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甜菜氨同化过程中GOGAT与GS协同作用的研究

摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
1 前言第13-23页
    1.1 研究目的和意义第13-14页
    1.2 国内外研究进展第14-23页
        1.2.1 不同氮素营养代谢及其相互作用的研究第14页
        1.2.2 氮素形态对植物氮代谢关键酶活性的影响第14-15页
        1.2.3 氮素形态在不同作物生长发育中研究进展第15-16页
        1.2.4 谷氨酰胺合成酶研究进展第16-18页
        1.2.5 谷氨酸合成酶研究进展第18-20页
        1.2.6 氮素对GS/GOGAT活性调节机制的研究进展第20-22页
        1.2.7 实时荧光定量PCR的应用研究第22-23页
2 材料与方法第23-32页
    2.1 试验材料第23页
    2.2 试验设计第23-24页
        2.2.1 不同形态氮素比例试验第23页
        2.2.2 抑制剂处理试验第23页
        2.2.3 试验技术路线第23-24页
    2.3 测定方法第24-27页
        2.3.1 GS和GOGAT活性测定第24-25页
        2.3.2 GS和GOGAT蛋白含量的测定第25-27页
            2.3.2.1 GS粗酶液的分级沉淀第26页
            2.3.2.4 标准曲线绘制第26-27页
    2.4 基因表达分析方法第27-30页
        2.4.1 总RNA提取和鉴定第27-28页
            2.4.1.2 具体步骤第27-28页
        2.4.2 反转录合成c DNA第28-29页
        2.4.3 实时荧光定量PCR第29-30页
    2.5 主要分子和生化试剂第30页
    2.6 主要仪器设备第30-31页
    2.7 数据统计分析第31-32页
3 结果与分析第32-65页
    3.1 不同NO_3~- /NH_4~+下甜菜GS和GOGAT活性变化第32-34页
        3.1.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS活性变化第32页
        3.1.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS活性变化第32-33页
        3.1.3 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GOGAT活性变化第33-34页
        3.1.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GOGAT活性变化第34页
    3.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下甜菜GOGAT、GS1和GS2基因表达及协同作用性分析第34-39页
        3.2.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片和根总RNA的获得第34-35页
        3.2.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS1、GS2和GOGAT基因表达分析第35-37页
        3.2.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS1、GS2和GOGAT基因表达分析第37-38页
        3.2.5 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS1、GS2与GOGAT基因协同作用分析第38-39页
    3.3 不同NO_3~-/NH_4~+处理下甜菜GS和GOGAT蛋白含量及协作用分析第39-43页
        3.3.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS蛋白含量变化第39-40页
        3.3.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GOGAT蛋白含量变化第40页
        3.3.3 不同NO_3~- /NH_4~+处理下叶片GS与GOGAT蛋白含量协作用分析第40-41页
        3.3.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS蛋白含量变化第41页
        3.3.5 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GOGAT蛋白含量变化第41-42页
        3.3.6 不同NO_3~- /NH_4~+处理下根GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析第42-43页
    3.4 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜GS和GOGAT活性变化及协同作用分析第43-46页
        3.4.1 甜菜叶片GOGAT活性变化第43页
        3.4.2 甜菜叶片GS活性变化第43-44页
        3.4.3 甜菜根中GOGAT活性变化第44页
        3.4.4 甜菜根中GS活性变化第44-45页
        3.4.5 甜菜GS与GOGAT活性协同作用分析第45-46页
    3.5 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜GS1、GS2和GOGAT基因表达及协同作用分析第46-50页
        3.5.1 甜菜叶片和根总RNA的获得第46-47页
        3.5.2 甜菜叶片GOGAT、GS1和GS2基因表达分析第47-48页
        3.5.3 甜菜叶片GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析第48页
        3.5.4 甜菜根中GOGAT、GS1和GS2基因表达分析第48-50页
        3.5.5 甜菜根中GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析第50页
    3.6 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜蛋白含量变化第50-54页
        3.6.1 甜菜叶片GS蛋白含量变化第50-51页
        3.6.2 甜菜叶片GOGAT蛋白含量变化第51页
        3.6.3 甜菜叶片GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析第51-52页
        3.6.4 甜菜根中GS蛋白含量变化第52页
        3.6.5 甜菜根中GOGAT蛋白含量变化第52-53页
        3.6.6 甜菜根中GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析第53-54页
    3.7 PPT处理下甜菜GS和GOGAT活性变化及协同作用分析第54-57页
        3.7.1 甜菜叶片GOGAT活性变化第54页
        3.7.2 甜菜叶片GS活性变化第54-55页
        3.7.3 甜菜根中GOGAT活性变化第55页
        3.7.4 甜菜根中GS活性变化第55-56页
        3.7.5 甜菜GS与GOGAT活性协同作用分析第56-57页
    3.8 PPT处理下甜菜GOGAT、GS1和GS2基因表达及协同作用分析第57-61页
        3.8.1 甜菜叶片和根总RNA的获得第57-58页
        3.8.2 甜菜叶片GOGAT、GS1和GS2基因表达分析第58-59页
        3.8.3 甜菜叶片GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析第59-60页
        3.8.4 甜菜根中GOGAT、GS1和GS2基因表达分析第60-61页
        3.8.5 甜菜根中GOGAT、GS1与GS2基因协同关系分析第61页
    3.9 PPT处理下甜菜蛋白含量变化及协同作用分析第61-65页
        3.9.1 甜菜叶片GS蛋白含量变化第61-62页
        3.9.2 甜菜叶片GOGAT蛋白含量变化第62页
        3.9.3 甜菜叶片GOGAT与GS蛋白含量协同作用分析第62-63页
        3.9.4 甜菜根中GS蛋白含量变化第63页
        3.9.5 甜菜根中GOGAT蛋白含量第63-64页
        3.9.6 甜菜根中GOGAT与GS蛋白含量协同作用分析第64-65页
4 讨论第65-68页
    4.1 不同比例氮素对GS与GOGAT活性和基因表达的影响及其最佳比例筛选第65-66页
    4.2 不同比例氮素GS与GOGAT的协同作用研究第66页
    4.3 重氮乙酰丝氨酸处理GS与GOGAT协同作用研究第66-67页
    4.4 PPT处理GOGAT与GS协同作用研究第67-68页
5 结论第68-69页
致谢第69-70页
参考文献第70-77页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第77页

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