摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第11-15页 |
1 朱砂叶螨简介 | 第11页 |
2 叶螨与寄主植物相互作用 | 第11-12页 |
3 高通量测序技术简介及应用 | 第12页 |
4 植物介导的RNAi技术简介及应用 | 第12-15页 |
第二章 朱砂叶螨寄主转换后表达谱分析 | 第15-31页 |
1 材料与方法 | 第15-20页 |
1.1 供试虫源 | 第15页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第15-16页 |
1.3 朱砂叶螨取食豇豆和棉花(8h和50d)总RNA提取 | 第16-17页 |
1.4 总RNA质量检测 | 第17页 |
1.5 朱砂叶螨数字基因表达谱测序流程及信息分析 | 第17-18页 |
1.6 荧光定量PCR技术验证表达谱测序准确性 | 第18-20页 |
2 结果与分析 | 第20-29页 |
2.1 朱砂叶螨总RNA质量检测 | 第20-21页 |
2.2 朱砂叶螨表达谱测序质量评估 | 第21-23页 |
2.3 朱砂叶螨表达谱差异基因统计 | 第23-24页 |
2.4 荧光定量PCR验证表达谱测序准确性 | 第24-26页 |
2.5 差异基因功能注释 | 第26-27页 |
2.6 差异基因GO功能显著性富集分析 | 第27-28页 |
2.7 差异基因KEGG功能注释 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 朱砂叶螨适应取食棉花相关基因筛选及相关基因cDNA克隆 | 第31-53页 |
第一节 朱砂叶螨适应取食棉花相关基因筛选 | 第31-33页 |
1 材料与方法 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
第二节 朱砂叶螨4条相关基因cDNA克隆 | 第33-49页 |
1 材料与方法 | 第33-36页 |
1.1 供试朱砂叶螨 | 第33页 |
1.2 主要试剂与仪器 | 第33-34页 |
1.3 朱砂叶螨总RNA提取 | 第34页 |
1.4 朱砂叶螨总RNA质量检测 | 第34页 |
1.5 朱砂叶螨4条相关基因cDNA序列扩增 | 第34-36页 |
2 结果与分析 | 第36-48页 |
2.1 总RNA提取 | 第37页 |
2.2 朱砂叶螨4条相关基因cDNA扩增结果 | 第37-44页 |
2.3 朱砂叶螨4条相关基因生物信息学分析 | 第44-48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
第三节 朱砂叶螨长期取食棉花后4条基因表达水平检测 | 第49-53页 |
1 材料与方法 | 第49-50页 |
1.1 供试虫源 | 第49页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第49-50页 |
1.3 朱砂叶螨取食豇豆和长期取食棉花总RNA提取 | 第50页 |
1.4 总RNA质量检测 | 第50页 |
1.5 朱砂叶螨4条相关基因qPCR引物设计 | 第50页 |
1.6 定量反转录合成cDNA | 第50页 |
1.7 实时荧光定量PCR | 第50页 |
2 结果与讨论 | 第50-53页 |
2.1 朱砂叶螨4条相关基因引物试扩和标准曲线绘制 | 第50-51页 |
2.2 定量结果分析与讨论 | 第51-53页 |
第四章 植物介导RNAi技术转基因棉培育及效果评价 | 第53-65页 |
第一节 转基因植株培育 | 第53-57页 |
1 材料与方法 | 第53-55页 |
1.1 供试材料 | 第53页 |
1.2 宿主菌株和载体 | 第53页 |
1.3 主要仪器和试剂 | 第53-54页 |
1.4 两条P450基因互补DNA序列筛选 | 第54页 |
1.5 表达载体构建 | 第54-55页 |
1.6 转基因植株GUS组织染色 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
第二节 转基因植株效果评估 | 第57-65页 |
1 材料与方法 | 第57-58页 |
1.1 供试虫源 | 第57页 |
1.2 供试药剂和仪器 | 第57页 |
1.3 朱砂叶螨取食常规棉和转基因棉后总RNA提取 | 第57-58页 |
1.4 总RNA质量检测 | 第58页 |
1.5 两条P450基因qPCR引物设计 | 第58页 |
1.6 定量反转录合成cDNA | 第58页 |
1.7 实时荧光定量PCR | 第58页 |
1.8 朱砂叶螨种群生命表统计(叶碟法) | 第58页 |
2 结果与分析 | 第58-62页 |
2.1 朱砂叶螨取食转基因棉24h后定量检测 | 第58-59页 |
2.2 朱砂叶螨长期取食转基因棉后定量检测 | 第59-60页 |
2.3 转基因棉抗螨效果评价 | 第60-62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
第五章 展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
在读期间发表的论文 | 第77页 |