| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 文献综述 | 第14-37页 |
| 第一章 禽流感病毒分子生物学研究进展 | 第14-23页 |
| ·禽流感病毒基因编码蛋白的结构和功能 | 第14-19页 |
| ·血凝素（Hemagglutinin，HA） | 第14-17页 |
| ·神经氨酸酶（Neuraminidase，NA） | 第17-18页 |
| ·核蛋白（Nucleoprotein，NP） | 第18页 |
| ·基质蛋白（Matix proteins，M） | 第18-19页 |
| ·聚合酶（Polymerase） | 第19页 |
| ·非结构蛋白（Nonstructural protein，NS） | 第19页 |
| ·禽流感致病性的分子生物学基础 | 第19-23页 |
| ·病毒与宿主细胞膜的融合 | 第20页 |
| ·病毒的复制和转录 | 第20-21页 |
| ·核的输出 | 第21页 |
| ·病毒在质膜上的组装 | 第21页 |
| ·病毒的出芽和释放 | 第21-23页 |
| 第二章 禽流感病毒诊断技术研究进展 | 第23-30页 |
| ·病原分离鉴定 | 第23-24页 |
| ·血清学试验 | 第24-26页 |
| ·琼脂免疫扩散试验 | 第24-25页 |
| ·血凝试验和血凝抑制试验 | 第25页 |
| ·免疫荧光技术 | 第25-26页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第26页 |
| ·分子生物学检测 | 第26-28页 |
| ·反转录聚合酶链式反应扩增技术（RT-PCR） | 第27页 |
| ·实时定量PCR 技术（Real time RT-PCR，RRT-PCR） | 第27页 |
| ·基因芯片分型技术 | 第27-28页 |
| ·依赖核酸序列的扩增技术（NASBA） | 第28页 |
| ·环介导的等温扩增技术（LAMP） | 第28页 |
| ·小结 | 第28-30页 |
| 第三章 免疫PCR 技术研究进展 | 第30-37页 |
| ·免疫PCR 体系 | 第31-34页 |
| ·免疫PCR 抗原-抗体反应系统 | 第31-32页 |
| ·免疫PCR 桥联系统 | 第32页 |
| ·免疫PCR 指示系统 | 第32-33页 |
| ·免疫PCR 检测系统 | 第33-34页 |
| ·免疫PCR 技术的拓展 | 第34页 |
| ·T7 RNA 聚合酶扩增免疫PCR 检测技术 | 第34页 |
| ·磁珠免疫PCR 技术 | 第34页 |
| ·免疫PCR 技术的应用 | 第34-36页 |
| ·肿瘤标记物检测 | 第34-35页 |
| ·可溶性细胞受体检测 | 第35页 |
| ·激素和细胞因子检测 | 第35页 |
| ·生化酶类的检测 | 第35页 |
| ·致病微生物检测 | 第35页 |
| ·寄生虫感染检测 | 第35-36页 |
| ·免疫 PCR 技术展望 | 第36-37页 |
| 试验研究 | 第37-83页 |
| 第四章 微量禽流感病毒 H5 蛋白免疫PCR 检测方法的建立 | 第37-50页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·报告DNA 分子的制备 | 第38页 |
| ·间接ELISA 检测禽流感病毒H5 血凝素蛋白 | 第38-39页 |
| ·间接Sandwich ELISA 检测禽流感病毒H5 血凝素蛋白 | 第39页 |
| ·间接免疫PCR 方法检测禽流感病毒H5 血凝素蛋白 | 第39-40页 |
| ·间接Sandwich 免疫PCR 方法检测禽流感病毒 H5 血凝素蛋白 | 第40-41页 |
| ·结果 | 第41-48页 |
| ·间接ELISA 和间接Sandwich ELISA 试验中链亲和素浓度的优化和确定 | 第41-43页 |
| ·免疫PCR 中最佳报告DNA 浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·免疫PCR 中最佳链亲和素浓度的确定 | 第44-45页 |
| ·间接ELISA 及Sandwich ELISA 检测禽流感病毒H5 血凝素蛋白的灵敏性试验 | 第45-47页 |
| ·间接免疫PCR 及间接Sandwich 免疫 PCR 方法检测 AIV H5 血凝素蛋白的灵敏性 | 第47-48页 |
| ·免疫PCR 与ELISA 方法检测病原的效果比较 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·报告DNA 的选择 | 第48页 |
| ·外界因素对免疫PCR 的影响 | 第48-49页 |
| ·免疫PCR 方法在微量禽流感病毒检测中的应用前景 | 第49-50页 |
