| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 引言 | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-43页 |
| 1.1 小麦赤霉病研究进展 | 第16-23页 |
| 1.1.1 赤霉病概述 | 第16-17页 |
| 1.1.2 小麦赤霉病致病机理研究进展 | 第17-19页 |
| 1.1.3 小麦赤霉病的防治方法 | 第19-23页 |
| 1.2 磷酸酶概述 | 第23-35页 |
| 1.2.1 磷酸酶的分类 | 第23-31页 |
| 1.2.2 酿酒酵母中参与MAPKs途径负调控的磷酸酶 | 第31-35页 |
| 1.3 参与细胞周期调控的磷酸酶 | 第35-38页 |
| 1.4 丝状真菌中磷酸酶研究进展 | 第38-41页 |
| 1.4.1 丝状真菌中苏/丝氨酸磷酸酶研究进展 | 第38-40页 |
| 1.4.2 丝状真菌中酪氨酸磷酸酶研究进展 | 第40-41页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第41-43页 |
| 第二章 材料与方法 | 第43-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第43页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第43页 |
| 2.1.2 供试植物 | 第43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-66页 |
| 2.2.1 禾谷镰刀菌的保存和培养 | 第43-44页 |
| 2.2.2 禾谷镰刀菌基因组DNA小量提取 | 第44页 |
| 2.2.3 用CTAB法提取禾谷镰刀菌基因组DNA | 第44-45页 |
| 2.2.4 PCR技术 | 第45页 |
| 2.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| 2.2.6 PCR产物纯化 | 第46页 |
| 2.2.7 DNA克隆技术 | 第46-47页 |
| 2.2.8 重组质粒的鉴定与提取 | 第47页 |
| 2.2.9 质粒酶切 | 第47-48页 |
| 2.2.10 禾谷镰刀菌基因敲除载体的构建和转化子的验证 | 第48-49页 |
| 2.2.11 禾谷镰刀菌基因互补载体的构建及转化子的验证 | 第49-50页 |
| 2.2.12 FLAG和GFP标签融合蛋白载体构建 | 第50页 |
| 2.2.13 PEG介导的禾谷镰刀菌原生质体转化 | 第50-51页 |
| 2.2.14 禾谷镰刀菌基因沉默的方法 | 第51-52页 |
| 2.2.15 RNA提取与表达量分析 | 第52-56页 |
| 2.2.16 Western blot分析 | 第56-58页 |
| 2.2.17 亲和捕获实验 | 第58-60页 |
| 2.2.18 免疫共沉淀 | 第60-61页 |
| 2.2.19 酵母双杂实验 | 第61页 |
| 2.2.20 酵母回补载体的构建 | 第61-62页 |
| 2.2.21 生长速率测定 | 第62-63页 |
| 2.2.22 分生孢子产孢实验 | 第63页 |
| 2.2.23 药剂的敏感性测定 | 第63页 |
| 2.2.24 禾谷镰刀菌致病性分析 | 第63-64页 |
| 2.2.25 禾谷镰刀菌DON毒素的提取和测定 | 第64页 |
| 2.2.26 禾谷镰刀菌麦角甾醇的提取和测定 | 第64-65页 |
| 2.2.27 禾谷镰刀菌麦角留醇的提取和测定 | 第65-66页 |
| 第三章 结果与分析 | 第66-118页 |
| 3.1 禾谷镰刀菌磷酸酶的鉴定及相应基因缺失突变体的构建 | 第66-71页 |
| 3.1.1 鉴定禾谷镰刀菌中的磷酸酶 | 第66-67页 |
| 3.1.2 构建磷酸酶基因缺失突变体 | 第67-68页 |
| 3.1.3 小结与讨论 | 第68-71页 |
| 3.2 禾谷镰刀菌磷酸酶缺失突变体的表型分析 | 第71-81页 |
| 3.2.1 磷酸酶参与禾谷镰刀菌营养生长的调控 | 第71-75页 |
| 3.2.2 磷酸酶参与调控禾谷镰刀菌的无性繁殖 | 第75-77页 |
| 3.2.3 磷酸酶参与调控禾谷镰刀菌的致病性和DON合成 | 第77-80页 |
| 3.2.4 小结与讨论 | 第80-81页 |
| 3.3 磷酸酶参与禾谷镰刀菌中MAPKs信号途径的负调控 | 第81-99页 |
| 3.3.1 鉴定和分析禾谷镰刀菌中CWI MAPK信号途径 | 第81-93页 |
| 3.3.2 参与禾谷镰刀菌中MAPKs信号途径负调控的磷酸酶 | 第93-96页 |
| 3.3.3 小结与讨论 | 第96-99页 |
| 3.4 磷酸酶FgCdcl4的功能分析 | 第99-118页 |
| 3.4.1 FgCdc14对细胞周期的调控起着重要作用 | 第99-103页 |
| 3.4.2 FgCdc14参与禾谷镰刀菌核糖体合成的调控 | 第103-106页 |
| 3.4.3 HCX_5R序列对FgCdc14的功能十分重要 | 第106-107页 |
| 3.4.4 禾谷镰刀菌中FgCdc14的调控机制与酵母不同 | 第107-116页 |
| 3.4.5 小结与讨论 | 第116-118页 |
| 第四章 全文总结与后续工作展望 | 第118-123页 |
| 4.1 全文结论 | 第118-120页 |
| 4.2 后续工作展望 | 第120-123页 |
| 参考文献 | 第123-134页 |
| 附录 | 第134-164页 |
| 附表A：禾谷镰刀菌中磷酸酶缺失突变体表型总结 | 第134-138页 |
| 附录B：引物列表 | 第138-158页 |
| 附录C：培养基配方、常用试剂和试验仪器 | 第158-164页 |
| 攻读博士期间发表学术论文 | 第164页 |
