| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1.前言 | 第11-20页 |
| 1.1 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1.1 植物花香研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.2 花香检测方法研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.3 植物萜烯类花香挥发物生物合成途径 | 第14-17页 |
| 1.1.4 挥发类萜生物合成关键酶TPS家族的结构特点与功能分析 | 第17-18页 |
| 1.1.5 蜡梅花香研究进展 | 第18-19页 |
| 1.2 课题概述 | 第19-20页 |
| 1.2.1 研究的目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.2.2 技术路线 | 第20页 |
| 2.蜡梅花香测定 | 第20-34页 |
| 2.1 前言 | 第20-21页 |
| 2.2 实验材料，仪器，试剂 | 第21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.3.1 H29和SW001两种蜡梅株系4个花时期划分标准 | 第21-22页 |
| 2.3.2 内标溶液梯度筛选 | 第22页 |
| 2.3.3 HS-SPME取样 | 第22-23页 |
| 2.3.4 GC-MS分析 | 第23页 |
| 2.3.5 香气物质分析方法 | 第23页 |
| 2.3.6 主成分定量分析方法 | 第23页 |
| 2.4 结果与分析 | 第23-33页 |
| 2.4.1 H29和SW001不同花时期香气成分分析 | 第23-25页 |
| 2.4.2 H29和SW001蜡梅株系4个时期成分定量比较分析 | 第25-33页 |
| 2.5 讨论 | 第33-34页 |
| 3.蜡梅CpTPS5、CpTPS16基因表达量分析 | 第34-48页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料，软件，仪器与试剂 | 第34-36页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.2 实验软件 | 第35页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第35页 |
| 3.2.4 实验试剂 | 第35-36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-40页 |
| 3.3.1 蜡梅花瓣RNA的提取和检测 | 第36-37页 |
| 3.3.2 蜡梅花cDNA第一条链的合成和检测 | 第37-38页 |
| 3.3.3 CpTPS5、CpTPS16实时定量PCR | 第38-40页 |
| 3.4 结果与分析 | 第40-47页 |
| 3.4.1 蜡梅花朵RNA质量检测 | 第40-41页 |
| 3.4.2 蜡梅花朵cDNA质量检测 | 第41页 |
| 3.4.3 实时定量PCR实验结果与分析 | 第41-42页 |
| 3.4.4 CpTPS5、CpTPS16基因生物信息学分析 | 第42-47页 |
| 3.5 讨论 | 第47-48页 |
| 4.CpTPS5、CpTPS16基因植物超量表达载体的构建及烟草转化 | 第48-64页 |
| 4.1 前言 | 第48-49页 |
| 4.2 实验材料，仪器，试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第49页 |
| 4.2.3 实验试剂 | 第49-50页 |
| 4.3 实验方法 | 第50-57页 |
| 4.3.1 目的片段加特异性酶切位点 | 第50-51页 |
| 4.3.2 克隆目的片段琼脂糖凝胶回收 | 第51页 |
| 4.3.3 构建克隆载体 | 第51-52页 |
| 4.3.4 CpTPS5、CpTPS16重组质粒和pCAMBIA2300质粒的提取 | 第52页 |
| 4.3.5 CpTPS5、CpTPS16重组质粒的构建 | 第52-54页 |
| 4.3.6 CpTPS5、CpTPS16重组质粒转化EHA105农杆菌 | 第54-55页 |
| 4.3.7 CpTPS5、CpTPS16重组质粒转化农杆菌菌落检测 | 第55页 |
| 4.3.8 农杆菌介导法转化烟草 | 第55-56页 |
| 4.3.9 转基因早花烟草植株鉴定 | 第56页 |
| 4.3.10 CpTPS5、CpTPS16基因超量表达烟草花香挥发物测定 | 第56-57页 |
| 4.4 结果与分析 | 第57-62页 |
| 4.4.1 CpTPS5、CpTPS16超表载体构建 | 第57-58页 |
| 4.4.2 CpTPS5、CpTPS16重组质粒转化农杆菌 | 第58页 |
| 4.4.3 农杆菌EHA105转化早花烟草 | 第58-59页 |
| 4.4.4 转基因烟草阳性植株检测 | 第59-61页 |
| 4.4.5 烟草花香挥发物成分测定 | 第61-62页 |
| 4.5 讨论 | 第62-64页 |
| 5.展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
