| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一部分 理论研究 | 第13-21页 |
| 第一章 小檗碱降糖作用机制研究 | 第13-16页 |
| 1 糖尿病的现代学认识 | 第13页 |
| 2 中医学对糖尿病的认识 | 第13页 |
| 3 小檗碱降糖作用机理 | 第13-16页 |
| 3.1 改善IR,增加胰岛素敏感性 | 第13-14页 |
| 3.2 促进葡萄糖吸收 | 第14页 |
| 3.3 抑制糖异生 | 第14-15页 |
| 3.4 改善胰岛β细胞功能 | 第15页 |
| 3.5 通过抗氧化降糖 | 第15页 |
| 3.6 通过调血脂降糖 | 第15-16页 |
| 4 展望 | 第16页 |
| 第二章 脂肪组织获得性免疫细胞对胰岛素抵抗的影响 | 第16-21页 |
| 1 VAT中获得性免疫细胞与IR | 第16-19页 |
| 1.1 T淋巴细胞与IR | 第16-18页 |
| 1.1.1 CD4~+T细胞 | 第16-17页 |
| 1.1.1.1 Th1细胞 | 第16-17页 |
| 1.1.1.2 Th2细胞 | 第17页 |
| 1.1.1.3 Th17细胞 | 第17页 |
| 1.1.1.4 调节性T细胞(Treg) | 第17页 |
| 1.1.2 CD~+8 T细胞 | 第17-18页 |
| 1.1.3 CD40~+T细胞 | 第18页 |
| 1.1.4 自然杀伤T(natural killer T-cells,NKT)细胞 | 第18页 |
| 1.2 B淋巴细胞 | 第18-19页 |
| 2 脂肪因子对获得性免疫细胞的影响 | 第19-20页 |
| 2.1 瘦素 | 第19页 |
| 2.2 脂联素 | 第19页 |
| 2.3 抵抗素 | 第19-20页 |
| 2.4 内脂素 | 第20页 |
| 2.5 白介素-7(IL-7) | 第20页 |
| 3 问题与展望 | 第20-21页 |
| 第二部分 实验研究 | 第21-46页 |
| 第一章 小檗碱依赖于Sirt1激活AMPK通路改善3T3-L1脂肪细胞的糖代谢 | 第21-36页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第21-22页 |
| 1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 1.3 药物与溶液配制 | 第22-23页 |
| 1.3.1 药物配制 | 第22页 |
| 1.3.2 溶液配制 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.1 3T3-L1前脂肪细胞复苏与传代 | 第23-28页 |
| 2.1.1 实验所用细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 3T3-L1前脂肪细胞复苏 | 第23页 |
| 2.1.3 3T3-L1前脂肪细胞传代 | 第23-24页 |
| 2.1.4 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化 | 第24页 |
| 2.1.5 3T3-L1脂肪细胞细胞模型的建立与分组 | 第24-25页 |
| 2.1.5.1 3T3-L1脂肪细胞用Sirt1抑制剂处理分组 | 第24页 |
| 2.1.5.2 3T3-L1脂肪细胞用LV1-Sirt1处理分组 | 第24-25页 |
| 2.1.5.3 留取3T3-L1脂肪细胞培养上清液 | 第25页 |
| 2.1.6 实时定量PCR | 第25-26页 |
| 2.1.6.1 3T3-L1脂肪细胞RNA提取 | 第25页 |
| 2.1.6.2 将RNA逆转录为cDNA | 第25页 |
| 2.1.6.3 real time PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.1.7 3T3-L1脂肪细胞蛋白提取 | 第26页 |
| 2.1.8 免疫蛋白印记分析 | 第26-27页 |
| 2.1.9 免疫共沉淀 | 第27-28页 |
| 2.1.10 葡萄糖消耗实验 | 第28页 |
| 2.1.11 统计分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 小檗碱显著上调3T3-L1脂肪细胞中Sirt1基因和蛋白表达 | 第28-30页 |
| 3.2 小檗碱部分通过Sirt1增加3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗 | 第30-32页 |
| 3.3 小檗碱部分通过Sirt1激活AMPK通路 | 第32-33页 |
| 3.4 小檗碱部分通过Sirt1增加PGC-1α去乙酰化 | 第33页 |
| 4 讨论 | 第33-36页 |
| 第二章 小檗碱通过Sirt1改善TNF-α刺激下的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗 | 第36-46页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| 1.1 实验材料和试剂 | 第36页 |
| 1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 1.3 药物与溶液配制 | 第36-37页 |
| 1.3.1 药物配制 | 第36-37页 |
| 1.3.2 溶液配制 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-40页 |
| 2.1 实验所用细胞 | 第37页 |
| 2.2 3T3-L1前脂肪细胞传代 | 第37页 |
| 2.3 3T3-L1前脂肪细胞诱导分化 | 第37页 |
| 2.4 3T3-L1脂肪细胞细胞模型的建立与分组 | 第37-38页 |
| 2.4.1 3T3-L1脂肪细胞用Sirt1抑制剂处理分组 | 第37-38页 |
| 2.4.2 3T3-L1脂肪细胞用LV1-Sirt1处理分组 | 第38页 |
| 2.5 3T3-L1脂肪细胞蛋白提取 | 第38页 |
| 2.6 免疫蛋白印记分析 | 第38-39页 |
| 2.7 葡萄糖摄取实验 | 第39-40页 |
| 2.8 统计分析 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-43页 |
| 3.1 BBR部分通过Sirt1恢复TNF-α抑制的3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取 | 第40-41页 |
| 3.2 BBR部分通过Sirt1恢复TNF-α抑制的AKT磷酸化活性改善IR | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 攻读硕士期间取得的学术成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
