| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-30页 |
| 1 课题的提出 | 第14页 |
| 2 国内外研究进展 | 第14-29页 |
| 2.1 钾的生理功能 | 第14-16页 |
| 2.2 钾吸收的生理机制 | 第16-20页 |
| 2.2.1 植物体内钾离子吸收 | 第16-17页 |
| 2.2.2 植物钾吸收的基因型差异 | 第17-18页 |
| 2.2.3 植物根系在低钾胁迫下的生长发育 | 第18-20页 |
| 2.3 钾吸收的分子机制 | 第20-26页 |
| 2.3.1 钾离子通道 | 第20-22页 |
| 2.3.2 钾离子转运体 | 第22-25页 |
| 2.3.3 钾离子吸收的分子调控 | 第25-26页 |
| 2.4 micro RNA作为长距离信号调节矿质营养的平衡 | 第26-28页 |
| 2.4.1 micro RNA作为长距离信号普遍存在及其移动机理 | 第26-27页 |
| 2.4.2 mi R399调节磷营养的平衡 | 第27页 |
| 2.4.3 mi R395调节硫营养的平衡 | 第27-28页 |
| 2.5 接穗对砧木根系钾吸收存在反馈调控 | 第28-29页 |
| 2.5.1 生长素可能参与了接穗对砧木根系钾吸收存在反馈调控 | 第28页 |
| 2.5.2 micro RNA可能参与了接穗对砧木根系钾吸收的反馈调控 | 第28-29页 |
| 3 本研究的目的、意义和内容 | 第29-30页 |
| 3.1 研究目的及意义 | 第29页 |
| 3.2 研究内容 | 第29-30页 |
| 第二章 不同钾水平下接穗对砧木根系生长和生理的影响 | 第30-47页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.2.1 材料培育 | 第30-31页 |
| 2.2.2 低钾及不同钾钠处理 | 第31-32页 |
| 2.3 实验设计 | 第32-33页 |
| 2.3.1 不同钾水平下接穗对砧木根系及嫁接幼苗生长的影响 | 第32页 |
| 2.3.2 不同钾水平下接穗对砧木根系钾吸收能力的影响 | 第32-33页 |
| 2.3.3 不同钾水平下接穗对嫁接幼苗内源激素的影响 | 第33页 |
| 2.3.4 不同钾钠处理对西瓜生长和生理的影响 | 第33页 |
| 2.4 测定方法 | 第33-36页 |
| 2.4.1 西瓜幼苗生长和生理参数的测定 | 第33-34页 |
| 2.4.2 离子含量及钾离子流速的测定 | 第34页 |
| 2.4.3 钾吸收重要基因Cla012760相对表达量分析 | 第34-35页 |
| 2.4.4 内源激素含量的测定 | 第35-36页 |
| 2.4.5 叶绿素含量、光合速率和气孔导度的测定 | 第36页 |
| 2.5 数据分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-47页 |
| 3.1 不同钾水平下接穗对砧木根系及嫁接幼苗生长的影响 | 第36-38页 |
| 3.2 不同钾水平下接穗对砧木根系钾吸收能力的影响 | 第38-41页 |
| 3.2.1 矿质离子含量 | 第38-40页 |
| 3.2.2 钾流速 | 第40-41页 |
| 3.2.3 Cla012760基因的相对表达量 | 第41页 |
| 3.3 不同钾水平下接穗对嫁接幼苗内源激素的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.1 ABA含量 | 第41-42页 |
| 3.3.2 IAA含量 | 第42-43页 |
| 3.4 不同钾钠处理对西瓜生长和生理的影响 | 第43-47页 |
| 3.4.1 植株干物质积累 | 第43-44页 |
| 3.4.2 叶绿素含量、光合速率和气孔导度 | 第44-45页 |
| 3.4.3 K~+、Na~+浓度 | 第45-47页 |
| 第三章 西瓜响应低钾的micro RNA及可能长距离移动的micro RNA筛选 | 第47-77页 |
| 1 引言 | 第47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-52页 |
| 2.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 2.2 试验方法 | 第48-52页 |
| 2.2.1 总RNA提取及文库构建和测序 | 第48-49页 |
| 2.2.2 small RNA测序结构分析 | 第49-51页 |
| 2.2.3 西瓜钾吸收可能的长距离mi RNA信号研究 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-77页 |
| 3.1 small RNA测序数据统计 | 第52-56页 |
| 3.1.1 small RNA文库分析 | 第52-53页 |
| 3.1.2 小RNA文库数据分析 | 第53-56页 |
| 3.2 ZJ和YS已知mi RNA的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.3 文库中比对上的mi RNA与预测的mi RNA统计情况 | 第57-58页 |
| 3.4 西瓜响应低钾和可能长距离移动的micro RNA筛选 | 第58-60页 |
| 3.4.1 响应低钾的micro RNA筛选 | 第58-59页 |
| 3.4.2 可能长距离运输的micro RNA筛选 | 第59-60页 |
| 3.5 西瓜差异miRNA的靶基因预测 | 第60-66页 |
| 3.6 西瓜响应低钾和可能长距离运输的micro RNA及靶基因分析 | 第66-77页 |
| 3.6.1 西瓜自根苗响应低钾和可能长距离运输的micro RNA及靶基因分析 | 第66-72页 |
| 3.6.2 西瓜嫁接苗响应低钾和可能长距离运输的micro RNA及靶基因分析 | 第72-77页 |
| 第四章 西瓜钾吸收重要基因HAK5的克隆及功能验证 | 第77-92页 |
| 1 前言 | 第77页 |
| 2 材料与方法 | 第77-84页 |
| 2.1 HAK5基因克隆 | 第77-83页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第77-78页 |
| 2.1.2 菌种和质粒 | 第78页 |
| 2.1.3 培养基及培养条件 | 第78-79页 |
| 2.1.4 目的基因克隆及序列分析 | 第79-80页 |
| 2.1.5 p Hellsgate8-Cl HAK5表达载体构建 | 第80-81页 |
| 2.1.6 重组质粒导入农杆菌感受态细胞、菌液检测及保存 | 第81-82页 |
| 2.1.7 花序浸染法转化拟南芥 | 第82页 |
| 2.1.8 转基因阳性苗筛选、移栽及T3代种子获得 | 第82-83页 |
| 2.2 HAK5基因功能验证及拟南芥的盐胁迫处理 | 第83-84页 |
| 2.2.1 功能验证 | 第83-84页 |
| 2.2.2 拟南芥的盐胁迫处理 | 第84页 |
| 3 结果与分析 | 第84-92页 |
| 3.1 HAK5基因克隆 | 第84-87页 |
| 3.1.1 RNA提取、c DNA合成及目的基因全长的扩增 | 第84-85页 |
| 3.1.2 目的基因与p EASY-Blunt中间载体连接及测序分析 | 第85页 |
| 3.1.3 目的基因的酶切及p Hellsgate8-Cl HAK5重组质粒检测 | 第85-86页 |
| 3.1.4 冻融法转化农杆菌、花序浸染法转化拟南芥 | 第86页 |
| 3.1.5 转基因T3代拟南芥的获得 | 第86-87页 |
| 3.2 HAK5基因功能验证及拟南芥的盐胁迫处理 | 第87-92页 |
| 3.2.1 HAK5基因的功能验证 | 第87-90页 |
| 3.2.2 拟南芥的盐胁迫处理 | 第90-92页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第92-99页 |
| 1 讨论 | 第92-98页 |
| 1.1 不同钾水平下接穗对砧木根系生长和生理的影响 | 第92-95页 |
| 1.1.1 不同钾水平下接穗对砧木根系及嫁接幼苗生长的影响 | 第92-93页 |
| 1.1.2 不同钾水平下接穗对砧木根系钾吸收能力的影响 | 第93页 |
| 1.1.3 不同钾水平下接穗对嫁接幼苗内源激素的影响 | 第93-94页 |
| 1.1.4 不同钾钠处理对西瓜生长和生理的影响 | 第94-95页 |
| 1.2 西瓜响应低钾的micro RNA及长距离移动的micro RNA筛选 | 第95-96页 |
| 1.3 西瓜钾吸收重要基因HAK5的克隆及功能验证 | 第96-97页 |
| 1.4 西瓜钾高效吸收模型及低钾长距离运输模型建立 | 第97-98页 |
| 1.4.1 勇士钾高效吸收模型 | 第97页 |
| 1.4.2 低钾长距离运输模型 | 第97-98页 |
| 2 展望 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 附录Ⅰ 低钾处理前西瓜幼苗的长势 | 第112页 |
| 附录Ⅱ 低钾处理10天西瓜幼苗的长势 | 第112-113页 |
| 附录Ⅲ pEASY-Blunt Cloning vector质粒图 | 第113页 |
| 附录Ⅳ pHellsgate8 Cloning vector质粒图 | 第113-114页 |
| 附录Ⅴ 测序菌液之间的测序比对结果 | 第114-116页 |
| 附录Ⅵ pHellsgate8-Cl HAK5测序序列与葫芦科基因组数据库西瓜"97103"序列比对结果 | 第116-119页 |
| 附录Ⅶ 作者简介 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
