英文缩略词表 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 CRFR1 EC1 区的克隆、表达与纯化 | 第16-25页 |
一、前言 | 第16页 |
二、材料与方法 | 第16-21页 |
·试剂 | 第16页 |
·设备 | 第16-17页 |
·溶液配制 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-21页 |
三、实验结果 | 第21-24页 |
·原核表达载体pGEX-4T2-EC188 的构建 | 第21-23页 |
·GST-EC188 蛋白的诱导表达及纯化 | 第23-24页 |
·GST-EC188 蛋白的免疫印迹鉴定 | 第24页 |
四、小结 | 第24-25页 |
第二部分 CRFR1 亲和肽的筛选 | 第25-38页 |
一、前言 | 第25页 |
二、材料与方法 | 第25-30页 |
·试剂 | 第25页 |
·设备 | 第25-27页 |
·溶液配制 | 第27页 |
·方法 | 第27-30页 |
三、实验结果 | 第30-37页 |
·噬菌体的富集 | 第30-31页 |
·ELISA 验证噬菌体克隆与靶蛋白的亲和力 | 第31页 |
·噬菌体克隆的 DNA 测序及同源性分析 | 第31-32页 |
·阳性克隆与靶蛋白的结合量效曲线 | 第32-37页 |
四、小结 | 第37-38页 |
第三部分 小肽的功能验证 | 第38-63页 |
一、前言 | 第38页 |
二、材料与方法 | 第38-53页 |
·试剂 | 第38-39页 |
·设备 | 第39页 |
·溶液配制 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-53页 |
三、实验结果 | 第53-62页 |
·稳定表达细胞株 HEK293-CRFR1 的构建与鉴定 | 第53-55页 |
·GST -小肽的融合表达与纯化 | 第55页 |
·GST -小肽对 CRF 刺激 CRFR1 释放cAMP 的影响 | 第55-57页 |
·合成小肽 P16 选择性抑制 CRF 刺激 CRFR1 释放cAMP | 第57-60页 |
·小肽 P16 对 CRFR2 没有作用 | 第60-61页 |
·小肽 P16 使 CRF 刺激 CRFR1 释放cAMP 的量效曲线平行右移 | 第61-62页 |
四、小结 | 第62-63页 |
讨论 | 第63-67页 |
总结 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-75页 |
综述 | 第75-101页 |
参考文献 | 第89-101页 |
个人简介 | 第101-102页 |
致谢 | 第102页 |