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红霉素发酵全合成培养基筛选及不同培养基对红色糖多孢菌代谢影响的初步探索

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
第1章 前言第10-17页
    1.1 红霉素概况第10-14页
        1.1.1 红霉素理化性质第10页
        1.1.2 红霉素结构第10-11页
        1.1.3 红霉素合成机理第11页
        1.1.4 我国红霉素生产现状第11页
        1.1.5 红霉素研究进展第11-14页
    1.2 高通量筛选技术第14-15页
        1.2.1 概述第14页
        1.2.2 培养基高通量筛选第14-15页
    1.3 代谢物组学研究第15-16页
    1.4 本研究的背景、意义和内容第16-17页
        1.4.1 研究背景和意义第16页
        1.4.2 研究内容第16-17页
第2章 材料与方法第17-26页
    2.1 实验材料第17-18页
        2.1.1 菌种第17页
        2.1.2 培养基组成第17-18页
        2.1.3 高通量检测培养基第18页
    2.2 培养方法第18-19页
        2.2.1 平板培养方法第18页
        2.2.2 摇瓶种子培养方法第18-19页
        2.2.3 检测菌斜面培养方法第19页
        2.2.4 检测菌孔板培养方法第19页
        2.2.5 发酵培养方法第19页
    2.3 实验仪器第19-20页
        2.3.1 5L发酵罐第19-20页
        2.3.2 其他仪器第20页
    2.4 试剂第20-22页
    2.5 测定方法第22-26页
        2.5.1 短小芽孢杆菌优化第22-23页
        2.5.2 高通量方法测定红霉素浓度第23-24页
        2.5.3 葡萄糖测定第24-25页
        2.5.4 培养基残磷的测定第25页
        2.5.5 胞外氨基酸测定第25页
        2.5.6 胞内磷酸糖、辅酶A测定第25页
        2.5.7 胞内氨基酸有机酸测定第25页
        2.5.8 菌体干重测定第25-26页
第3章 红色糖多孢菌全合成培养基优化第26-42页
    3.1 引言第26页
    3.2 实验设计第26-37页
        3.2.1 高通量筛选培养基第26-31页
        3.2.2 Plackett-Burman (PB)实验第31-35页
        3.2.3 中心组合设计(CCD)实验第35-37页
    3.3 摇瓶和5L罐发酵第37-40页
        3.3.1 培养基配方第37页
        3.3.2 摇瓶发酵结果第37-39页
        3.3.3 5L罐发酵结果第39-40页
    3.4 本章小结第40-42页
第4章 基于底物消耗的红霉素合成培养基优化第42-53页
    4.1 引言第42页
    4.2 实验材料与方法第42-43页
        4.2.1 仪器与材料第42页
        4.2.2 GC-MS测定胞外氨基酸第42-43页
        4.2.3 发酵方法第43页
    4.3 结果讨论第43-51页
        4.3.1 PB实验在5L罐的验证第43-46页
        4.3.2 氨基酸的优化第46页
        4.3.3 磷源实验优化第46-47页
        4.3.4 氮源优化第47-49页
        4.3.5 磷浓度降低实验和氨基酸浓度的添加实验第49-51页
    4.4 本章小结第51-53页
第5章 不同培养基对红色糖多孢菌合成红霉素产量的影响机制初步探索第53-69页
    5.1 引言第53页
    5.2 实验方法第53-56页
        5.2.1 菌体发酵方法第53页
        5.2.2 胞内代谢物灭活方法第53页
        5.2.3 胞内样品冻干第53页
        5.2.4 胞内磷酸糖和辅酶A类物质的提取第53-54页
        5.2.5 胞内氨基酸和有机酸的提取第54页
        5.2.6 LC-MS/MS测定胞内磷酸糖和辅酶A第54-55页
        5.2.7 GC-MS测定胞内有机酸和氨基酸第55-56页
    5.3 结果与讨论第56-68页
        5.3.1 胞内磷酸糖浓度与红霉素合成的关系第57-60页
        5.3.2 胞内辅酶A类物质浓度与红霉素合成的关系第60-62页
        5.3.3 胞内有机酸浓度与红霉素合成的关系第62-64页
        5.3.4 胞内氨基酸与红霉素合成的关系第64-68页
    5.4 本章小结第68-69页
第6章 结论与展望第69-70页
    6.1 结论第69页
    6.2 展望第69-70页
参考文献第70-76页
硕士期间发表的学术论文与研究成果第76-77页
致谢第77-78页
附表第78页

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