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玉米GRAS转录因子家族基因克隆与功能验证

符号说明第4-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-21页
    1.1 GRAS转录因子家族的结构第12-13页
    1.2 GRAS转录因子家族的分类第13-14页
    1.3 GRAS转录因子家族的功能第14-19页
        1.3.1 SCR/SHR与根及茎的极性生长第14-15页
        1.3.2 SCL3/DELLA与GA信号转导途径第15-16页
        1.3.3 HAM与茎分生组织的形成第16页
        1.3.4 LS与腋芽发育过程第16-17页
        1.3.5 PAT1/SCL13与光敏色素相关的信号转导途径第17页
        1.3.6 LISCL与生长素及胁迫下的信号转导途径第17-18页
        1.3.7 其他GRAS蛋白的功能第18-19页
    1.4 本研究的目的及意义第19-21页
2 材料和方法第21-39页
    2.1 实验材料第21-28页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 植物材料培养与处理第21页
        2.1.3 酶及生化试剂第21页
        2.1.4 菌株和质粒第21-22页
        2.1.5 PCR引物第22-26页
        2.1.6 培养基第26-28页
    2.2 实验方法第28-39页
        2.2.1 GRAS家族生物信息学分析第28-29页
        2.2.2 玉米不同部位GRAS基因的表达分析第29-30页
            2.2.2.1 植物材料总RNA提取第29页
            2.2.2.2 RNA反转录形成cDNA第一链第29-30页
            2.2.2.3 实时定量PCR第30页
        2.2.3 基因组DNA的提取第30-31页
        2.2.4 ZmGRAS基因的克隆以及载体构建第31-36页
            2.2.4.1 ZmGRAS基因的克隆第31页
            2.2.4.2 琼脂糖凝胶胶回收(Axygen)第31-32页
            2.2.4.3 连接克隆载体第32页
            2.2.4.4 大肠杆菌感受态细胞的制备第32-33页
            2.2.4.5 热激法转化大肠杆菌第33页
            2.2.4.6 菌落PCR鉴定第33-34页
            2.2.4.7 提取质粒(康为世纪高纯度质粒小提取试剂盒)第34页
            2.2.4.8 酶切以及连接反应第34-35页
            2.2.4.9 农杆菌感受态细胞的制备第35页
            2.2.4.10 冻融法转化农杆菌感受态第35-36页
        2.2.5 农杆菌介导的拟南芥转化第36页
        2.2.6 农杆菌侵染法介导的短柄草遗传转化第36-37页
            2.2.6.1 愈伤组织诱导第36页
            2.2.6.2 侵染与共培养第36-37页
            2.2.6.3 筛选阶段第37页
            2.2.6.4 分化及生根阶段第37页
        2.2.7 转基因植株的鉴定第37-39页
            2.2.7.1 转基因拟南芥的鉴定第37-38页
            2.2.7.2 转基因二穗短柄草的鉴定第38-39页
3 结果与分析第39-55页
    3.1 ZmGRAS转录因子家族生物信息学分析第39-49页
        3.1.1 ZmGRAS基因的确定第39-42页
        3.1.2 ZmGRAS蛋白序列与拟南芥、水稻、高粱的系统进化树分析第42-43页
        3.1.3 ZmGRAS蛋白保守结构域分析第43-44页
        3.1.4 ZmGRAS基因结构分析第44-47页
        3.1.5 ZmGRAS基因染色体定位第47-48页
        3.1.6 ZmGRAS基因启动子顺式作用元件分析第48页
        3.1.7 ZmGRAS基因表达谱分析第48-49页
    3.2 部分ZmGRAS基因在玉米中的表达分析第49-51页
    3.3 ZmGRAS基因的克隆及载体构建第51-52页
    3.4 ZmGRAS基因在拟南芥中的功能分析第52-53页
        3.4.1 转基因拟南芥的鉴定第52页
        3.4.2 过表达ZmGRAS41和ZmGRAS74对拟南芥下胚轴的伸长的影响第52-53页
        3.4.3 过表达ZmGRAS39和ZmGRAS40对拟南芥开花时间的影响第53页
    3.5 ZmGRAS基因在二穗短柄草中的功能分析第53-55页
        3.5.1 转基因二穗短柄草的鉴定第53页
        3.5.2 过表达ZmGRAS47和ZmGRAS84对二穗短柄草株高的影响第53-55页
4 讨论第55-58页
5 结论第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表论文情况第68页

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