| 第五章 以金磁微球为固相吸附载体建立免疫PCR 技术检测H5N1 禽流感病毒 | 第50-60页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·试剂 | 第50-51页 |
| ·病毒 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-54页 |
| ·报告DNA 的制备 | 第51页 |
| ·抗体包被金磁微粒 | 第51-52页 |
| ·抗体的生物素标记 | 第52-53页 |
| ·病毒的准备和稀释 | 第53页 |
| ·免疫PCR 检测H5 亚型禽流感病毒（AIV/H5N1） | 第53页 |
| ·免疫PCR 方法检测禽流感病毒的体系优化 | 第53-54页 |
| ·最适报告DNA 浓度的确定 | 第54页 |
| ·最适链亲和素浓度的选择 | 第54页 |
| ·免疫PCR 检测禽流感病毒的灵敏度 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-58页 |
| ·金磁微球抗体包被效率评价 | 第54-55页 |
| ·生物素标记抗体结果 | 第55页 |
| ·最适报告DNA 浓度的确定 | 第55-56页 |
| ·最适链亲和素浓度的选择 | 第56-57页 |
| ·免疫PCR 检测AIV 的灵敏度 | 第57页 |
| ·免疫PCR 检测AIV 的特异性试验 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 第六章 双重免疫PCR 检测H5N1 禽流感病毒和新城疫病毒 | 第60-73页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·分子生物学材料 | 第61页 |
| ·金磁微粒 | 第61页 |
| ·免疫学试剂 | 第61页 |
| ·病毒 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-65页 |
| ·病毒的准备和稀释 | 第62页 |
| ·报告DNA 的制备（生物素标记DNA） | 第62页 |
| ·捕获抗体包被金磁微球 | 第62-63页 |
| ·检测抗体的生物素标记 | 第63页 |
| ·免疫PCR 检测新城疫病毒和禽流感病毒 | 第63-64页 |
| ·报告DNA 和链亲和素最适工作浓度的优化和选择 | 第64页 |
| ·双重免疫PCR 方法检测AIV 和NDV | 第64页 |
| ·双重免疫PCR 检测H5 亚型AIV 和NDV 的特异性试验 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-69页 |
| ·金磁微球抗体包被效率评价 | 第65页 |
| ·抗体的生物素标记评价 | 第65页 |
| ·最适报告DNA 浓度的选择 | 第65-67页 |
| ·最适链亲和素浓度的选择 | 第67-68页 |
| ·免疫PCR 检测AIV 和NDV 的灵敏度 | 第68-69页 |
| ·复合免疫PCR检测AIV和NDV的特异性 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-73页 |
| 第七章 改良免疫PCR 技术检测低浓度H5N1 禽流感病毒 | 第73-83页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·主要试剂 | 第73-74页 |
| ·化学试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器 | 第74页 |
| ·方法 | 第74-78页 |
| ·免疫PCR 方法的建立 | 第74-78页 |
| ·结果 | 第78-80页 |
| ·Real time RT-PCR 检测 H5N1AIV 的灵敏度 | 第78页 |
| ·Sandwich ELISA 方法检测H5N1AIV 的灵敏度 | 第78-79页 |
| ·免疫PCR 方法检测H5N1AIV 的灵敏度 | 第79-80页 |
| ·讨论 | 第80-83页 |
| ·改良免疫PCR 方法的优点 | 第80页 |
| ·报告DNA 的选择 | 第80-81页 |
| ·外界因素对免疫PCR 的影响 | 第81页 |
| ·免疫PCR 方法在禽流感病毒微量检测中的应用前景 | 第81-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 主要缩略词和中英文对照表（Abbreviation Index） | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 作者简介 | 第93页 |
