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紫白菜与紫茄花色苷生物合成及光调控的分子机理研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-9页
缩略词表第15-17页
1 绪论第17-57页
    1.1 花色苷的研究背景第17-54页
        1.1.1 花色苷的结构和性质第18-19页
        1.1.2 花色苷在植物中的生理功能第19-23页
        1.1.3 花色苷的毒理性研究第23页
        1.1.4 花色苷的健康价值第23-28页
        1.1.5 花色苷的生物合成途径第28-37页
        1.1.6 花色苷生物合成的分子调控机理第37-51页
        1.1.7 花色苷生物合成的环境调控第51-54页
    1.2 课题的提出及研究意义第54页
    1.3 课题的研究内容与技术路线第54-55页
        1.3.1 课题的研究内容第54-55页
        1.3.2 课题的技术路线第55页
    1.4 课题的创新点第55-57页
2 紫白菜花色苷合成的分子机理研究第57-101页
    2.1 引言第57页
    2.2 材料、试剂与仪器第57-67页
        2.2.1 实验材料第57-59页
        2.2.2 仪器与设备第59-60页
        2.2.3 试剂与培养基第60-67页
    2.3 实验方法第67-82页
        2.3.1 基因组DNA提取第67-68页
        2.3.2 总RNA提取第68页
        2.3.3 c DNA合成第68页
        2.3.4 Br MYB1、Br MYB2、Br MYB3和Br TT8基因的克隆第68-72页
        2.3.5 Br MYB1、Br MYB2、Br MYB3和Br TT8基因的序列分析第72页
        2.3.6 花色苷合成结构和调控基因的表达模式研究第72-75页
        2.3.7 Br TT8基因的过表达载体构建第75-78页
        2.3.8 p BI121- Br TT8质粒导入农杆菌第78-79页
        2.3.9 Br TT8基因过表达番茄的培育第79页
        2.3.10 Br TT8基因过表达阳性株系的筛选第79-80页
        2.3.11 Br TT8在转基因番茄中的表达水平分析第80页
        2.3.12 植物总花色苷的提取及含量测定第80-81页
        2.3.13 花色苷特定成分含量和结构的测定第81页
        2.3.14 在番茄中过表达Br TT8基因对番茄花色苷合成的影响第81-82页
    2.4 结结果与分析第82-98页
        2.4.1 小白菜花色苷成分鉴定及含量的测定第82-83页
        2.4.2 花色苷合成结构基因与调控基因在紫白菜与绿白菜中成熟叶中的表达分析第83-84页
        2.4.3 光照和暗处理对小白菜生长发育和花色苷合成的影响第84页
        2.4.4 光照和暗处理对小白菜花色苷合成及调控基因表达的影响第84-85页
        2.4.5 花色苷合成调控基因Br TT8、Br MYB1、Br MYB2和Br MYB3的序列分析第85-88页
        2.4.6 Br TT8过表达载体的构建第88-89页
        2.4.7 异源表达Br TT8的转基因番茄的培育及筛选第89-90页
        2.4.8 Br TT8在转基因番茄中的异源表达水平分析第90-92页
        2.4.9 Br TT8的异源表达能够激活番茄花色苷的积累第92-93页
        2.4.10 Br TT8的异源表达能够激活番茄部分花色苷合成基因的转录第93-98页
    2.5 本章结论第98-101页
3 强光诱导的转基因番茄叶和果实花色苷着色的分子机理研究第101-135页
    3.1 引言第101页
    3.2 材料、试剂与仪器第101页
        3.2.1 材料第101页
        3.2.2 仪器与设备第101页
        3.2.3 试剂与培养基第101页
    3.3 实验方法第101-112页
        3.3.1 Br TT8转基因与野生型番茄幼苗的弱光与强光处理方法第101页
        3.3.2 Br TT8与其他花色苷合成调控蛋白的互作研究第101-107页
        3.3.3 Sl AN2与Br TT8共表达载体的构建第107-111页
        3.3.4 p BI121-Br TT8-Sl AN2共表达载体质粒转化农杆菌第111页
        3.3.5 Br TT8与Sl AN2共表达转基因番茄的培育第111页
        3.3.6 Br TT8与Sl AN2在转基因株系中的表达检测第111页
        3.3.7 转基因番茄总花色苷的提取第111页
        3.3.8 q PCR分析Br TT8与Sl AN2共表达对花色苷合成结构基因的表达影响第111-112页
        3.3.9 花色苷成分及含量的测定第112页
    3.4 结果与分析第112-134页
        3.4.1 异源表达Br TT8的转基因番茄的表型分析第112-113页
        3.4.2 强光和弱光对转基因与野生型番茄幼苗的花色苷生物合成的调控第113-114页
        3.4.3 强光和弱光处理下对转基因与野生型番茄幼苗的花色苷生物合成基因的表达分析第114-116页
        3.4.4 强光和弱光处理下对转基因与野生型番茄幼苗的花色苷生物合成调控基因的表达分析第116-119页
        3.4.5 强光处理不同时间下转基因番茄幼苗的花色苷积累的分析第119-120页
        3.4.6 强光处理不同时间下转基因番茄幼苗的花色苷合成结构基因表达水平的动力学分析第120-122页
        3.4.7 强光处理不同时间下转基因番茄幼苗的花色苷合成调控基因表达水平的动力学分析第122-124页
        3.4.8 露地栽培的转基因与野生型番茄果实的花色苷积累分析第124-126页
        3.4.9 露地栽培的转基因与野生型番茄果实不同部位花色苷合成结构基因表达分析第126页
        3.4.10 露地栽培的转基因与野生型番茄果实不同部位花色苷合成调控基因表达分析第126-127页
        3.4.11 露地栽培的转基因番茄花色苷合成机理分析与模型建立第127-128页
        3.4.12 露地栽培的转基因番茄花色苷合成推测机理的验证第128-129页
        3.4.13 番茄内源花色苷调控基因与Br TT8之间的蛋白互作研究第129-130页
        3.4.14 番茄内源花色苷调控基因Sl AN2与Br TT8共表达的功能研究第130-133页
        3.4.15 强光诱导Br TT8转基因番茄叶与果实花色苷积累的分子模型第133-134页
    3.5 本章结论第134-135页
4 紫茄果实花色苷合成的分子机理研究第135-159页
    4.1 引言第135页
    4.2 材料、试剂与仪器第135页
        4.2.1 材料第135页
        4.2.2 仪器与设备第135页
        4.2.3 试剂与培养基第135页
    4.3 实验方法第135-141页
        4.3.0 紫茄果实表皮花色苷成分及含量的测定第135页
        4.3.1 紫茄与白茄花色苷合成与调控基因的表达分析第135-137页
        4.3.2 Sm MYB1基因过表达载体的构建第137-139页
        4.3.3 p BI121- Sm MYB1质粒转化农杆菌第139页
        4.3.4 Sm MYB1过表达转基因茄子的培育第139-140页
        4.3.5 Sm MYB1及花色苷合成相关基因在转基因茄子株系中的表达检测第140页
        4.3.6 转基因茄子总花色苷的提取第140页
        4.3.7 光照与黑暗处理对紫茄果实表皮花色苷合成的影响第140-141页
        4.3.8 光照与黑暗处理的紫茄果实表皮花色苷合成相关基因的表达分析第141页
        4.3.9 Sm COP1和Sm COP1L基因的克隆第141页
        4.3.10 Sm MYB1与光信号传递抑制蛋白Sm COP1和Sm COP1L的互作研究第141页
    4.4 结结果与分析第141-156页
        4.4.1 紫茄果实表皮花色苷成分及定量分析第141-142页
        4.4.2 花色苷合成结构基因在紫茄与白茄果实中的检测第142-143页
        4.4.3 花色苷合成调控基因在紫茄与白茄果实中的表达分析第143页
        4.4.4 花色苷合成调控基因在紫茄中的克隆与序列分析第143-147页
        4.4.5 Sm MYB1在紫茄不同组织部位的表达分析第147-149页
        4.4.6 Sm MYB1的过表达激活花色苷在野生茄子中的大量合成第149-152页
        4.4.7 黑暗与光照条件下花色苷积累分析第152页
        4.4.8 黑暗与光照条件处理的紫茄果实花色苷合成结构基因表达分析第152-153页
        4.4.9 黑暗与光照条件处理的紫茄果实花色苷合成结构基因表达分析第153-154页
        4.4.10 Sm MYB1与可能的光形态建成抑制蛋白的互作研究第154-156页
    4.5 本章结论第156-159页
5 转基因非洲红茄花色苷合成机理及抗冻性研究第159-171页
    5.1 引言第159页
    5.2 材料、试剂与仪器第159页
        5.2.1 材料第159页
        5.2.2 仪器与设备第159页
        5.2.3 试剂与培养基第159页
    5.3 实验方法第159-160页
        5.3.1 转基因非洲红茄花色苷成分及含量的测定第159页
        5.3.2 花色苷合成及调控基因在转基因与野生非洲红茄株系中的表达检测第159页
        5.3.3 转基因与野生非洲红茄冻害抗性分析第159-160页
    5.4 结果与分析第160-169页
        5.4.0 转基因茄子花色苷积累情况分析第160页
        5.4.1 转基因茄子紫色果肉中的花色苷成分分离及鉴定第160-161页
        5.4.2 转基因茄子果肉中的花色苷代谢途径分析第161-163页
        5.4.3 转基因与野生茄子不同组织花色苷含量的分析检测第163页
        5.4.4 Sm MYB1在转基因与野生茄子不同组织部位的表达分析第163-165页
        5.4.5 花色苷合成结构基因在野生与转基因茄子中的表达分析第165-167页
        5.4.6 花色苷合成调控基因在野生与转基因茄子中的表达分析第167-168页
        5.4.7 野生与转基因茄子幼苗抗冻性分析第168-169页
    5.5 本章结论第169-171页
6 结论与展望第171-173页
    6.1 主要结论第171-172页
    6.2 展望第172-173页
致谢第173-175页
参考文献第175-211页
附录第211-213页
    A. 作者在攻读博士学位期间发表的论文目录第211-212页
    B. 作者在攻读博士学位期间专利情况第212-213页
    C. 作者在攻读博士学位期间主持和参加的科研项目第213页
    D. 作者在在攻读博士学位期间获得的奖励第213页

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