摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩写词表 | 第7-13页 |
第1章 综述 | 第13-26页 |
1.1 植物抗冷性研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 植物ICE1-CBF冷信号途径 | 第13-14页 |
1.1.2 乙烯调控植物抗冷反应 | 第14-16页 |
1.2 果实成熟机制研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 乙烯调控果实成熟的机制 | 第16-18页 |
1.2.2 转录因子调控果实成熟 | 第18-19页 |
1.3 NAC类转录因子功能研究进展 | 第19-22页 |
1.3.1 NAC类转录因子参与植物抗冷反应 | 第20-21页 |
1.3.2 NAC类转录因子参与果实成熟 | 第21-22页 |
1.4 香蕉采后耐冷机制研究进展 | 第22页 |
1.5 香蕉果实成熟机制研究进展 | 第22-24页 |
1.6 本论文研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第2章 MaNAC1调控香蕉果实诱导耐冷性的机制分析 | 第26-43页 |
2.1 引言 | 第26-27页 |
2.2 材料与方法 | 第27-32页 |
2.2.1 供试材料 | 第27页 |
2.2.2 果实处理及取样方法 | 第27页 |
2.2.3 热硼法提取香蕉果实总RNA | 第27-28页 |
2.2.4 Real-time定量PCR(RT-qPCR) | 第28页 |
2.2.5 启动子活性检测 | 第28-29页 |
2.2.6 酵母单杂交 | 第29页 |
2.2.7 瞬时表达分析 | 第29-30页 |
2.2.8 凝胶阻滞分析(EMSA) | 第30-32页 |
2.3 结果与分析 | 第32-39页 |
2.3.1 MaNAC1受低温诱导并且参与丙烯诱导的香蕉果实耐冷性 | 第32-33页 |
2.3.2 MaNAC1启动子活性受低温和乙烯诱导 | 第33-36页 |
2.3.3 MaICE1结合MaNAC1基因启动子并激活MaNAC1的表达 | 第36-37页 |
2.3.4 磷酸化和低温影响MaICE1结合MaNAC1启动子的能力 | 第37-39页 |
2.4 讨论 | 第39-42页 |
2.4.1 MaNAC1与丙烯诱导的香蕉果实耐冷性有关 | 第39-40页 |
2.4.2 MaNAC1通过与ICE1-CBF冷信号途径的互作参与香蕉耐冷反应 | 第40-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-43页 |
第3章 MaNAC1/2 调控香蕉果实成熟的机制分析 | 第43-83页 |
3.1 引言 | 第43-44页 |
3.2 材料与方法 | 第44-50页 |
3.2.1 果实处理及取样方法 | 第44页 |
3.2.2. 基因分离及表达分析 | 第44-45页 |
3.2.3 亚细胞定位 | 第45页 |
3.2.4 Western blotting | 第45-46页 |
3.2.5 EMSA | 第46页 |
3.2.6 双荧光素酶瞬时表达分析 | 第46-47页 |
3.2.7 染色质免疫共沉淀(ChIP)-qPCR分析 | 第47-48页 |
3.2.8 酵母双杂交 | 第48页 |
3.2.9 双分子荧光互补(BiFC)实验 | 第48页 |
3.2.10 免疫共沉淀(Co-IP) | 第48-49页 |
3.2.11 体外泛素化检测 | 第49-50页 |
3.2.12 蛋白体内降解实验 | 第50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-77页 |
3.3.1 MaNAC1和MaNAC2具有转录抑制能力 | 第50-52页 |
3.3.2 MaRTH1是MaNAC1和MaNAC2的直接靶基因 | 第52-58页 |
3.3.3 MaERF11是MaNAC1和MaNAC2的直接靶基因 | 第58-61页 |
3.3.4 E3泛素连接酶MaXB3与MaNAC2互作 | 第61-66页 |
3.3.5 MaXB3减弱MaNAC2对MaRTH1和MaERF11的转录抑制能力 | 第66-67页 |
3.3.6 MaNAC2被MaXB3泛素化后通过泛素-蛋白酶体途径降解 | 第67-69页 |
3.3.7 MaXB3与MaACS1和MaACO1互作并介导MaACS1和MaACO1的泛素化降解 | 第69-74页 |
3.3.8 MaNAC1和MaNAC2直接结合MaXB3的启动子并抑制MaXB3的表达 | 第74-77页 |
3.4 讨论 | 第77-82页 |
3.4.1 MaNAC1和MaNAC2通过抑制MaRTH1参与香蕉果实成熟 | 第77-78页 |
3.4.2 MaNAC1和MaNAC2通过抑制MaERF11调控乙烯合成 | 第78-79页 |
3.4.3 MaXB3通过泛素化降解MaACS1、MaACO1和MaNAC2负调控乙烯合成和果实成熟 | 第79-80页 |
3.4.4 MaNAC1和MaNAC2抑制MaXB3进而正调乙烯合成 | 第80-81页 |
3.4.5 MaNAC1和MaNAC2参与果实成熟的可能作用机制 | 第81-82页 |
3.5 本章小结 | 第82-83页 |
第4章 MaNAC10-12调控香蕉果实成熟的机制分析 | 第83-121页 |
4.1 引言 | 第83-84页 |
4.2 材料与方法 | 第84页 |
4.2.1 果实处理及取样方法 | 第84页 |
4.2.2 烟草叶片瞬时表达分析 | 第84页 |
4.2.3 其他实验方法 | 第84页 |
4.3 结果与分析 | 第84-113页 |
4.3.1 MaNAC7-17在香蕉果实采后成熟过程中的表达分析 | 第84-86页 |
4.3.2 MaNAC7-17的转录活性分析 | 第86-88页 |
4.3.3 MaNAC10-14的亚细胞定位 | 第88-90页 |
4.3.4 乙烯调控MaNAC10-14的启动子活性 | 第90页 |
4.3.5 MaNAC10-14与MaACS1和MaACO1启动子的互作分析 | 第90-95页 |
4.3.6 MaNAC10和MaNAC11协同调控MaACS1和MaACO1 | 第95-98页 |
4.3.7 MaXB3与MaNAC10/11互作并介导MaNAC10/11的泛素化降解 | 第98-103页 |
4.3.8 MaXB3减弱MaNAC10/11对MaACS1/MaACO1的转录激活能力 | 第103-105页 |
4.3.9 MaSPL1和MaMADS1分别调控MaNAC10/11和MaNAC12的表达 | 第105-113页 |
4.4 讨论 | 第113-119页 |
4.4.1 MaNAC10/11/12通过调控MaACS1和MaACO1参与果实成熟 | 第113-116页 |
4.4.2 MaXB3通过泛素化降解MaNAC10/11来抑制乙烯合成 | 第116-117页 |
4.4.3 MaSPL1、MaMADS1和MaNAC10/11/12之间的互相联系 | 第117-119页 |
4.5 本章小结 | 第119-121页 |
第5章 全文总结 | 第121-122页 |
致谢 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-137页 |
附录 | 第137-143页 |
附录A | 第137-139页 |
附录B | 第139-141页 |
附录C | 第141-143页 |