| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 嗜水气单胞菌简介 | 第13页 |
| 1.2 嗜水气单胞菌的危害与控制 | 第13-14页 |
| 1.3 疫苗免疫途径 | 第14-16页 |
| 1.3.1 注射免疫 | 第14-15页 |
| 1.3.2 浸入式免疫 | 第15页 |
| 1.3.3 口服免疫 | 第15-16页 |
| 1.4 碳纳米管 | 第16-17页 |
| 1.4.1 碳纳米管简介 | 第16页 |
| 1.4.2 碳纳米管的性能 | 第16-17页 |
| 1.5 碳纳米管功能化修饰 | 第17-19页 |
| 1.5.1 碳纳米管的共价修饰 | 第17-18页 |
| 1.5.2 碳纳米管的非共价修饰 | 第18-19页 |
| 1.6 碳纳米管在生物医学方面的应用 | 第19-21页 |
| 1.6.1 药物转运 | 第19-20页 |
| 1.6.2 基因转运 | 第20-21页 |
| 1.6.3 蛋白转运 | 第21页 |
| 1.7 选题的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 嗜水气单胞菌aerA的原核表达及SWCNTs-aerA疫苗的构建 | 第23-37页 |
| 2.1 材料 | 第23页 |
| 2.1.1 菌种和载体 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 嗜水气单胞菌aerA基因的扩增与回收 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组克隆质粒的构建与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组表达载体的构建与鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.4 嗜水气单胞菌aerA蛋白的原核表达 | 第26-27页 |
| 2.2.5 碳纳米管载aerA亚单位疫苗的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.6 碳纳米管载aerA亚单位疫苗系统合成效果检测 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-35页 |
| 2.3.1 嗜水气单胞菌aerA基因的扩增与鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 嗜水气单胞菌aerA基因原核表达载体酶切和测序鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.3 嗜水气单胞菌aerA蛋白的原核表达 | 第30-32页 |
| 2.3.4 嗜水气单胞菌aerA蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.3.5 重组蛋白的Western blot鉴定 | 第33页 |
| 2.3.6 碳纳米管载aerA亚单位疫苗系统构建 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 碳纳米管载aerA疫苗免疫保护性研究 | 第37-45页 |
| 3.1 材料 | 第37页 |
| 3.1.1 菌种与动物 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37页 |
| 3.2 方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 实验鱼的处理及安全性评估 | 第37-38页 |
| 3.2.2 半数致死量的确定 | 第38页 |
| 3.2.3 疫苗的免疫方式及程序 | 第38页 |
| 3.2.4 抗体效价的检测 | 第38页 |
| 3.2.5 免疫相关基因表达测定 | 第38-39页 |
| 3.2.6 攻毒试验 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 安全性评估 | 第40页 |
| 3.3.2 半数致死量的确定 | 第40页 |
| 3.3.3 抗体效价检测 | 第40-41页 |
| 3.3.4 免疫相关基因表达测定 | 第41-42页 |
| 3.3.5 免疫保护效果 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 碳纳米管载aerA疫苗对草鱼肠道菌群的影响 | 第45-52页 |
| 4.1 试验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 菌株及鱼种 | 第45页 |
| 4.1.2 主要设备及仪器 | 第45页 |
| 4.2 试验方法 | 第45-46页 |
| 4.2.1 样本的采集及DNA提取 | 第45页 |
| 4.2.2 PCR扩增 | 第45-46页 |
| 4.2.3 Illumina MiSeq测序 | 第46页 |
| 4.2.4 数据分析 | 第46页 |
| 4.3 试验结果 | 第46-51页 |
| 4.3.1 样本测序数据统计分析 | 第46-47页 |
| 4.3.2 基于OTU的统计分析 | 第47-48页 |
| 4.3.3 肠道菌群多样性分析 | 第48-49页 |
| 4.3.4 菌群分类组成分析 | 第49-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51页 |
| 4.5 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-65页 |
| 附录 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
