| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第10-31页 |
| 1.1 脂肪酶的分子催化机理 | 第11-12页 |
| 1.2 脂肪酶的底物特异性 | 第12-14页 |
| 1.2.1 位置特异性 | 第13页 |
| 1.2.2 脂肪酸特异性 | 第13-14页 |
| 1.2.3 立体特异性 | 第14页 |
| 1.3 脂肪酶的催化特性 | 第14页 |
| 1.4 脂肪酶在非水相介质中的催化 | 第14-18页 |
| 1.4.1 非水相催化特性 | 第14-16页 |
| 1.4.2 脂肪酶在非水相介质中催化的应用 | 第16-18页 |
| 1.5 生物柴油概述 | 第18-21页 |
| 1.5.1 生物柴油的应用现状 | 第19页 |
| 1.5.2 目前生物柴油的生产方法 | 第19-21页 |
| 1.6 应用脂肪酶法制备生物柴油 | 第21-24页 |
| 1.6.1 提高脂肪酸甲(乙)酯产率的方法 | 第22-23页 |
| 1.6.2 降低生产成本 | 第23-24页 |
| 1.7 本论文的研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-31页 |
| 第二章 脂肪酶高产菌种的选育及其粗酶性质研究 | 第31-55页 |
| 2.1 导言 | 第31-33页 |
| 2.2 材料和方法 | 第33-36页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第33页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第33页 |
| 2.2.3 土样采集 | 第33页 |
| 2.2.4 培养基 | 第33-34页 |
| 2.2.5 方法 | 第34-36页 |
| 2.3 结果 | 第36-47页 |
| 2.3.1 菌种筛选 | 第36-38页 |
| 2.3.2 产脂肪酶菌株G5的鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3.3 G5菌株的生长特性 | 第39页 |
| 2.3.4 G5菌株产酶条件的优化 | 第39-47页 |
| 2.4 G5脂肪酶的酶学性质 | 第47-50页 |
| 2.4.1 酶作用的最适温度 | 第47-48页 |
| 2.4.2 酶作用的最适pH | 第48页 |
| 2.4.3 酶的热稳定性 | 第48-49页 |
| 2.4.4 酶的pH稳定性 | 第49-50页 |
| 2.5 产脂肪酶菌株诱变育种 | 第50-52页 |
| 2.5.1 出发菌株选定 | 第50页 |
| 2.5.2 紫外照射时间的确定 | 第50页 |
| 2.5.3 EMS对G5菌株诱变处理时间的确定 | 第50-51页 |
| 2.5.4 诱变筛选 | 第51-52页 |
| 2.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 固定化地霉G5脂肪酶用于生物柴油生产的初步研究 | 第55-71页 |
| 3.1 引言 | 第55-57页 |
| 3.2 材料与方法 | 第57-59页 |
| 3.2.1 材料 | 第57页 |
| 3.2.2 方法 | 第57-59页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第59-67页 |
| 3.3.1 蛋白含量测定 | 第59页 |
| 3.3.2 G5脂肪酶对甲醇耐受性的检测 | 第59-60页 |
| 3.3.3 酶固定化条件的优化 | 第60-62页 |
| 3.3.4 固定化酶催化酯化反应生产生物柴油 | 第62页 |
| 3.3.5 固定化酶催化转酯化反应生产生物柴油 | 第62-66页 |
| 3.3.6 固定化酶的操作稳定性 | 第66-67页 |
| 3.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 第四章 G5脂肪酶的分离纯化 | 第71-82页 |
| 4.1 引言 | 第71-72页 |
| 4.2 材料和方法 | 第72-74页 |
| 4.2.1 材料 | 第72页 |
| 4.2.2 仪器 | 第72页 |
| 4.2.3 粗酶液制备 | 第72页 |
| 4.2.4 硫酸铵分级沉淀 | 第72页 |
| 4.2.5 透析及超滤浓缩 | 第72-73页 |
| 4.2.6 DEAE-Sephadex A-50离子交换层析 | 第73页 |
| 4.2.7 Sephadex G-100分子筛 | 第73页 |
| 4.2.8 脂肪酶酶活力测定 | 第73页 |
| 4.2.9 蛋白含量测定 | 第73页 |
| 4.2.10 电泳分析 | 第73-74页 |
| 4.3 结果 | 第74-78页 |
| 4.3.1 G5菌株发酵粗酶液脂肪酶同工酶检测 | 第74页 |
| 4.3.2 硫酸铵分级沉淀： | 第74页 |
| 4.3.3 透析及超滤浓缩： | 第74页 |
| 4.3.4 DEAE-Sephadex A-50离子交换层析(梯度式洗脱) | 第74-76页 |
| 4.3.5 Sephadex G-100分子筛： | 第76页 |
| 4.3.6 SDS-PAGE检测酶纯度 | 第76-77页 |
| 4.3.7 G5脂肪酶的分子量 | 第77-78页 |
| 4.4 讨论 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 后续工作展望 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第84页 |
