摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6页 |
第1章 前言 | 第10-17页 |
1.1 红霉素概况 | 第10-14页 |
1.1.1 红霉素理化性质 | 第10页 |
1.1.2 红霉素结构 | 第10-11页 |
1.1.3 红霉素合成机理 | 第11页 |
1.1.4 我国红霉素生产现状 | 第11页 |
1.1.5 红霉素研究进展 | 第11-14页 |
1.2 高通量筛选技术 | 第14-15页 |
1.2.1 概述 | 第14页 |
1.2.2 培养基高通量筛选 | 第14-15页 |
1.3 代谢物组学研究 | 第15-16页 |
1.4 本研究的背景、意义和内容 | 第16-17页 |
1.4.1 研究背景和意义 | 第16页 |
1.4.2 研究内容 | 第16-17页 |
第2章 材料与方法 | 第17-26页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 菌种 | 第17页 |
2.1.2 培养基组成 | 第17-18页 |
2.1.3 高通量检测培养基 | 第18页 |
2.2 培养方法 | 第18-19页 |
2.2.1 平板培养方法 | 第18页 |
2.2.2 摇瓶种子培养方法 | 第18-19页 |
2.2.3 检测菌斜面培养方法 | 第19页 |
2.2.4 检测菌孔板培养方法 | 第19页 |
2.2.5 发酵培养方法 | 第19页 |
2.3 实验仪器 | 第19-20页 |
2.3.1 5L发酵罐 | 第19-20页 |
2.3.2 其他仪器 | 第20页 |
2.4 试剂 | 第20-22页 |
2.5 测定方法 | 第22-26页 |
2.5.1 短小芽孢杆菌优化 | 第22-23页 |
2.5.2 高通量方法测定红霉素浓度 | 第23-24页 |
2.5.3 葡萄糖测定 | 第24-25页 |
2.5.4 培养基残磷的测定 | 第25页 |
2.5.5 胞外氨基酸测定 | 第25页 |
2.5.6 胞内磷酸糖、辅酶A测定 | 第25页 |
2.5.7 胞内氨基酸有机酸测定 | 第25页 |
2.5.8 菌体干重测定 | 第25-26页 |
第3章 红色糖多孢菌全合成培养基优化 | 第26-42页 |
3.1 引言 | 第26页 |
3.2 实验设计 | 第26-37页 |
3.2.1 高通量筛选培养基 | 第26-31页 |
3.2.2 Plackett-Burman (PB)实验 | 第31-35页 |
3.2.3 中心组合设计(CCD)实验 | 第35-37页 |
3.3 摇瓶和5L罐发酵 | 第37-40页 |
3.3.1 培养基配方 | 第37页 |
3.3.2 摇瓶发酵结果 | 第37-39页 |
3.3.3 5L罐发酵结果 | 第39-40页 |
3.4 本章小结 | 第40-42页 |
第4章 基于底物消耗的红霉素合成培养基优化 | 第42-53页 |
4.1 引言 | 第42页 |
4.2 实验材料与方法 | 第42-43页 |
4.2.1 仪器与材料 | 第42页 |
4.2.2 GC-MS测定胞外氨基酸 | 第42-43页 |
4.2.3 发酵方法 | 第43页 |
4.3 结果讨论 | 第43-51页 |
4.3.1 PB实验在5L罐的验证 | 第43-46页 |
4.3.2 氨基酸的优化 | 第46页 |
4.3.3 磷源实验优化 | 第46-47页 |
4.3.4 氮源优化 | 第47-49页 |
4.3.5 磷浓度降低实验和氨基酸浓度的添加实验 | 第49-51页 |
4.4 本章小结 | 第51-53页 |
第5章 不同培养基对红色糖多孢菌合成红霉素产量的影响机制初步探索 | 第53-69页 |
5.1 引言 | 第53页 |
5.2 实验方法 | 第53-56页 |
5.2.1 菌体发酵方法 | 第53页 |
5.2.2 胞内代谢物灭活方法 | 第53页 |
5.2.3 胞内样品冻干 | 第53页 |
5.2.4 胞内磷酸糖和辅酶A类物质的提取 | 第53-54页 |
5.2.5 胞内氨基酸和有机酸的提取 | 第54页 |
5.2.6 LC-MS/MS测定胞内磷酸糖和辅酶A | 第54-55页 |
5.2.7 GC-MS测定胞内有机酸和氨基酸 | 第55-56页 |
5.3 结果与讨论 | 第56-68页 |
5.3.1 胞内磷酸糖浓度与红霉素合成的关系 | 第57-60页 |
5.3.2 胞内辅酶A类物质浓度与红霉素合成的关系 | 第60-62页 |
5.3.3 胞内有机酸浓度与红霉素合成的关系 | 第62-64页 |
5.3.4 胞内氨基酸与红霉素合成的关系 | 第64-68页 |
5.4 本章小结 | 第68-69页 |
第6章 结论与展望 | 第69-70页 |
6.1 结论 | 第69页 |
6.2 展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
硕士期间发表的学术论文与研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
附表 | 第78页 |