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假交替单胞菌胞外产物的特性分析及其抑菌蛋白的克隆与表达

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
引言第11-12页
第一章 益生菌在水产养殖中的应用第12-19页
    1 益生菌概述第12-13页
        1.1 益生菌的定义第12页
        1.2 水产养殖常用益生菌第12-13页
    2 益生菌的作用机制第13-15页
        2.1 竞争排斥作用第13页
        2.2 营养作用第13-14页
        2.3 增强机体免疫力第14页
        2.4 抗病毒作用第14页
        2.5 净化水质第14-15页
    3 假交替单胞菌属第15-18页
        3.1 假交替单胞菌概述第15-16页
        3.2 假交替单胞菌的生态学研究意义第16页
            3.2.1 防治水产病害第16页
            3.2.2 形成生物被膜防治污损发生第16页
            3.2.3 防治赤潮第16页
        3.3 假交替单胞菌分泌的生物活性物质第16-18页
            3.3.1 小分子活性物质第17页
            3.3.2 大分子活性物质第17-18页
    4 本论文研究目的和意义第18-19页
第二章 假交替单胞菌m8和a22抑菌组分分析第19-27页
    1 实验材料第19-20页
        1.1 菌株第19-20页
        1.2 培养基第20页
    2 实验方法第20-22页
        2.1 胞外产物(ECP)的制备第20页
        2.2 胞内产物(ICP)的制备第20页
        2.3 胞外产物及胞内产物抑菌活性检测第20-21页
        2.4 不同培养时间对菌株胞外抑菌蛋白的影响第21页
        2.5 胞外产物(ECP)总量白含量测定第21-22页
            2.5.1 标准蛋白(BSA)稀释液的制备第21-22页
            2.5.2 WR工作试剂的制备第22页
            2.5.3 测定方法第22页
    3 实验结果第22-25页
        3.1 胞外产物及胞内产物抑菌活性检测第22-23页
        3.2 不同培养时间对菌株胞外抑菌蛋白的影响第23-24页
        3.3 48h内胞外产物(ECP)总蛋白量随时间的变化趋势第24-25页
    4 小结第25页
    5 讨论第25-27页
第三章 假交替单胞菌m8和a22胞外产物相关性质研究第27-37页
    1 实验材料第27-28页
        1.1 菌株第27-28页
        1.2 培养基第28页
    2 实验方法第28-29页
        2.1 过氧化氢酶对胞外产物抑菌活性的影响第28页
        2.2 胞外产物产生过氧化氢的检测第28-29页
        2.3 胞外蛋白的变性聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及胶内抑菌活性检测第29页
            2.3.1 胞外蛋白SDS-PAGE检测第29页
            2.3.2 胶内抑菌活性检测第29页
        2.4 抑菌蛋白条带的质谱分析第29页
    3 实验结果第29-34页
        3.1 过氧化氢酶对胞外产物抑菌活性的影响第29-30页
        3.2 过氧化氢的检测第30-31页
        3.3 胞外蛋白的SDS-PAGE以及胶内抑菌实验第31页
        3.4 抑菌蛋白条带的质谱分析第31-34页
    4 小结第34页
    5 讨论第34-37页
第四章 菌株a22抑菌蛋白的重组表达第37-49页
    1 实验材料与方法第37页
        1.1 菌株以及质粒第37页
    2 实验方法第37-44页
        2.1 基因克隆第37-39页
        2.2 重组表达载体的构建第39-42页
        2.3 重组载体的检测第42页
        2.4 重组载体的诱导表达、产物活性检测及SDS-PAGE第42-44页
    3 实验结果第44-46页
        3.1 基因PCR扩增第44页
        3.2 重组载体的构建和测序第44-45页
        3.3 抑菌蛋白重组表达及活性检测第45-46页
    4.小结第46页
    5. 讨论第46-49页
参考文献第49-56页
附录第56-57页
致谢第57页

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