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山羊副流感病毒3型HN基因原核表达与单克隆抗体的制备

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
常用中英文缩写第11-13页
文献综述第13-21页
1 引言第21-22页
2 材料与方法第22-37页
    2.1 试验材料第22-25页
        2.1.1 毒株、菌株与质粒第22页
        2.1.2 细胞系与试验动物第22页
        2.1.3 酶类及相关试剂第22页
        2.1.4 细胞培养主要溶液第22-23页
        2.1.5 主要溶液配制第23-24页
        2.1.6 主要仪器与设备第24-25页
    2.2 试验方法第25-37页
        2.2.1 CPIV3 HN基因片段的克隆第25-27页
        2.2.2 CPIV3 HN基因原核表达质粒的构建第27-30页
        2.2.3 重组蛋白的诱导表达及鉴定第30-31页
        2.2.4 重组蛋白的大量表达第31页
        2.2.5 重组蛋白的纯化第31-32页
        2.2.6 纯化后蛋白浓度的测定第32页
        2.2.7 抗原性分析第32页
        2.2.8 间接免疫荧光(IFA)鉴定多克隆抗体的特异性第32页
        2.2.9 动物免疫第32页
        2.2.10 间接ELISA筛选方法的建立第32-33页
        2.2.11 SP2/0 骨髓瘤细胞的准备第33页
        2.2.12 饲养细胞的制备第33-34页
        2.2.13 脾细胞的制备第34页
        2.2.14 细胞融合第34页
        2.2.15 阳性杂交瘤细胞的筛选和克隆第34-35页
        2.2.16 阳性杂交瘤细胞的冻存第35页
        2.2.17 阳性杂交瘤细胞的复苏第35页
        2.2.18 单克隆抗体腹水的制备第35页
        2.2.19 单克隆抗体特性的鉴定第35-36页
        2.2.20 杂交瘤细胞分泌抗体稳定性试验第36-37页
3 结果第37-46页
    3.1 HN基因的RT-PCR扩增结果第37页
    3.2 重组质粒pET-32a-HN的构建与双酶切鉴定结果第37-38页
    3.3 HN基因的序列测定与分析第38-39页
    3.4 重组蛋白诱导表达的SDS-PAGE分析第39页
    3.5 重组蛋白的纯化及western blot分析第39-40页
    3.6 纯化蛋白的浓度测定结果第40页
    3.7 重组蛋白的抗原性分析第40-41页
    3.8 多克隆抗体的特异性分析第41页
    3.9 间接ELISA筛选方法的建立第41-42页
    3.10 杂交瘤细胞株的建立第42页
    3.11 单克隆抗体效价测定结果第42页
    3.12 单克隆抗体亚类鉴定结果第42-43页
    3.13 Western blot鉴定结果第43页
    3.14 三株单抗与CPIV3的Dot-ELISA鉴定结果第43-44页
    3.15 IFA鉴定结果第44页
    3.16 杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性试验结果第44-46页
4 讨论第46-49页
全文总结第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页
在读期间发表的学术论文第57页

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