摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-23页 |
1.1 研究目的和意义 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究进展 | 第14-23页 |
1.2.1 不同氮素营养代谢及其相互作用的研究 | 第14页 |
1.2.2 氮素形态对植物氮代谢关键酶活性的影响 | 第14-15页 |
1.2.3 氮素形态在不同作物生长发育中研究进展 | 第15-16页 |
1.2.4 谷氨酰胺合成酶研究进展 | 第16-18页 |
1.2.5 谷氨酸合成酶研究进展 | 第18-20页 |
1.2.6 氮素对GS/GOGAT活性调节机制的研究进展 | 第20-22页 |
1.2.7 实时荧光定量PCR的应用研究 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
2.1 试验材料 | 第23页 |
2.2 试验设计 | 第23-24页 |
2.2.1 不同形态氮素比例试验 | 第23页 |
2.2.2 抑制剂处理试验 | 第23页 |
2.2.3 试验技术路线 | 第23-24页 |
2.3 测定方法 | 第24-27页 |
2.3.1 GS和GOGAT活性测定 | 第24-25页 |
2.3.2 GS和GOGAT蛋白含量的测定 | 第25-27页 |
2.3.2.1 GS粗酶液的分级沉淀 | 第26页 |
2.3.2.4 标准曲线绘制 | 第26-27页 |
2.4 基因表达分析方法 | 第27-30页 |
2.4.1 总RNA提取和鉴定 | 第27-28页 |
2.4.1.2 具体步骤 | 第27-28页 |
2.4.2 反转录合成c DNA | 第28-29页 |
2.4.3 实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
2.5 主要分子和生化试剂 | 第30页 |
2.6 主要仪器设备 | 第30-31页 |
2.7 数据统计分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-65页 |
3.1 不同NO_3~- /NH_4~+下甜菜GS和GOGAT活性变化 | 第32-34页 |
3.1.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS活性变化 | 第32页 |
3.1.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS活性变化 | 第32-33页 |
3.1.3 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GOGAT活性变化 | 第33-34页 |
3.1.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GOGAT活性变化 | 第34页 |
3.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下甜菜GOGAT、GS1和GS2基因表达及协同作用性分析 | 第34-39页 |
3.2.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片和根总RNA的获得 | 第34-35页 |
3.2.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS1、GS2和GOGAT基因表达分析 | 第35-37页 |
3.2.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS1、GS2和GOGAT基因表达分析 | 第37-38页 |
3.2.5 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS1、GS2与GOGAT基因协同作用分析 | 第38-39页 |
3.3 不同NO_3~-/NH_4~+处理下甜菜GS和GOGAT蛋白含量及协作用分析 | 第39-43页 |
3.3.1 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GS蛋白含量变化 | 第39-40页 |
3.3.2 不同NO_3~-/NH_4~+处理下叶片GOGAT蛋白含量变化 | 第40页 |
3.3.3 不同NO_3~- /NH_4~+处理下叶片GS与GOGAT蛋白含量协作用分析 | 第40-41页 |
3.3.4 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GS蛋白含量变化 | 第41页 |
3.3.5 不同NO_3~-/NH_4~+处理下根GOGAT蛋白含量变化 | 第41-42页 |
3.3.6 不同NO_3~- /NH_4~+处理下根GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析 | 第42-43页 |
3.4 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜GS和GOGAT活性变化及协同作用分析 | 第43-46页 |
3.4.1 甜菜叶片GOGAT活性变化 | 第43页 |
3.4.2 甜菜叶片GS活性变化 | 第43-44页 |
3.4.3 甜菜根中GOGAT活性变化 | 第44页 |
3.4.4 甜菜根中GS活性变化 | 第44-45页 |
3.4.5 甜菜GS与GOGAT活性协同作用分析 | 第45-46页 |
3.5 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜GS1、GS2和GOGAT基因表达及协同作用分析 | 第46-50页 |
3.5.1 甜菜叶片和根总RNA的获得 | 第46-47页 |
3.5.2 甜菜叶片GOGAT、GS1和GS2基因表达分析 | 第47-48页 |
3.5.3 甜菜叶片GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析 | 第48页 |
3.5.4 甜菜根中GOGAT、GS1和GS2基因表达分析 | 第48-50页 |
3.5.5 甜菜根中GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析 | 第50页 |
3.6 重氮乙酰丝氨酸处理下甜菜蛋白含量变化 | 第50-54页 |
3.6.1 甜菜叶片GS蛋白含量变化 | 第50-51页 |
3.6.2 甜菜叶片GOGAT蛋白含量变化 | 第51页 |
3.6.3 甜菜叶片GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析 | 第51-52页 |
3.6.4 甜菜根中GS蛋白含量变化 | 第52页 |
3.6.5 甜菜根中GOGAT蛋白含量变化 | 第52-53页 |
3.6.6 甜菜根中GS与GOGAT蛋白含量协同作用分析 | 第53-54页 |
3.7 PPT处理下甜菜GS和GOGAT活性变化及协同作用分析 | 第54-57页 |
3.7.1 甜菜叶片GOGAT活性变化 | 第54页 |
3.7.2 甜菜叶片GS活性变化 | 第54-55页 |
3.7.3 甜菜根中GOGAT活性变化 | 第55页 |
3.7.4 甜菜根中GS活性变化 | 第55-56页 |
3.7.5 甜菜GS与GOGAT活性协同作用分析 | 第56-57页 |
3.8 PPT处理下甜菜GOGAT、GS1和GS2基因表达及协同作用分析 | 第57-61页 |
3.8.1 甜菜叶片和根总RNA的获得 | 第57-58页 |
3.8.2 甜菜叶片GOGAT、GS1和GS2基因表达分析 | 第58-59页 |
3.8.3 甜菜叶片GOGAT、GS1与GS2基因协同作用分析 | 第59-60页 |
3.8.4 甜菜根中GOGAT、GS1和GS2基因表达分析 | 第60-61页 |
3.8.5 甜菜根中GOGAT、GS1与GS2基因协同关系分析 | 第61页 |
3.9 PPT处理下甜菜蛋白含量变化及协同作用分析 | 第61-65页 |
3.9.1 甜菜叶片GS蛋白含量变化 | 第61-62页 |
3.9.2 甜菜叶片GOGAT蛋白含量变化 | 第62页 |
3.9.3 甜菜叶片GOGAT与GS蛋白含量协同作用分析 | 第62-63页 |
3.9.4 甜菜根中GS蛋白含量变化 | 第63页 |
3.9.5 甜菜根中GOGAT蛋白含量 | 第63-64页 |
3.9.6 甜菜根中GOGAT与GS蛋白含量协同作用分析 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-68页 |
4.1 不同比例氮素对GS与GOGAT活性和基因表达的影响及其最佳比例筛选 | 第65-66页 |
4.2 不同比例氮素GS与GOGAT的协同作用研究 | 第66页 |
4.3 重氮乙酰丝氨酸处理GS与GOGAT协同作用研究 | 第66-67页 |
4.4 PPT处理GOGAT与GS协同作用研究 | 第67-68页 |
5 结论 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77页 |