| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-41页 |
| 1.1 犬瘟热病毒概述 | 第13-21页 |
| 1.1.1 犬瘟热病毒的基因组结构及基本特性 | 第13-16页 |
| 1.1.2 犬瘟热病毒流行病学 | 第16-19页 |
| 1.1.3 犬瘟热病毒疫苗研究 | 第19-21页 |
| 1.2 犬细小病毒概述 | 第21-28页 |
| 1.2.1 犬细小病毒的基因组结构及基本特性 | 第21-24页 |
| 1.2.2 犬细小病毒的流行病学 | 第24-26页 |
| 1.2.3 犬细小病毒疫苗研究 | 第26-28页 |
| 1.3 狂犬病毒概述 | 第28-36页 |
| 1.3.1 狂犬病毒的基因组结构及基本特性 | 第28-32页 |
| 1.3.2 狂犬病毒流行病学 | 第32-33页 |
| 1.3.3 狂犬病毒疫苗研究 | 第33-36页 |
| 1.4 重组表位疫苗研究进展 | 第36-40页 |
| 1.4.1 细胞抗原表位的研究 | 第36-37页 |
| 1.4.2 多表位疫苗的设计 | 第37-38页 |
| 1.4.3 多表位疫苗的应用 | 第38-39页 |
| 1.4.4 表位疫苗相关佐剂研究 | 第39-40页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第40-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-59页 |
| 2.1 实验材料 | 第42-46页 |
| 2.1.1 细胞和病毒 | 第42页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第42页 |
| 2.1.3 质粒和菌株 | 第42页 |
| 2.1.4 实验试剂及试剂盒 | 第42-43页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第43-46页 |
| 2.2 实验仪器 | 第46-47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-59页 |
| 2.3.1 感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第47-48页 |
| 2.3.2 克隆转化及质粒提取 | 第48-50页 |
| 2.3.3 常用PCR体系及条件 | 第50页 |
| 2.3.4 蛋白原核表达及纯化 | 第50-52页 |
| 2.3.5 SDS-PAGE电泳及Western blotting | 第52-53页 |
| 2.3.6 免疫小鼠 | 第53页 |
| 2.3.7 血清样品的制备 | 第53-54页 |
| 2.3.8 酶联免疫吸附反应(ELISA) | 第54页 |
| 2.3.9 细胞培养 | 第54-55页 |
| 2.3.10 病毒繁殖 | 第55-56页 |
| 2.3.11 血凝实验及血凝抑制试验 | 第56页 |
| 2.3.12 中和试验 | 第56-57页 |
| 2.3.13 快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT) | 第57-58页 |
| 2.3.14 数据统计分析 | 第58-59页 |
| 第三章 结果与分析 | 第59-90页 |
| 3.1 表位的筛选与合成 | 第59-70页 |
| 3.1.1 CDV、CPV及RV表位的筛选 | 第59-60页 |
| 3.1.2 CDV、CPV及RV表位的重组 | 第60-61页 |
| 3.1.3 重组表位蛋白的亲水性、抗原性、表面可及性、可折叠性分析 | 第61-64页 |
| 3.1.4 重组表位蛋白的二级结构预测 | 第64-67页 |
| 3.1.5 重组表位蛋白的三级结构预测 | 第67-68页 |
| 3.1.6 重组表位序列的基因合成 | 第68-70页 |
| 3.2 重组蛋白表达及纯化 | 第70-74页 |
| 3.2.1 重组蛋白原核表达载体的构建 | 第70-71页 |
| 3.2.2 重组蛋白诱导表达 | 第71-72页 |
| 3.2.3 重组蛋白的纯化及复性 | 第72-74页 |
| 3.3 重组蛋白抗原性和免疫原性检测 | 第74-80页 |
| 3.3.1 重组蛋白抗原性的检测 | 第74-78页 |
| 3.3.2 Western blotting检测重组蛋白与抗病毒血清的特异性反应 | 第78页 |
| 3.3.3 ELISA检测重组蛋白产生的抗体与三种病毒的特异性反应 | 第78-80页 |
| 3.4 鼠源抗血清抗体特异性检测 | 第80-85页 |
| 3.4.1 鼠源抗血清中CDV中和抗体检测 | 第80-82页 |
| 3.4.2 鼠源抗血清中CPV血凝抑制(HI)效价检测 | 第82-84页 |
| 3.4.3 鼠源抗血清中RV中和抗体检测 | 第84-85页 |
| 3.5 PEI的佐剂效果研究 | 第85-90页 |
| 3.5.1 PEI增强多表位重组蛋白免疫反应的研究 | 第86-87页 |
| 3.5.2 PEI对体抗体分型的影响 | 第87-90页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第90-94页 |
| 第五章 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-118页 |
| 附录1 各载体图谱 | 第114-116页 |
| 附录2 各表位在蛋白上的序列 | 第116-118页 |
| 个人简历 | 第118页 |
