摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
1.1 马铃薯概述 | 第9-10页 |
1.2 国内外发展现状 | 第10-11页 |
1.2.1 国外发展现状 | 第10页 |
1.2.2 国内发展现状 | 第10-11页 |
1.3 马铃薯病毒的种类、影响及传播方式 | 第11-14页 |
1.3.1 病毒的种类 | 第12-13页 |
1.3.2 病毒对马铃薯的影响 | 第13-14页 |
1.3.3 马铃薯病毒的传播方式 | 第14页 |
1.4 脱毒技术 | 第14-17页 |
1.4.1 茎尖剥离脱毒法 | 第14-15页 |
1.4.2 热处理脱毒法 | 第15-16页 |
1.4.3 化学药剂处理脱毒法 | 第16-17页 |
1.4.4 热处理结合茎尖剥离脱毒法 | 第17页 |
1.4.5 茎尖剥离结合化学药剂法 | 第17页 |
1.5 病毒的检测 | 第17-20页 |
1.5.1 指示植物法 | 第18页 |
1.5.2 酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第18-19页 |
1.5.3 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的种类及其应用 | 第19-20页 |
1.6 研究的目的及意义 | 第20-22页 |
1.7 技术路线 | 第22-23页 |
第二章 马铃薯脱毒方法的研究 | 第23-41页 |
2.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
2.1.1 供试材料 | 第23页 |
2.1.2 试剂 | 第23-24页 |
2.2 试验方法 | 第24-27页 |
2.2.1 培养基的制作 | 第24页 |
2.2.2 马铃薯脱毒苗侵染培养 | 第24-26页 |
2.2.3 茎尖剥离法 | 第26页 |
2.2.4 热处理脱毒法 | 第26页 |
2.2.5 病毒唑处理法 | 第26页 |
2.2.6 热处理结合茎尖剥离法 | 第26-27页 |
2.2.7 茎尖剥离结合病毒唑法 | 第27页 |
2.2.8 统计数据 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-39页 |
2.3.1 不同脱毒方法对四种病毒的脱毒效果比较 | 第27-37页 |
2.3.2 单一病毒的五种脱毒方法的比较 | 第37-39页 |
2.4 小结 | 第39-41页 |
2.4.1 不同脱毒方法对四种病毒的脱毒效果的比较 | 第39-40页 |
2.4.2 同一种病毒的不同脱毒方法的脱毒效果的比较 | 第40-41页 |
第三章 m-RT-PCR病毒检测技术 | 第41-50页 |
3.1 试材与设备 | 第41-42页 |
3.1.1 试验材料 | 第41页 |
3.1.2 试剂 | 第41-42页 |
3.1.3 仪器 | 第42页 |
3.2 试验方法 | 第42-46页 |
3.2.1 RNA提取 | 第42-43页 |
3.2.2 引物设计与稀释保存 | 第43-44页 |
3.2.3 RNA反转录 | 第44页 |
3.2.4 PCR扩增 | 第44页 |
3.2.5 梯度PCR反应条件筛选 | 第44-45页 |
3.2.6 多重RT-PCR反应体系及反应条件 | 第45页 |
3.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-49页 |
3.3.1 RNA提取 | 第46页 |
3.3.2 温度梯度反应 | 第46-47页 |
3.3.3 dNTP浓度梯度反应体系 | 第47-48页 |
3.3.4 Mg2+浓度梯度反应体系 | 第48页 |
3.3.5 多重RT-PCR反应体系 | 第48-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
第四章 结论与讨论 | 第50-53页 |
4.1 结论 | 第50页 |
4.2 讨论 | 第50-53页 |
4.2.1 两种热处理温度的选择 | 第50-51页 |
4.2.2 单一脱毒以及复合脱毒中病毒唑的使用 | 第51页 |
4.2.3 单一脱毒与复合脱毒对4种病毒脱毒效果比较 | 第51-52页 |
4.2.4 不同脱毒方法对4种病毒脱毒效果比较 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录A | 第58-59页 |
作者简介 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |