摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
引言 | 第9-12页 |
第一章 材料与方法 | 第12-26页 |
1.1 材料 | 第12-15页 |
1.1.1 主要实验仪器设备 | 第12页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第12-14页 |
1.1.3 临床组织和血液样本的收集 | 第14页 |
1.1.4 乳腺癌细胞株 | 第14-15页 |
1.1.5 实验动物 | 第15页 |
1.2 方法 | 第15-26页 |
1.2.1 临床样本检测 | 第15-21页 |
1.2.1.1 收集临床病理资料并分析 | 第15页 |
1.2.1.2 组织取材和样本制备 | 第15-16页 |
1.2.1.3 H&E染色检测乳腺癌组织病理变化 | 第16-17页 |
1.2.1.4 流式细胞术检测外周血Th17细胞频率 | 第17页 |
1.2.1.5 ELISA法检测血清IL-17和CXCL1的浓度 | 第17-18页 |
1.2.1.6 免疫组化法检测乳腺癌组织IL-17、CXCL1及下游蛋白表达 | 第18-19页 |
1.2.1.7 RT-PCR法检测乳腺癌组织IL-17A、RORγt和CXCL1 mRNA表达 | 第19-21页 |
1.2.2 体外细胞实验 | 第21-24页 |
1.2.2.1 台盼蓝染色法检测细胞活性 | 第21-22页 |
1.2.2.2 ELISA法检测培养上清液中CXCL1的浓度 | 第22页 |
1.2.2.3 细胞分组 | 第22页 |
1.2.2.4 细胞增殖检测 | 第22页 |
1.2.2.5 细胞凋亡检测 | 第22-23页 |
1.2.2.6 细胞迁移检测 | 第23页 |
1.2.2.7 细胞内信号通路相关蛋白的检测 | 第23-24页 |
1.2.3 动物实验 | 第24-25页 |
1.2.3.1 试剂配制 | 第24页 |
1.2.3.2 建立Balb/c小鼠乳腺癌模型 | 第24页 |
1.2.3.3 测量肿瘤体积和质量 | 第24页 |
1.2.3.4 流式细胞术检测外周血Th17细胞频率 | 第24页 |
1.2.3.5 ELISA法检测血清IL-17和CXCL1的浓度 | 第24-25页 |
1.2.3.6 免疫组化法检测肿瘤组织IL-17、CXCL1、Bcl-2和VEGF蛋白表达 | 第25页 |
1.2.3.7 RT-PCR法检测肿瘤组织IL-17A、RORγt和CXCL1 mRNA表达 | 第25页 |
1.2.4 统计学分析 | 第25-26页 |
第二章 实验结果 | 第26-42页 |
2.1 临床样本检测 | 第26-33页 |
2.1.1 患者临床资料及病理学分析 | 第26页 |
2.1.2 乳腺癌患者外周血Th17细胞频率 | 第26-27页 |
2.1.3 乳腺癌患者IL-17和CXCL1的表达水平 | 第27-29页 |
2.1.4 乳腺癌组织中生长侵袭及血管生成等相关指标的表达 | 第29-31页 |
2.1.5 乳腺癌组织中信号通路相关指标的表达 | 第31-33页 |
2.2 体外细胞实验 | 第33-37页 |
2.2.1 细胞培养状态 | 第33页 |
2.2.2 细胞培养上清液中CXCL1浓度 | 第33-34页 |
2.2.3 细胞增殖能力检测 | 第34-35页 |
2.2.4 细胞凋亡检测 | 第35页 |
2.2.5 细胞迁移能力检测 | 第35-36页 |
2.2.6 细胞内信号通路相关蛋白检测 | 第36-37页 |
2.3 动物实验 | 第37-42页 |
2.3.1 成功建立Balb/c小鼠乳腺癌模型,小鼠生存状况及肿瘤大小检测 | 第37-38页 |
2.3.2 小鼠外周血Th17细胞频率 | 第38页 |
2.3.3 小鼠血清IL-17和-CXCL1浓度 | 第38-39页 |
2.3.4 IL-17和CXCL1在肿瘤组织的表达 | 第39-40页 |
2.3.5 Bcl-2和VEGF在肿瘤组织的表达 | 第40-42页 |
第三章 讨论 | 第42-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
综述 | 第50-68页 |
综述参考文献 | 第58-68页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |