摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 综述 | 第9-15页 |
1.1 难愈性创面的治疗现状 | 第10-14页 |
1.1.1 创面难愈的发生机制 | 第10-11页 |
1.1.2 MSCs及其上清液治疗难愈性创面和皮肤病的进展 | 第11-12页 |
1.1.3 蛋白质制剂的稳定性研究 | 第12-14页 |
1.2 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 hUC-MSCs的分离与培养 | 第15-28页 |
2.1 实验材料及仪器 | 第15-16页 |
2.1.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.2 仪器设备 | 第15-16页 |
2.2 实验前准备 | 第16页 |
2.2.1 脐带保存液的配制 | 第16页 |
2.2.2 脐带采集 | 第16页 |
2.3 MSCs的分离培养及冻存复苏 | 第16-19页 |
2.4 MSCs的检测及鉴定 | 第19-21页 |
2.5 结果 | 第21-26页 |
2.5.1 MSCs的镜下观察 | 第21-22页 |
2.5.2 MSCs的无菌检测 | 第22页 |
2.5.3 MSCs的支原体检测 | 第22页 |
2.5.4 MSCs的流式表型检测 | 第22-26页 |
2.6 讨论 | 第26-28页 |
第三章 MSCM的制备 | 第28-34页 |
3.1 实验材料及仪器 | 第28-29页 |
3.1.1 实验材料 | 第28页 |
3.1.2 主要仪器设备 | 第28-29页 |
3.2 实验方法 | 第29-31页 |
3.2.1 BCA法测定MSCM蛋白质浓度 | 第29-30页 |
3.2.2 细胞饥饿法收集MSCM | 第30页 |
3.2.3 选择不同代次不同饥饿时间收集MSCM | 第30页 |
3.2.4 实验结果统计方法 | 第30-31页 |
3.3 实验结果 | 第31-33页 |
3.3.1 MSCM蛋白质浓度测定 | 第31页 |
3.3.2 MSCM的收集 | 第31页 |
3.3.3 不同代次不同饥饿时间的MSCM蛋白质含量比较 | 第31-33页 |
3.4 讨论 | 第33-34页 |
第四章 MSCM的有效性和稳定性研究 | 第34-53页 |
4.1 实验材料及仪器 | 第34-35页 |
4.1.1 实验材料 | 第34页 |
4.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
4.2 MSCM的有效性实验 | 第35-38页 |
4.3 MSCM的稳定性实验 | 第38-41页 |
4.3.1 不同温度环境下MSCM的稳定性实验 | 第39页 |
4.3.2 加入海藻糖后不同温度环境下MSCM的稳定性实验 | 第39-40页 |
4.3.3 将MSCM制成冻干粉后的稳定性实验 | 第40-41页 |
4.4 结果 | 第41-49页 |
4.4.1 CCK-8细胞增殖实验结果 | 第41-43页 |
4.4.2 划痕实验结果 | 第43-45页 |
4.4.3 稳定性实验结果 | 第45-49页 |
4.5 讨论 | 第49-53页 |
第五章 结论与展望 | 第53-54页 |
5.1 结论 | 第53页 |
5.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |