摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第14-30页 |
1.1 课题来源 | 第14页 |
1.2 课题的研究目的和意义 | 第14-17页 |
1.3 国内外研究现状 | 第17-28页 |
1.3.1 微流控数字PCR技术在生物粒子定量技术中的应用 | 第17-22页 |
1.3.2 介电泳技术在粒子分离和分选上的应用 | 第22-25页 |
1.3.3 液滴微流控技术在生物反应加样和取样中的研究 | 第25-26页 |
1.3.4 液滴微流控技术在生物化学反应中的应用 | 第26-28页 |
1.4 本文的主要研究内容 | 第28-30页 |
第2章 基于液滴微流控系统的高通量颗粒检测与分选机制研究 | 第30-53页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 微通道内两相流基础 | 第30-32页 |
2.2.1 液滴分析中的无量纲参数 | 第30-31页 |
2.2.2 壁面润湿特性及接触角 | 第31-32页 |
2.2.3 Marangoni效应 | 第32页 |
2.3 液滴生成及分选控制方程建立 | 第32-39页 |
2.3.1 相场-流体状态属性描述 | 第33-34页 |
2.3.2 流场-流体运动状态的描述 | 第34-35页 |
2.3.3 静电场分布求解 | 第35-36页 |
2.3.4 微纳尺度效应 | 第36-37页 |
2.3.5 介电泳分选控制方程 | 第37-39页 |
2.4 液滴生成及分选仿真与实验对比研究 | 第39-42页 |
2.5 微通道中液滴的检测和分选 | 第42-52页 |
2.5.1 液滴的检测 | 第42-43页 |
2.5.2 液滴的分选 | 第43-44页 |
2.5.3 分选芯片通道设计 | 第44-49页 |
2.5.4 电极结构的建模分析 | 第49-51页 |
2.5.5 分选装置设计准则 | 第51-52页 |
2.6 本章小结 | 第52-53页 |
第3章 基于液滴微流控系统的RNA病毒定量检测技术研究 | 第53-75页 |
3.1 引言 | 第53页 |
3.2 RNA病毒定量检测方案的设计 | 第53-57页 |
3.3 用于RNA病毒定量检测的液滴微流控芯片 | 第57-65页 |
3.3.1 二维PDMS微流控芯片的设计与加工 | 第58-61页 |
3.3.2 用于包裹RNA病毒的液滴生成装置 | 第61-62页 |
3.3.3 用于液滴荧光检测的微流控装置 | 第62-63页 |
3.3.4 液滴中PCR扩增和激光诱导荧光检测原理 | 第63-65页 |
3.4 液滴微流控系统进行RNA病毒定量检测的实验研究 | 第65-69页 |
3.4.1 病毒样品的制备 | 第65-67页 |
3.4.2 RT-PCR的基本组成成分 | 第67-68页 |
3.4.3 液滴生成实验和RT-PCR扩增实验 | 第68-69页 |
3.5 RNA病毒定量检测的结果与讨论 | 第69-74页 |
3.5.1 单个MNV-1 病毒的扩增结果 | 第69-71页 |
3.5.2 病毒基因组的绝对定量分析 | 第71-72页 |
3.5.3 病毒稀释性实验的结果分析 | 第72-74页 |
3.6 本章小结 | 第74-75页 |
第4章 复合液滴微流控系统搭建及病毒滴度研究 | 第75-108页 |
4.1 引言 | 第75页 |
4.2 复合液滴微流控系统进行病毒滴度研究的总体方案 | 第75-79页 |
4.3 复合液滴微流控芯片系统的设计与加工 | 第79-89页 |
4.3.1 三维PDMS微流控芯片的加工工艺 | 第80-85页 |
4.3.2 具有“取样和注入”功能的微流控芯片设计 | 第85页 |
4.3.3 病毒和细胞共同包裹的液滴生成装置 | 第85-87页 |
4.3.4 用于病毒滴度分析的液滴荧光检测芯片 | 第87-88页 |
4.3.5 芯片中电极结构的加工流程 | 第88-89页 |
4.4 利用复合液滴微流控系统进行病毒滴度研究 | 第89-93页 |
4.4.1 病毒滴度实验的样品制备 | 第89-91页 |
4.4.2 用于细胞、病毒的共同封装和孵育的液滴生成芯片 | 第91页 |
4.4.3 病毒基因取样和RT-PCR试剂注入 | 第91-93页 |
4.4.4 具有病毒样本的液滴荧光检测实验 | 第93页 |
4.5 病毒滴度实验研究的结果分析 | 第93-107页 |
4.5.1 液滴包裹病毒和细胞的泊松分布 | 第93-95页 |
4.5.2 用于检测病毒滴度的稀释实验研究 | 第95-98页 |
4.5.3 用于液滴荧光检测的RT-PCR参数优化 | 第98-100页 |
4.5.4 病毒的滴度实验结果的分析 | 第100-104页 |
4.5.5 面向多种生物样品滴度检测的液滴微流控系统优化 | 第104-105页 |
4.5.6 MNV变体的抗体中和测试实验结果分析 | 第105-107页 |
4.6 本章小结 | 第107-108页 |
第5章 具有分选功能的复合液滴微流控系统进行低拷贝数重组病毒的定量检测研究 | 第108-138页 |
5.1 引言 | 第108页 |
5.2 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的方案设计 | 第108-114页 |
5.3 具有分选功能的复合液滴微流控芯片 | 第114-115页 |
5.4 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的实验研究 | 第115-123页 |
5.4.1 生物样品制备及低拷贝数重组病毒差异化PCR方法 | 第115-122页 |
5.4.2 单个重组病毒分选和测序的实验研究 | 第122-123页 |
5.5 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的实验结果与讨论 | 第123-137页 |
5.5.1 确定MNV病毒基因组上发生病毒重组的区域 | 第123-126页 |
5.5.2 亲代病毒MNV-1 和WU20浓度测定结果 | 第126-129页 |
5.5.3 用于低拷贝数重组病毒扩增的RT-PCR参数优化 | 第129-130页 |
5.5.4 重组病毒的鉴定结果 | 第130-131页 |
5.5.5 人工重组病毒分析 | 第131-133页 |
5.5.6 真实重组病毒频率分析 | 第133-134页 |
5.5.7 重组病毒的桑格测序分析 | 第134-137页 |
5.6 本章小结 | 第137-138页 |
结论 | 第138-141页 |
参考文献 | 第141-152页 |
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第152-155页 |
致谢 | 第155-156页 |
个人简历 | 第156页 |