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基于液滴微流控的病毒颗粒检测与分选关键技术研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 绪论第14-30页
    1.1 课题来源第14页
    1.2 课题的研究目的和意义第14-17页
    1.3 国内外研究现状第17-28页
        1.3.1 微流控数字PCR技术在生物粒子定量技术中的应用第17-22页
        1.3.2 介电泳技术在粒子分离和分选上的应用第22-25页
        1.3.3 液滴微流控技术在生物反应加样和取样中的研究第25-26页
        1.3.4 液滴微流控技术在生物化学反应中的应用第26-28页
    1.4 本文的主要研究内容第28-30页
第2章 基于液滴微流控系统的高通量颗粒检测与分选机制研究第30-53页
    2.1 引言第30页
    2.2 微通道内两相流基础第30-32页
        2.2.1 液滴分析中的无量纲参数第30-31页
        2.2.2 壁面润湿特性及接触角第31-32页
        2.2.3 Marangoni效应第32页
    2.3 液滴生成及分选控制方程建立第32-39页
        2.3.1 相场-流体状态属性描述第33-34页
        2.3.2 流场-流体运动状态的描述第34-35页
        2.3.3 静电场分布求解第35-36页
        2.3.4 微纳尺度效应第36-37页
        2.3.5 介电泳分选控制方程第37-39页
    2.4 液滴生成及分选仿真与实验对比研究第39-42页
    2.5 微通道中液滴的检测和分选第42-52页
        2.5.1 液滴的检测第42-43页
        2.5.2 液滴的分选第43-44页
        2.5.3 分选芯片通道设计第44-49页
        2.5.4 电极结构的建模分析第49-51页
        2.5.5 分选装置设计准则第51-52页
    2.6 本章小结第52-53页
第3章 基于液滴微流控系统的RNA病毒定量检测技术研究第53-75页
    3.1 引言第53页
    3.2 RNA病毒定量检测方案的设计第53-57页
    3.3 用于RNA病毒定量检测的液滴微流控芯片第57-65页
        3.3.1 二维PDMS微流控芯片的设计与加工第58-61页
        3.3.2 用于包裹RNA病毒的液滴生成装置第61-62页
        3.3.3 用于液滴荧光检测的微流控装置第62-63页
        3.3.4 液滴中PCR扩增和激光诱导荧光检测原理第63-65页
    3.4 液滴微流控系统进行RNA病毒定量检测的实验研究第65-69页
        3.4.1 病毒样品的制备第65-67页
        3.4.2 RT-PCR的基本组成成分第67-68页
        3.4.3 液滴生成实验和RT-PCR扩增实验第68-69页
    3.5 RNA病毒定量检测的结果与讨论第69-74页
        3.5.1 单个MNV-1 病毒的扩增结果第69-71页
        3.5.2 病毒基因组的绝对定量分析第71-72页
        3.5.3 病毒稀释性实验的结果分析第72-74页
    3.6 本章小结第74-75页
第4章 复合液滴微流控系统搭建及病毒滴度研究第75-108页
    4.1 引言第75页
    4.2 复合液滴微流控系统进行病毒滴度研究的总体方案第75-79页
    4.3 复合液滴微流控芯片系统的设计与加工第79-89页
        4.3.1 三维PDMS微流控芯片的加工工艺第80-85页
        4.3.2 具有“取样和注入”功能的微流控芯片设计第85页
        4.3.3 病毒和细胞共同包裹的液滴生成装置第85-87页
        4.3.4 用于病毒滴度分析的液滴荧光检测芯片第87-88页
        4.3.5 芯片中电极结构的加工流程第88-89页
    4.4 利用复合液滴微流控系统进行病毒滴度研究第89-93页
        4.4.1 病毒滴度实验的样品制备第89-91页
        4.4.2 用于细胞、病毒的共同封装和孵育的液滴生成芯片第91页
        4.4.3 病毒基因取样和RT-PCR试剂注入第91-93页
        4.4.4 具有病毒样本的液滴荧光检测实验第93页
    4.5 病毒滴度实验研究的结果分析第93-107页
        4.5.1 液滴包裹病毒和细胞的泊松分布第93-95页
        4.5.2 用于检测病毒滴度的稀释实验研究第95-98页
        4.5.3 用于液滴荧光检测的RT-PCR参数优化第98-100页
        4.5.4 病毒的滴度实验结果的分析第100-104页
        4.5.5 面向多种生物样品滴度检测的液滴微流控系统优化第104-105页
        4.5.6 MNV变体的抗体中和测试实验结果分析第105-107页
    4.6 本章小结第107-108页
第5章 具有分选功能的复合液滴微流控系统进行低拷贝数重组病毒的定量检测研究第108-138页
    5.1 引言第108页
    5.2 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的方案设计第108-114页
    5.3 具有分选功能的复合液滴微流控芯片第114-115页
    5.4 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的实验研究第115-123页
        5.4.1 生物样品制备及低拷贝数重组病毒差异化PCR方法第115-122页
        5.4.2 单个重组病毒分选和测序的实验研究第122-123页
    5.5 低拷贝数重组病毒分选与定量检测的实验结果与讨论第123-137页
        5.5.1 确定MNV病毒基因组上发生病毒重组的区域第123-126页
        5.5.2 亲代病毒MNV-1 和WU20浓度测定结果第126-129页
        5.5.3 用于低拷贝数重组病毒扩增的RT-PCR参数优化第129-130页
        5.5.4 重组病毒的鉴定结果第130-131页
        5.5.5 人工重组病毒分析第131-133页
        5.5.6 真实重组病毒频率分析第133-134页
        5.5.7 重组病毒的桑格测序分析第134-137页
    5.6 本章小结第137-138页
结论第138-141页
参考文献第141-152页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第152-155页
致谢第155-156页
个人简历第156页

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