摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩写表 | 第8-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 p53的结构和功能 | 第12-15页 |
1.2 突变型p53的概述 | 第15-18页 |
1.2.1 突变型p53的类型 | 第15-16页 |
1.2.2 突变型p53的功能获得 | 第16-18页 |
1.3 HSP家族 | 第18-22页 |
1.3.1 HSP家族的分类与表达 | 第18-19页 |
1.3.2 HSP家族的功能 | 第19-20页 |
1.3.3 HSP70的概况 | 第20-21页 |
1.3.4 HSP90的概况 | 第21-22页 |
1.4 HSP70、HSP90与p53 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-35页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞株和菌种 | 第24页 |
2.1.2 载体和工具酶 | 第24页 |
2.1.3 试剂盒 | 第24页 |
2.1.4 抗体 | 第24-25页 |
2.1.5 细胞培养基 | 第25页 |
2.1.6 药品和试剂 | 第25页 |
2.1.7 溶液配制 | 第25-26页 |
2.2 RNA提取与反转录 | 第26-27页 |
2.3 质粒构建 | 第27-29页 |
2.4 免疫共沉淀结合质谱分析筛选p53R273H相互作用蛋白 | 第29-31页 |
2.4.1 免疫共沉淀 | 第29-30页 |
2.4.2 蛋白质的银染 | 第30页 |
2.4.3 银染蛋白质点酶解步骤 | 第30-31页 |
2.5 蛋白质印迹 | 第31-33页 |
2.5.1 提取细胞总蛋白 | 第31-32页 |
2.5.2 Western-blotting | 第32-33页 |
2.6 MTT法检测细胞生长抑制试验 | 第33页 |
2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第33-34页 |
2.8 统计学分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-46页 |
3.1 免疫共沉淀结合质谱分析筛选p53R273H相互作用蛋白 | 第35-41页 |
3.2 HSP70和HSP90抑制p53R273H蛋白的降解 | 第41-42页 |
3.3 p53R273H蛋白促进细胞增殖 | 第42页 |
3.4 HSP70和HSP90促进乳腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡 | 第42-44页 |
3.5 HSP70和HSP90促进细胞迁移 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
致谢 | 第53页 |