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高糖调节MC3T3-E1细胞雌激素受体功能研究

摘要第3-5页
abstract第5-6页
第1章 引言第10-13页
第2章 主要材料及试剂第13-17页
    2.1 实验材料第13-14页
        2.1.1 实验所用细胞第13页
        2.1.2 主要试剂第13-14页
    2.2 实验用仪器第14-15页
    2.3 主要试剂的配制第15-17页
第3章 实验方法第17-24页
    3.1 细胞培养与实验分组第17-19页
        3.1.1 小鼠的前成骨细胞(MC3T3-E1)复苏第17页
        3.1.2 细胞换液第17页
        3.1.3 细胞传代第17-18页
        3.1.4 细胞冻存第18页
        3.1.5 实验分组第18-19页
    3.2 Western blot法第19-20页
        3.2.1 提取MC3T3-E1细胞内总蛋白第19页
        3.2.2 测蛋白浓度(BCA法)第19页
        3.2.3 SDS-PAGE电泳第19页
        3.2.4 湿转法转膜第19-20页
        3.2.5 免疫反应第20页
        3.2.6 ECL化学发光第20页
    3.3.免疫荧光法第20-21页
        3.3.1 基本原理第20页
        3.3.2 操作步骤第20-21页
    3.4 双荧光素酶报告基因方法第21-22页
        3.4.1 基本原理第21页
        3.4.2 操作步骤第21-22页
    3.5 MTT法测定细胞的存活率第22页
        3.5.1 基本原理第22页
        3.5.2 操作步骤第22页
    3.6.茜素红染色观察MC3T3-E1细胞矿化结节第22-23页
        3.6.1 基本原理第22-23页
        3.6.2 操作步骤第23页
    3.7 数据处理及统计学方法第23-24页
第4章 实验结果第24-34页
    4.1 高糖升高了MC3T3-E1细胞中ERα和ERβ蛋白的表达第24-26页
        4.1.1 高糖诱导下MC3T3-E1细胞中ERα和ERβ蛋白表达的量效关系15第24-25页
        4.1.2 高糖诱导下MC3T3-E1细胞中ERα和ERβ蛋白表达的时效关系16第25-26页
    4.2 高糖能够抑制雌激素促进MC3T3-E1细胞ERα和ERβ表达与核内分布的效应第26-29页
        4.2.1 高糖下调雌激素引起的ERα和ERβ蛋白表达升高效应第26-28页
        4.2.2 高糖下调雌激素诱导的ERα和ERβ入核效应第28-29页
    4.3 高糖破坏雌激素对MC3T3-E1细胞的保护作用第29-30页
        4.3.1 高糖能够抑制雌激素引起的MC3T3-E1细胞活力升高效应第29页
        4.3.2 高糖能够抑制雌激素对MC3T3-E1细胞矿化结节的促进作用第29-30页
    4.4 高糖能够抑制雌激素对MC3T3-E1细胞ERα和ERβ转录活性的激活第30-31页
    4.5 LiCl逆转高糖诱导下的MC3T3-E1细胞ERα和ERβ蛋白表达的升高第31-32页
    4.6 LiCL能够抑制高糖对MC3T3-E1细胞ERα和ERβ转录活性的下调第32-34页
第5章 讨论第34-37页
第6章 实验结论第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-43页
综述第43-52页
    参考文献第50-52页

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