进样前衍生化反应 | 第114页 |
| 5.3.1.2 GC/MS 分析及条件设定 | 第114页 |
| 5.3.1.3 数据处理和模式识别 | 第114-115页 |
| 5.3.2 血液实验方法 | 第115页 |
| 5.3.2.1 进样前衍生化反应 | 第115页 |
| 5.3.2.2 GC/MS 分析及条件设定 | 第115页 |
| 5.3.2.3 数据处理和模式识别 | 第115页 |
| 5.3.3 差异代谢物的分析 | 第115页 |
| 5.4 结果 | 第115-126页 |
| 5.4.1 尿液代谢组学研究 | 第115-122页 |
| 5.4.1.1 尿液GC/MS 分析结果 | 第115-117页 |
| 5.4.1.2 多维统计分析 | 第117-122页 |
| 5.4.2 血清代谢组学研究 | 第122-126页 |
| 5.4.2.1 血清 GC/TOF 分析结果 | 第122-123页 |
| 5.4.2.2 多维统计分析结果 | 第123-126页 |
| 5.5 讨论 | 第126-130页 |
| 5.5.1 肝癌的代谢组学研究 | 第126页 |
| 5.5.2 尿液代谢组学 | 第126-129页 |
| 5.5.3 血清代谢组学 | 第129-130页 |
| 5.6 本章小结 | 第130-132页 |
| 5.6.1 肝癌患者尿液的代谢组学研究 | 第130-131页 |
| 5.6.2 肝癌患者血样的代谢组学研究 | 第131-132页 |
| 第四部分 结论 | 第132-137页 |
| 第六章 研究总结与展望 | 第132-137页 |
| 6.1 研究工作总结 | 第132-134页 |
| 6.1.1 建立肝组织代谢组学研究方法 | 第132页 |
| 6.1.2 CCl_4 诱导急性肝损伤的代谢组学研究 | 第132-133页 |
| 6.1.3 酒精诱导急性肝损伤的代谢组学研究 | 第133页 |
| 6.1.4 临床肝癌病人样本的代谢组学研究 | 第133-134页 |
| 6.2 全文结论 | 第134页 |
| 6.3 论文创新点 | 第134-135页 |
| 6.4 思考及展望 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第144-146页 |
