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马铃薯脱毒方法与多重RT-PCR病毒检测技术的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 文献综述第9-23页
    1.1 马铃薯概述第9-10页
    1.2 国内外发展现状第10-11页
        1.2.1 国外发展现状第10页
        1.2.2 国内发展现状第10-11页
    1.3 马铃薯病毒的种类、影响及传播方式第11-14页
        1.3.1 病毒的种类第12-13页
        1.3.2 病毒对马铃薯的影响第13-14页
        1.3.3 马铃薯病毒的传播方式第14页
    1.4 脱毒技术第14-17页
        1.4.1 茎尖剥离脱毒法第14-15页
        1.4.2 热处理脱毒法第15-16页
        1.4.3 化学药剂处理脱毒法第16-17页
        1.4.4 热处理结合茎尖剥离脱毒法第17页
        1.4.5 茎尖剥离结合化学药剂法第17页
    1.5 病毒的检测第17-20页
        1.5.1 指示植物法第18页
        1.5.2 酶联免疫吸附测定(ELISA)第18-19页
        1.5.3 反转录聚合酶链反应(RT-PCR)的种类及其应用第19-20页
    1.6 研究的目的及意义第20-22页
    1.7 技术路线第22-23页
第二章 马铃薯脱毒方法的研究第23-41页
    2.1 材料与试剂第23-24页
        2.1.1 供试材料第23页
        2.1.2 试剂第23-24页
    2.2 试验方法第24-27页
        2.2.1 培养基的制作第24页
        2.2.2 马铃薯脱毒苗侵染培养第24-26页
        2.2.3 茎尖剥离法第26页
        2.2.4 热处理脱毒法第26页
        2.2.5 病毒唑处理法第26页
        2.2.6 热处理结合茎尖剥离法第26-27页
        2.2.7 茎尖剥离结合病毒唑法第27页
        2.2.8 统计数据第27页
    2.3 结果与分析第27-39页
        2.3.1 不同脱毒方法对四种病毒的脱毒效果比较第27-37页
        2.3.2 单一病毒的五种脱毒方法的比较第37-39页
    2.4 小结第39-41页
        2.4.1 不同脱毒方法对四种病毒的脱毒效果的比较第39-40页
        2.4.2 同一种病毒的不同脱毒方法的脱毒效果的比较第40-41页
第三章 m-RT-PCR病毒检测技术第41-50页
    3.1 试材与设备第41-42页
        3.1.1 试验材料第41页
        3.1.2 试剂第41-42页
        3.1.3 仪器第42页
    3.2 试验方法第42-46页
        3.2.1 RNA提取第42-43页
        3.2.2 引物设计与稀释保存第43-44页
        3.2.3 RNA反转录第44页
        3.2.4 PCR扩增第44页
        3.2.5 梯度PCR反应条件筛选第44-45页
        3.2.6 多重RT-PCR反应体系及反应条件第45页
        3.2.7 琼脂糖凝胶电泳第45-46页
    3.3 结果与分析第46-49页
        3.3.1 RNA提取第46页
        3.3.2 温度梯度反应第46-47页
        3.3.3 dNTP浓度梯度反应体系第47-48页
        3.3.4 Mg2+浓度梯度反应体系第48页
        3.3.5 多重RT-PCR反应体系第48-49页
    3.4 小结第49-50页
第四章 结论与讨论第50-53页
    4.1 结论第50页
    4.2 讨论第50-53页
        4.2.1 两种热处理温度的选择第50-51页
        4.2.2 单一脱毒以及复合脱毒中病毒唑的使用第51页
        4.2.3 单一脱毒与复合脱毒对4种病毒脱毒效果比较第51-52页
        4.2.4 不同脱毒方法对4种病毒脱毒效果比较第52-53页
参考文献第53-58页
附录A第58-59页
作者简介第59-60页
致谢第60页

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