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南方根结线虫效应蛋白Misp12功能分析和淡紫紫孢菌寄生适应性的比较基因组研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略语表第12-13页
第一章 文献综述第13-35页
    1 根结线虫研究进展第13-15页
        1.1 根结线虫的危害和症状第13-14页
        1.2 根结线虫的生物学特性第14页
        1.3 根结线虫基因组第14-15页
    2 效应蛋白研究第15-22页
        2.1 细菌效应蛋白第16页
        2.2 真菌效应蛋白第16页
        2.3 线虫效应蛋白第16-22页
            2.3.1 取食位点细胞第16-17页
            2.3.2 线虫分泌蛋白的研究方法第17-18页
            2.3.3 线虫分泌蛋白功能第18-22页
            2.3.4 线虫分泌蛋白研究总结第22页
    3 VIGS在基因功能研究中的应用第22-24页
        3.1 VIGS的原理第22-23页
        3.2 VIGS的研究及应用进展第23-24页
    4 线虫生防资源第24-28页
        4.1 食线虫细菌第24-25页
        4.2 食线虫真菌第25-28页
            4.2.1 食线虫真菌概述第25-26页
            4.2.2 食线虫真菌侵染线虫的分子机制第26-28页
    5 卵寄生真菌淡紫紫孢菌第28-30页
        5.1 淡紫紫孢菌分类地位及生物学特性第28-29页
        5.2 淡紫紫孢菌的生防机制第29页
        5.3 淡紫紫孢菌的生防制剂研究第29-30页
    6 基因组学研究进展第30-33页
        6.1 基因组测序技术发展第30-31页
        6.2 真菌基因组测序第31-32页
        6.3 真菌对比基因组学第32页
        6.4 真菌功能基因组学第32-33页
    7 转录组研究进展第33页
    8 研究的目的与意义第33-35页
第二章 南方根结线虫效应蛋白Misp12的功能分析第35-58页
    1 材料与方法第35-43页
        1.1 试验材料第35页
            1.1.1 南方根结线虫第35页
        1.2 试验方法第35-43页
            1.2.1 南方根结线虫基因组和蛋白组数据的生物信息学分析第35-36页
            1.2.2 候选基因Misp12 cDNA和基因组全长序列扩增第36页
            1.2.3 基因序列分析和蛋白结构分析第36页
            1.2.4 基因序列对比及系统进化第36页
            1.2.5 基因表达动态分析第36页
            1.2.6 IAA诱导Misp12表达试验第36-37页
            1.2.7 Misp12线虫体内原位杂交第37-38页
            1.2.8 洋葱表皮细胞定位第38-40页
            1.2.9 VIGS沉默第40-41页
            1.2.10 VIGS沉默后植物防御基因表达量分析第41页
            1.2.11 细胞程序性死亡抑制实验第41-42页
            1.2.12 巨型细胞石蜡切片制作与观察第42-43页
    2 结果与分析第43-54页
        2.1 生物信息学挖掘候选效应蛋白第43页
        2.2 Misp12基因序列扩增以及结构分析第43-45页
        2.3 Misp12基因对比及系统发育树分析第45-46页
        2.4 Misp12基因表达动态第46-47页
        2.5 Misp12基因线虫体内表达定位第47页
        2.6 Misp12蛋白植物中亚细胞定位第47-48页
        2.7 VIGS沉默效果检测第48-49页
        2.8 VIGS沉默后根结和线虫数量变化第49-51页
        2.9 VIGS沉默后植物防御基因表达量第51页
        2.10 Misp12能抑制细胞程序性死亡第51-52页
        2.11 VIGS沉默后巨型细胞变化第52-53页
        2.12 IAA诱导Misp12基因表达第53-54页
    3 讨论第54-58页
第三章 淡紫紫孢菌36-1菌株寄生适应性的比较基因组研究第58-94页
    1 材料与方法第58-63页
        1.1 试验材料第58页
        1.2 试验方法第58-63页
            1.2.1 基因组测序与组装第58-59页
            1.2.2 基因预测与注释第59页
            1.2.3 共线性分析第59页
            1.2.4 同源序列与系统发育分析第59-60页
            1.2.5 蛋白质家族分类与进化分析第60页
            1.2.6 次生代谢产物相关基因分析第60-61页
            1.2.7 转录组分析第61-62页
            1.2.8 单一碳源生长比较第62页
            1.2.9 qRT-PCR验证第62-63页
    2 结果与分析第63-90页
        2.1 基因组组装质量的评估第63页
        2.2 基因组特征概述第63-65页
        2.3 共线性分析第65-67页
        2.4 基因组进化分析第67-68页
        2.5 系统发育分析第68-71页
        2.6 细胞壁降解相关基因的鉴定与比较第71-72页
        2.7 丝氨酸和金属蛋白酶分析及其在寄生过程中的作用第72-75页
        2.8 几丁质代谢相关基因分析第75-77页
        2.9 膜转运蛋白鉴定与分析第77-79页
        2.10 信号转导基因在侵染中的作用第79-82页
        2.11 效应蛋白(effector)的鉴定第82-84页
        2.12 次生代谢产物合成基因的鉴定第84-86页
        2.13 附着胞形成相关基因的表达第86-88页
        2.14 侵染过程中明显的代谢转换过程第88-90页
    3 讨论第90-94页
第四章 研究总结与展望第94-96页
参考文献第96-121页
博士期间发表成果第121-122页
致谢第122-123页
附录第123-128页
附表第128-151页
附图第151-155页

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