摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 益生菌在水产养殖中的应用 | 第12-19页 |
1 益生菌概述 | 第12-13页 |
1.1 益生菌的定义 | 第12页 |
1.2 水产养殖常用益生菌 | 第12-13页 |
2 益生菌的作用机制 | 第13-15页 |
2.1 竞争排斥作用 | 第13页 |
2.2 营养作用 | 第13-14页 |
2.3 增强机体免疫力 | 第14页 |
2.4 抗病毒作用 | 第14页 |
2.5 净化水质 | 第14-15页 |
3 假交替单胞菌属 | 第15-18页 |
3.1 假交替单胞菌概述 | 第15-16页 |
3.2 假交替单胞菌的生态学研究意义 | 第16页 |
3.2.1 防治水产病害 | 第16页 |
3.2.2 形成生物被膜防治污损发生 | 第16页 |
3.2.3 防治赤潮 | 第16页 |
3.3 假交替单胞菌分泌的生物活性物质 | 第16-18页 |
3.3.1 小分子活性物质 | 第17页 |
3.3.2 大分子活性物质 | 第17-18页 |
4 本论文研究目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 假交替单胞菌m8和a22抑菌组分分析 | 第19-27页 |
1 实验材料 | 第19-20页 |
1.1 菌株 | 第19-20页 |
1.2 培养基 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-22页 |
2.1 胞外产物(ECP)的制备 | 第20页 |
2.2 胞内产物(ICP)的制备 | 第20页 |
2.3 胞外产物及胞内产物抑菌活性检测 | 第20-21页 |
2.4 不同培养时间对菌株胞外抑菌蛋白的影响 | 第21页 |
2.5 胞外产物(ECP)总量白含量测定 | 第21-22页 |
2.5.1 标准蛋白(BSA)稀释液的制备 | 第21-22页 |
2.5.2 WR工作试剂的制备 | 第22页 |
2.5.3 测定方法 | 第22页 |
3 实验结果 | 第22-25页 |
3.1 胞外产物及胞内产物抑菌活性检测 | 第22-23页 |
3.2 不同培养时间对菌株胞外抑菌蛋白的影响 | 第23-24页 |
3.3 48h内胞外产物(ECP)总蛋白量随时间的变化趋势 | 第24-25页 |
4 小结 | 第25页 |
5 讨论 | 第25-27页 |
第三章 假交替单胞菌m8和a22胞外产物相关性质研究 | 第27-37页 |
1 实验材料 | 第27-28页 |
1.1 菌株 | 第27-28页 |
1.2 培养基 | 第28页 |
2 实验方法 | 第28-29页 |
2.1 过氧化氢酶对胞外产物抑菌活性的影响 | 第28页 |
2.2 胞外产物产生过氧化氢的检测 | 第28-29页 |
2.3 胞外蛋白的变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及胶内抑菌活性检测 | 第29页 |
2.3.1 胞外蛋白SDS-PAGE检测 | 第29页 |
2.3.2 胶内抑菌活性检测 | 第29页 |
2.4 抑菌蛋白条带的质谱分析 | 第29页 |
3 实验结果 | 第29-34页 |
3.1 过氧化氢酶对胞外产物抑菌活性的影响 | 第29-30页 |
3.2 过氧化氢的检测 | 第30-31页 |
3.3 胞外蛋白的SDS-PAGE以及胶内抑菌实验 | 第31页 |
3.4 抑菌蛋白条带的质谱分析 | 第31-34页 |
4 小结 | 第34页 |
5 讨论 | 第34-37页 |
第四章 菌株a22抑菌蛋白的重组表达 | 第37-49页 |
1 实验材料与方法 | 第37页 |
1.1 菌株以及质粒 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-44页 |
2.1 基因克隆 | 第37-39页 |
2.2 重组表达载体的构建 | 第39-42页 |
2.3 重组载体的检测 | 第42页 |
2.4 重组载体的诱导表达、产物活性检测及SDS-PAGE | 第42-44页 |
3 实验结果 | 第44-46页 |
3.1 基因PCR扩增 | 第44页 |
3.2 重组载体的构建和测序 | 第44-45页 |
3.3 抑菌蛋白重组表达及活性检测 | 第45-46页 |
4.小结 | 第46页 |
5. 讨论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |