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鱼类蛋白质感染因子(PrP~C)的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 文献综述第12-36页
 1 蛋白质感染因子的研究第12-33页
   ·蛋白质感染因子(Prions)的定义第13-14页
   ·蛋白质感染因子(Prions)的研究背景第14-30页
     ·蛋白质感染因子(Prions)的结构研究第15-19页
     ·正常蛋白质感染因子蛋白(PrP~C)的功能研究第19-21页
     ·蛋白感染因子的致病机理第21-28页
     ·蛋白质感染因子性疾病的预防、诊断与治疗第28-30页
   ·蛋白质感染因子样的研究第30-31页
     ·Prion-like protein, Shadoo prion第30页
     ·Doppel第30-31页
   ·鱼类蛋白感染因子的研究进展第31-33页
 2 孔雀鱼的综述第33-35页
   ·孔雀鱼的历史第33-34页
   ·孔雀鱼的生活习性第34页
   ·孔雀鱼的科研价值第34页
   ·孔雀鱼基因组的构建第34-35页
 3 鳙鱼、草鱼的综述第35-36页
第二章 孔雀鱼PRP 基因的克隆与序列分析第36-59页
 1 实验材料第37-38页
   ·样本来源第37页
   ·主要试剂第37页
   ·主要软件第37-38页
 2 实验方法第38-51页
   ·孔雀鱼PrP~C 基因全序列的克隆第38-47页
     ·总RNA 的提取及检测第38-39页
     ·cDNA 的合成及cDNA PCR 文库的构建第39-42页
     ·孔雀鱼PrP~C 编码基因片段的扩增、回收第42-46页
     ·PrP cDNA 的3’RACE 与5’RACE第46页
     ·序列的拼接第46-47页
     ·数据分析第47页
   ·孔雀鱼PrP~C 基因对应的基因组序列的克隆第47-51页
     ·DNA 提取第47-48页
     ·基因组位移(Genome Walking)文库的构建第48-49页
     ·孔雀鱼PrP~C 基因对应的基因组序列的扩增第49-51页
 3 结果第51-57页
   ·总RNA/DNA 提取结果第51-52页
   ·孔雀鱼PrP 基因的全序列第52-56页
   ·孔雀鱼PrP~C 的结构分析第56-57页
     ·孔雀鱼PrP~C 的Ⅰ级结构分析第56页
     ·孔雀鱼PrP~C 的Ⅱ级结构分析第56-57页
 4 讨论第57-59页
第三章 鳙鱼、草鱼的PRP 基因的克隆与序列分析第59-76页
 1 实验材料第59-60页
   ·样本来源第59页
   ·主要试剂第59-60页
   ·主要软件第60页
 2 实验方法第60-69页
   ·总RNA 的提取及检测第60-61页
   ·总RNA 的检测第61页
   ·cDNA 的合成及cDNA PCR 文库的构建第61-64页
     ·cDNA 第一条链的合成第61-62页
     ·cDNA 第二条链的合成及双链cDNA 末端平滑化第62页
     ·双链cDNA 的纯化第62-63页
     ·连接接头(Cassette adaptor)的连接第63页
     ·cDNA PCR 扩增文库构建第63-64页
   ·鳙鱼、草鱼PrP~C 编码基因片段的扩增、回收第64-68页
     ·引物设计第64页
     ·鳙鱼、草鱼PrP~C 编码基因中间片段扩增第64-65页
     ·纯化PCR 扩增产物回收第65-66页
     ·PCR 产物的连接转化第66-67页
     ·重组子的检测与测序第67-68页
   ·PrP cDNA 的3’端序列和5’端序列的扩增第68-69页
   ·序列的拼接第69页
   ·数据分析第69页
 3 实验结果第69-74页
   ·RNA 提取结果第69-70页
   ·鳙鱼PrP 基因的全序列及其推定蛋白的结构分析第70-72页
   ·草鱼PrP 基因的全序列及其推定蛋白的结构分析第72-74页
 4 讨论第74-76页
第四章 PrP~C基因的表达分析第76-85页
 1 材料与方法第77-81页
   ·材料第77页
   ·样品处理第77页
   ·总RNA 的提取第77-78页
   ·逆转录反应第78-79页
   ·引物设计第79页
   ·PrP~C 基因的表达情况分析第79-80页
   ·图像处理第80-81页
 2 结果第81-83页
   ·总RNA 的提取第81页
   ·组织表达特异性第81-82页
   ·不同浓度盐水中,PrP~C 基因的表达特异性第82-83页
 3 讨论第83-85页
第五章 鱼类PRP 的系统学分析第85-100页
 1 鱼类 PRP,PRION-LIKE PROTEIN 等的研究第85-87页
   ·鱼类PrP-1 的分子特征第86页
   ·鱼类PrP-2 的分子特征第86页
   ·鱼类PrP-like,shadoo 蛋白的分子特征第86-87页
 2 PRP 基因的结构变化与功能第87-91页
   ·鱼类、两栖类、爬行类、鸟类及哺乳类PrP 蛋白的结构比较第87-89页
   ·鱼类、两栖类、爬行类、鸟类及哺乳类PrP 蛋白重复序列的比较第89-91页
 3 鱼类 PrP~C 的系统学分析第91-94页
 4 哺乳类、鸟类及鱼类的PrP~C 同源性分析第94-97页
 5 讨论第97-100页
结论第100-102页
参考文献第102-112页
致谢第112-113页
个人简历与在读期间发表的文章第113页

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