摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第13-19页 |
参考文献 | 第16-19页 |
第一部分 ING4或/和P53单双基因重组腺病毒的构建 | 第19-38页 |
1 材料与方法 | 第20-31页 |
1.1 材料 | 第20-21页 |
1.2 方法 | 第21-31页 |
2 实验结果 | 第31-35页 |
2.1 P53基因克隆和单双基因重组转移质粒的构建和鉴定 | 第31-32页 |
2.2 RGD修饰的单双基因同源重组腺病毒质粒的构建和鉴定 | 第32-33页 |
2.3 各组重组腺病毒在QBI-293A细胞中的包装 | 第33页 |
2.4 各组重组腺病毒的效价检测 | 第33-34页 |
2.5 RT-PCR法鉴定ING4或/和P53单双基因重组腺病毒的构建 | 第34页 |
2.6 Western Blot法鉴定ING4或/和P53基因在QBI-293A细胞中的蛋白表达 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-38页 |
第二部分 腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞( A549)抑制作用的体外试验研究 | 第38-59页 |
1 材料与方法 | 第39-44页 |
1.1 材料 | 第39-40页 |
1.2 方法 | 第40-44页 |
2.实验结果 | 第44-53页 |
2.1 荧光显微镜观察各组重组腺病毒感染A549肺癌细胞后细胞内GFP表达 | 第44页 |
2.2 流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549肺癌细胞的感染效率 | 第44-45页 |
2.3 Western blot法鉴定ING4或/和P53基因在A549肺癌细胞中的蛋白表达 | 第45页 |
2.4 MTT法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞的生长抑制作用 | 第45-46页 |
2.5 流式细胞仪双染法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
2.6 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达水平的影响 | 第47页 |
2.7 Western blot法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内Bax、Bad、Bcl-xl蛋白表达水平的影响 | 第47-48页 |
2.8 流式细胞仪单染法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞周期的影响 | 第48-49页 |
2.9 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内P21和Cyclin -E mRNA表达水平的影响 | 第49页 |
2.10划痕实验鉴定ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞迁移能力的影响 | 第49-51页 |
2.11 Transwell法检测ING4或/和P53基因表达对人肺癌细胞侵袭能力的影响 | 第51-52页 |
2.12 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内MMP-2 和MMP-9 mRNA表达水平的影响 | 第52-53页 |
3.讨论 | 第53-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
第三部分 腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对裸鼠人肺腺癌移植瘤生长抑制效应的体内试验研究 | 第59-70页 |
1 材料与方法 | 第59-62页 |
1.1 材料 | 第59-60页 |
1.2 方法 | 第60-62页 |
2 结果 | 第62-66页 |
2.1 裸鼠人肺腺癌移植瘤模型的建立及成瘤率 | 第62页 |
2.2 裸鼠体内药物实验安全性观察 | 第62-63页 |
2.3 各组重组腺病毒对A549裸鼠人肺腺癌移植瘤的体内抗肿瘤效应 | 第63-65页 |
2.4 免疫组化检测ING4或/和P53基因表达在裸鼠体内抗肿瘤效应的分子机制 | 第65-66页 |
3 讨论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-70页 |
综述:ING4与P53的结合对肿瘤的影响 | 第70-80页 |
参考文献 | 第76-80页 |
攻读学位期间本人公开出版或发表的论著、论文 | 第80-81页 |
本论文受下列课题资助 | 第81-82页 |
缩略词表 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |