中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
前言 | 第13-14页 |
1 综述 | 第14-25页 |
1.1 食肉动物细小病毒 | 第14-17页 |
1.1.1 食肉动物细小病毒简介 | 第14-15页 |
1.1.2 食肉动物细小病毒分子生物学特性 | 第15-16页 |
1.1.3 食肉动物细小病毒复制机制 | 第16页 |
1.1.4 食肉动物细小病毒的抗原特性 | 第16-17页 |
1.2 水貂肠炎细小病毒性的病原性 | 第17-18页 |
1.2.1 流行病学 | 第17-18页 |
1.2.2 临床症状 | 第18页 |
1.3 水貂肠炎细小病毒的分子生物学特性 | 第18-21页 |
1.3.1 理化与增殖特性 | 第18-19页 |
1.3.2 基因组成 | 第19页 |
1.3.3 致病机理 | 第19-20页 |
1.3.4 基因组末端的功能 | 第20-21页 |
1.4 水貂肠炎细小病毒的编码蛋白及其功能 | 第21-23页 |
1.4.1 结构蛋白 | 第21-22页 |
1.4.2 非结构蛋白 | 第22-23页 |
1.5 水貂肠炎细小病毒跨种间传播的特点 | 第23-24页 |
1.6 水貂肠炎细小病毒的诊断和防治 | 第24-25页 |
1.6.1 诊断 | 第24页 |
1.6.2 防治 | 第24-25页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第25页 |
2 材料与方法 | 第25-37页 |
2.1 材料 | 第25-28页 |
2.1.1 病料和血清 | 第25页 |
2.1.2 细胞 | 第25-26页 |
2.1.3 实验动物 | 第26页 |
2.1.4 主要仪器和试剂 | 第26-27页 |
2.1.4.1 主要仪器 | 第26页 |
2.1.4.2 主要试剂 | 第26页 |
2.1.4.3 主要试剂的配制 | 第26-27页 |
2.1.5 引物 | 第27-28页 |
2.1.6 参考毒株序列 | 第28页 |
2.2 试验方法 | 第28-37页 |
2.2.1 病毒的分离 | 第28-29页 |
2.2.1.1 检测引物的设计 | 第28页 |
2.2.1.2 病料处理 | 第28页 |
2.2.1.3 病毒分离培养 | 第28-29页 |
2.2.2 血清中和抗体滴度的测定 | 第29-30页 |
2.2.2.1 TCID50的测定 | 第29页 |
2.2.2.2 中和抗体效价测定 | 第29-30页 |
2.2.3 细小病毒VP2和NS1基因组的克隆测序 | 第30-34页 |
2.2.3.1 病毒基因组DNA的提取 | 第30-31页 |
2.2.3.2 NS1、VP2基因组的扩增 | 第31页 |
2.2.3.3 1%琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
2.2.3.4 目的片段的回收纯化 | 第31-32页 |
2.2.3.5 重组载体的构建 | 第32页 |
2.2.3.6 DH5α感受态细胞制备 | 第32-33页 |
2.2.3.7 重组载体的转化 | 第33页 |
2.2.3.8 重组质粒的提取 | 第33-34页 |
2.2.3.9 重组质粒的酶切鉴定以及测序 | 第34页 |
2.2.4 8 株细小病毒的基因序列分析 | 第34-35页 |
2.2.5 MEV-SD1对水貂的致病性实验 | 第35-37页 |
2.2.5.1 攻毒实验 | 第35页 |
2.2.5.2 临床检测 | 第35页 |
2.2.5.3 血清学检查 | 第35页 |
2.2.5.4 病理组织学检查 | 第35-37页 |
3 结果 | 第37-47页 |
3.0 PCR初步检测结果 | 第37页 |
3.1 病毒的分离 | 第37-38页 |
3.2 血清抗体滴度测定结果 | 第38-39页 |
3.3 NS1和VP2基因的PCR扩增结果 | 第39-40页 |
3.4 NS1和VP2基因的基因序列分析 | 第40-44页 |
3.4.1 核苷酸序列分析 | 第40-41页 |
3.4.2 氨基酸序列分析 | 第41-43页 |
3.4.3 遗传进化分析 | 第43-44页 |
3.5 动物致病性实验结果 | 第44-47页 |
3.5.1 临床症状观察 | 第44-46页 |
3.5.2 剖检病理学观察 | 第46页 |
3.5.3 血清学检测 | 第46页 |
3.5.4 排毒情况的检测 | 第46-47页 |
3.5.5 组织病理学观察 | 第47页 |
4 讨论 | 第47-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
6 参考文献 | 第52-60页 |
7 附录 | 第60-71页 |
8 致谢 | 第71-72页 |
9 攻读学位期间发表论文文情况情况 | 第72页 |