| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略词表 | 第18-20页 |
| 文献综述 | 第20-43页 |
| 1 精原干细胞的来源及体内精子发生过程 | 第20-21页 |
| 1.1 SSCs的来源 | 第20-21页 |
| 1.2 精子的发生 | 第21页 |
| 2 SSCs微环境及调控 | 第21-24页 |
| 3 影响SSCs分离和纯化的因素 | 第24-27页 |
| 3.1 年龄 | 第24页 |
| 3.2 消化方法 | 第24-25页 |
| 3.3 纯化方法 | 第25-27页 |
| 4 影响精原干细胞体外增殖的因素 | 第27-32页 |
| 4.1 培养基和血清 | 第27-28页 |
| 4.2 细胞因子 | 第28页 |
| 4.3 饲养层 | 第28-29页 |
| 4.4 激素 | 第29-30页 |
| 4.5 维生素 | 第30-31页 |
| 4.6 温度 | 第31-32页 |
| 5 雄性生殖干细胞体内外分化 | 第32-37页 |
| 5.1 SSCs体内分化 | 第32-35页 |
| 5.2 SSCs体外分化 | 第35-37页 |
| 6 精原干细胞自我更新和分化的调节 | 第37-42页 |
| 6.1 外源性生长因子对SSC自我更新的调节 | 第37-38页 |
| 6.2 内部转录因子对SSCs自我更新的调节 | 第38-39页 |
| 6.3 调节SSCs分化的转录因子 | 第39-41页 |
| 6.4 整合素 | 第41-42页 |
| 7 结语 | 第42-43页 |
| 引言 | 第43-46页 |
| 第一章 山羊精原干细胞分离纯化方法的建立 | 第46-67页 |
| 引言 | 第46-47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 1.1 材料 | 第47-48页 |
| 1.2 方法 | 第48-52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-62页 |
| 2.1 不同日龄山羊睾丸SSCs分离效果 | 第52-57页 |
| 2.2 不同消化分离方法对新生羊睾丸分离效果 | 第57-60页 |
| 2.3 不同纯化的方法对新生羊睾丸纯化效果 | 第60-62页 |
| 3 讨论 | 第62-66页 |
| 3.1 不同日龄山羊睾丸SSCs分离效果 | 第62-64页 |
| 3.2 不同分离的方法对新生羊睾丸分离效果 | 第64-65页 |
| 3.3 不同纯化方法对新生羊睾丸纯化效果 | 第65-66页 |
| 4 结论 | 第66-67页 |
| 第二章 不同饲养层对山羊SSCs增殖的影响及其机制 | 第67-79页 |
| 引言 | 第67-68页 |
| 1 材料与方法 | 第68-71页 |
| 1.1 材料 | 第68页 |
| 1.2 方法 | 第68-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-76页 |
| 2.1 SSCs克隆形态 | 第71-72页 |
| 2.2 培养在不同饲养层上山羊SSCs克隆数和面积 | 第72-73页 |
| 2.3 免疫荧光染色 | 第73-74页 |
| 2.4 AKP染色 | 第74页 |
| 2.5 不同培养时间培养液营养因子的检测 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| 4 结论 | 第78-79页 |
| 第三章 Vc对山羊SSCs增殖的影响及作用机制 | 第79-91页 |
| 引言 | 第79页 |
| 1 材料和方法 | 第79-83页 |
| 1.1 材料 | 第79-81页 |
| 1.2 方法 | 第81-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-88页 |
| 2.1 不同浓度Vc对山羊SSCs生长的影响 | 第83-84页 |
| 2.2 流式细胞分析在不同浓度Vc培养液中Thy1+和Oct4+的细胞数 | 第84-85页 |
| 2.3 AKP染色和免疫荧光染色 | 第85-86页 |
| 2.4 细胞内ROS分析 | 第86-87页 |
| 2.5 凋亡和抗凋亡相关基因的表达 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-90页 |
| 4 结论 | 第90-91页 |
| 第四章 肝细胞因子对山羊SSCs和睾丸体细胞联合移植后体内分化的研究 | 第91-108页 |
| 引言 | 第91-92页 |
| 1 材料与方法 | 第92-95页 |
| 1.1 材料 | 第92-93页 |
| 1.2 方法 | 第93-95页 |
| 2 结果与分析 | 第95-104页 |
| 2.1 移植前睾丸细胞悬液成分鉴定 | 第95-96页 |
| 2.2 睾丸细胞联合移植到肾包膜的发育 | 第96页 |
| 2.3 睾丸细胞联合移植到皮下的发育 | 第96-97页 |
| 2.4 睾丸细胞联合移植到肾包膜和背部皮下不同时间后移植块重量变化 | 第97-98页 |
| 2.5 联合移植到肾包膜不同时间后移植块组织学观察 | 第98-99页 |
| 2.6 联合移植到皮下不同时间后移植块组织学观察 | 第99-100页 |
| 2.7 RT-PCR和qRT-PCR检测不同移植时间后肾包膜和皮下移植块中基因的表达 | 第100-102页 |
| 2.8 qRT-PCR检测不同移植时间后背部皮下和肾包膜下移植块中基因的表达 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-107页 |
| 3.1 睾丸微环境细胞对移植后生殖细胞精子发生的影响 | 第104-105页 |
| 3.2 移植位置对移植物生殖细胞精子发生的影响 | 第105-106页 |
| 3.3 肝细胞因子对移植块生殖细胞精子发生的影响 | 第106-107页 |
| 4 结论 | 第107-108页 |
| 第五章 山羊SSCs体外分化的调控 | 第108-124页 |
| 引言 | 第108-109页 |
| 1 材料与方法 | 第109-112页 |
| 1.1 材料 | 第109-110页 |
| 1.2 方法 | 第110-112页 |
| 2 结果与分析 | 第112-119页 |
| 2.1 移植前睾丸细胞悬液成分鉴定 | 第112-113页 |
| 2.2 倍体分析 | 第113-114页 |
| 2.3 免疫荧光染色鉴定细胞分化 | 第114-115页 |
| 2.4 RT-PCR | 第115-116页 |
| 2.5 qRT-PCR检测 | 第116-119页 |
| 3 讨论和分析 | 第119-123页 |
| 3.1 培养条件对体外精子发生的影响 | 第119-120页 |
| 3.2 倍体分析 | 第120页 |
| 3.3 热休克蛋白 | 第120-121页 |
| 3.4 睾丸微环境因素对体外精子发生的调控 | 第121-123页 |
| 4 结论 | 第123-124页 |
| 全文结论 | 第124-125页 |
| 本研究的创新点 | 第125-126页 |
| 本研究尚待解决的问题 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 作者简介 | 第149页 |
| 工作经历 | 第149-150页 |
| 在读期间发表相关论文 | 第150页 |
