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RGD修饰的腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的体内外生长抑制作用

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
前言第13-19页
    参考文献第16-19页
第一部分 ING4或/和P53单双基因重组腺病毒的构建第19-38页
    1 材料与方法第20-31页
        1.1 材料第20-21页
        1.2 方法第21-31页
    2 实验结果第31-35页
        2.1 P53基因克隆和单双基因重组转移质粒的构建和鉴定第31-32页
        2.2 RGD修饰的单双基因同源重组腺病毒质粒的构建和鉴定第32-33页
        2.3 各组重组腺病毒在QBI-293A细胞中的包装第33页
        2.4 各组重组腺病毒的效价检测第33-34页
        2.5 RT-PCR法鉴定ING4或/和P53单双基因重组腺病毒的构建第34页
        2.6 Western Blot法鉴定ING4或/和P53基因在QBI-293A细胞中的蛋白表达第34-35页
    3 讨论第35-36页
    参考文献第36-38页
第二部分 腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞( A549)抑制作用的体外试验研究第38-59页
    1 材料与方法第39-44页
        1.1 材料第39-40页
        1.2 方法第40-44页
    2.实验结果第44-53页
        2.1 荧光显微镜观察各组重组腺病毒感染A549肺癌细胞后细胞内GFP表达第44页
        2.2 流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549肺癌细胞的感染效率第44-45页
        2.3 Western blot法鉴定ING4或/和P53基因在A549肺癌细胞中的蛋白表达第45页
        2.4 MTT法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞的生长抑制作用第45-46页
        2.5 流式细胞仪双染法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞凋亡的影响第46-47页
        2.6 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达水平的影响第47页
        2.7 Western blot法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内Bax、Bad、Bcl-xl蛋白表达水平的影响第47-48页
        2.8 流式细胞仪单染法检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞周期的影响第48-49页
        2.9 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内P21和Cyclin -E mRNA表达水平的影响第49页
        2.10划痕实验鉴定ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞迁移能力的影响第49-51页
        2.11 Transwell法检测ING4或/和P53基因表达对人肺癌细胞侵袭能力的影响第51-52页
        2.12 Real time-PCR检测ING4或/和P53基因表达对A549肺癌细胞内MMP-2 和MMP-9 mRNA表达水平的影响第52-53页
    3.讨论第53-56页
    参考文献第56-59页
第三部分 腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对裸鼠人肺腺癌移植瘤生长抑制效应的体内试验研究第59-70页
    1 材料与方法第59-62页
        1.1 材料第59-60页
        1.2 方法第60-62页
    2 结果第62-66页
        2.1 裸鼠人肺腺癌移植瘤模型的建立及成瘤率第62页
        2.2 裸鼠体内药物实验安全性观察第62-63页
        2.3 各组重组腺病毒对A549裸鼠人肺腺癌移植瘤的体内抗肿瘤效应第63-65页
        2.4 免疫组化检测ING4或/和P53基因表达在裸鼠体内抗肿瘤效应的分子机制第65-66页
    3 讨论第66-68页
    参考文献第68-70页
综述:ING4与P53的结合对肿瘤的影响第70-80页
    参考文献第76-80页
攻读学位期间本人公开出版或发表的论著、论文第80-81页
本论文受下列课题资助第81-82页
缩略词表第82-83页
致谢第83-84页

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